Базофилы повышены у грудничка: причины, анализ крови, что делать

Содержание

причины, анализ крови, что делать

Базофилами называют группу лейкоцитов, имеющих большие размеры и гранулярную структуру. В крови человека таких элементов немного, однако для здоровья они очень важны, поэтому, если базофилы повышены у ребенка, оставлять такое состояние без внимания нельзя. Необходимо знать конкретные причины, которые привели к изменению этого показателя.

Что такое базофилы, как они работают? 

В кровяном русле постоянно находится большое количество разнообразных частиц, в том числе и разные группы лейкоцитов, у каждой из которых свое назначение. Основной целью базофилов является распознавание в организме инородных агентов и частиц, которые могут быть потенциально опасными для здоровья. После распознавания эти тельца привлекают большое количество других частиц крови, в том числе и лимфоцитов, которые способны уничтожить подозрительный объект.

Если базофилы повышены у ребенка, необходимо провести обследование

Формирование этих клеток крови происходит в тканях костного мозга, но от общего количества лейкоцитов базофилы составляют не более 1%. В кровяное русло эти частицы проникают уже через два часа после образования, а затем разносятся по органам и тканям тела. Срок жизни каждой такой клетки составляет всего 11–12 дней, что совсем немного. Но при этом они необходимы для сохранения здоровья и участвуют во многих важных процессах, в частности:

  • способствуют улучшению кровотока, нормализуя передвижение крови по сосудам и ускоряя при необходимости;
  • помогают формировать новые капилляры, что способствует лучшему насыщению тканей различными питательными веществами и кислородом;
  • защищают стенки кишечника;
  • помогают в перемещении по руслу крови другим видам лейкоцитов;
  • обязательно участвуют во всех проявлениях аллергии и в любых процессах воспалительного характера.

Причины увеличения показателя 

Если при проведении исследования в крови малыша обнаруживается повышение концентрации базофилов, необходимо точно установить фактор, который привел к подобной ситуации и принять адекватные меры. Чаще всего повышенное содержание этих частиц может быть вызвано наличием в организме малыша гельминтов, развивающейся инфекции, скоплением токсических соединений, проникновением аллергенов. Однако провоцировать увеличение концентрации могут и некоторые заболевания, например:

  • разнообразные патологии и заболевания крови, в том числе лейкемия миелоидного характера;
  • активный воспалительный процесс, как явный, так и скрытый;
  • болезни инфекционного характера;
  • негативное воздействие разных видов излучений – в частности, концентрация частиц может несколько увеличиться после проведения обычного рентгеновского обследования;
  • развитие аллергической реакции при проникновении в организм того или иного раздражителя;
  • нарушения в работе разных видов желез, относящихся к эндокринной системе;
  • анемии любого вида.

Повышенное содержание базофилов определяется при общем анализе крови

Если базофилы повышены у ребенка, необходимо обратиться к доктору, пройти всестороннее обследование и точно установить факторы, которые спровоцировали возникновение подобной ситуации. Следует правильно поставить диагноз и точно установить то, о чем это говорит, чтобы принять необходимые меры и своевременно помочь малышу. Откладывать проведение обследования нельзя.

Как расценивать повышенное содержание этих клеток 

В развернутом исследовании анализов крови указывается весьма значительный перечень показателей содержания разных видов кровяных телец, каждый из которых отвечает за свою сферу. Кроме базофильных элементов важное значение имеют и тромбоциты, отвечающие за скорость свертывания крови и предотвращение кровотечений при получении каких-либо повреждений тела и органов. Если при расшифровке анализа доктор сообщает, что у ребенка на фоне других показателей тромбокрит повышен, это указывает на опасность образования тромбов внутри сосудов, что также нельзя оставлять без внимания.

Как правило, многие показатели крови имеют очень тесную связь между собой. При увеличении концентрации базофилов нередко отмечаются изменения уровня содержания и других клеток. Очень часто в такой ситуации повышаются и эритроциты, что указывает на наличие в организме активно развивающегося воспалительного процесса.

Для разных возрастов существуют свои нормы базофилов:

  • для младенцев – 0,75%;
  • для годовалых малышей – 0,6%;
  • для подросткового периода – 0,7%;
  • для взрослых оптимальным значением считается от 0,5% до 1%.

Как правило, высокий показатель базофилов является симптомом воспалительного процесса или серьезной аллергической реакции. В такой ситуации костный мозг начинает активно вырабатывать защитные клетки крови для распознавания инородных элементов и их нейтрализации. Сопровождается этот процесс увеличением температуры тела, ощущением жжения, появлением отечности тканей, гиперемией. Чем дольше развивается патогенный процесс, тем выше будет число клеток-защитников в проводимом анализе.

Причины повышения базофилов могут быть разными

Одновременно могут возрастать и моноциты, а также значение СОЭ и эозинофилов, что может указывать не только на воспаление, но и на наличие гнойного процесса, туберкулеза или гепатита. Концентрация эозинофилов обычно повышается при аллергических реакциях, а очень высокие значения этих клеток нередко указывают на развитие отека Квинке.

Что делать? 

Не нужно впадать в панику, если в результатах очередных плановых анализов малыша обнаружено увеличение концентрации базофилов и других кровяных клеток. Сначала необходимо разобраться и установить факторы, которые привели к подобному нарушению. У многих детей в период активного развития уровень этого компонента всегда слегка повышен, что связано с постоянным образованием в теле новых капилляров. Иногда нарушение может вызвать прием определенных лекарств.

Назначать лечение при необходимости должен только квалифицированный врач, однако многие специалисты рекомендуют в такой ситуации внести некоторые изменения в питание ребенка, добавив в меню продукты с высоким содержанием витамина В12, например яиц, кисломолочной продукции, свежего молока, нежирного мяса и печени.

Смотрите далее: повышение нейтрофилов у ребенка

Лейкоцитарная формула крови. Показатели, норма и расшифровка результатов анализа


Дифференцированный подсчет лейкоцитов (лейкоцитарная формула) может назначаться при плановых обследованиях, диагностике заболеваний, а также для контроля проводимой терапии.

Стоимость услуги…


Фагоцитарная активность лейкоцитов напрямую влияет на уровень сопротивления организма чужеродной микрофлоре.

Узнать больше…


Изменение содержания лейкоцитов в крови может быть следствием целого ряда факторов, а также свидетельствовать о наличии заболевания.

Подробнее об обследовании…


Некоторые лаборатории могут предложить бесплатную консультацию специалиста по оказываемым услугам.

Записаться…



Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверным, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.

Как подготовиться?



Сэкономьте на медицинских услугах, став участником специальной дисконтной программы.

Узнать больше…


Контроль качества клинических лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, – весомый аргумент при выборе лаборатории.

Подробнее…

Лейкоциты играют важнейшую роль в организме — они обеспечивают защиту от различных вредных микроорганизмов, поглощая и обезвреживая чужеродные частицы. Поэтому, наблюдая за поведением этих клеток, можно обнаружить любой воспалительный процесс. Для комплексной диагностики состояния лейкоцитов в крови существует специальный анализ — лейкоцитарная формула (лейкоформула). Давайте разберемся, насколько полезным может быть это исследование.

Показатели лейкоформулы: норма содержания

Лейкоцитарная формула представляет собой соотношение нескольких видов лейкоцитов. Часто исследование назначают вместе с общим анализом крови. Нейтрофилы, базофилы, эозинофилы, моноциты, лимфоциты — эти белые кровяные тельца и являются объектом наблюдения. Рассмотрим подробнее каждую из составляющих анализа.

Нейтрофилы служат для обеспечения безопасности организма. Они способны распознавать вредоносные бактерии, захватывая и уничтожая их. Наличие базофилов в крови обусловливает появление различных аллергических реакций — эти клетки не позволяют вредным ядам и токсинам распространяться по всей кровеносной системе. Эозинофилы защищают нас от всевозможных паразитов, обеспечивая противопаразитарный иммунитет. Функции моноцитов совпадают с функциями нейтрофилов с тем лишь отличием, что фагоцитарная способность первых частиц выше, к тому же они не только устраняют вредные микроорганизмы, но и поглощают погибшие лейкоциты, очищая кровь, тем самым давая тканям возможность регенерировать. Лимфоциты способны распознавать и запоминать различные антигены, обеспечивая противовирусный и противоопухолевый иммунитет.

Общее количество лейкоцитов в крови у здорового человека приведено в таблице:

Возраст

Концентрация лейкоцитов
тыс./мкл (103 клеток/мкл)

1 день — 12 месяцев

6,0 — 17,5

12 месяцев — 2 года

6,0 — 17,0

2 — 4 года

5,5 — 15,5

4 года — 6 лет

5,0 — 14,5

6 — 10 лет

4,50 — 13,5

10 — 16 лет

4,50 — 13,0

16 и более лет

4,50 — 11,0

Помимо общей лейкоцитарной формулы существуют так называемые лейкоцитарные индексы — исследование соотношений разных типов белых кровяных телец в крови. Одним из наиболее распространенных является лейкоцитарный индекс интоксикации, он служит для определения тяжести воспалительного процесса. Помимо него существуют индексы аллергизации, иммунореактивности и другие.

Для того чтобы выяснить соотношение белых кровяных телец в крови, врач назначает специальный анализ, результатом которого и является лейкоформула.

Как проводится анализ крови на определение лейкоцитарной формулы

Использование лейкоцитарной формулы для однозначной диагностики заболеваний довольно затруднительно, ведь соотношение частиц при различных патологических процессах в организме часто схоже. Полученные данные обычно применяют для отслеживания динамики заболевания и уровня эффективности лечения.

Подготовка к забору крови на анализ не слишком сложная — пациенту достаточно отказаться от приема пищи не менее чем за 4 часа до процедуры, а накануне лучше избегать серьезных физических и эмоциональных нагрузок.

Материалом для определения лейкоцитарной формулы служит венозная кровь. Перед процедурой лаборант специальным ремешком пережимает предплечье пациента, а потом вводит в вену в локтевом сгибе тонкую иглу, по которой кровь попадет непосредственно в пробирку. Конечно, нельзя назвать этот процесс совершенно безболезненным, но обычно он вызывает лишь слабые или умеренные болевые ощущения. Каплю полученной крови переносят на стеклянную пластинку, чтобы с помощью микроскопа определить количество и соотношение лейкоцитов. Если клиника оснащена современным оборудованием, то подсчет частиц ведет специальный аппарат — анализатор, а необходимость человеческого вмешательства возникает лишь в том случае, если результат показал сильные отклонения от нормы или наличие аномальных частиц.

Скорость получения результата анализа зависит от учреждения, в котором проводят исследование, но чаще всего это занимает не более нескольких дней. Оценку полученных значений проводит лечащий врач.

Расшифровка анализа с лейкоцитарной формулой

Существует несколько критериев, по которым специалист оценивает состояние крови и соотношение лейкоцитов.

Сдвиг лейкоцитарной формулы влево и вправо

Исследование нейтрофилов в мазке крови имеет особое значение. Врач делает вывод о наличии или скорости развития патологии, исходя не только из их количества. Не последнюю роль играет «возраст» клеток, в частности, преобладание «молодых» форм нейтрофилов над «зрелыми» или наоборот. Сдвигом результат анализа называется потому, что запись формулы крови подчинена определенному порядку — сначала идет учет молодых форм нейтрофилов, а затем более зрелых клеток в порядке возрастания. Таким образом, при возникновении дисбаланса показатели «сдвигаются» в ту или иную сторону.

Увеличение количества «молодых» нейтрофилов означает сдвиг лейкоцитарной формулы влево и может означать наличие различных патологических процессов в организме. Он указывает на воспаление, некротические процессы в тканях, инфекционные заболевания, отравление пищей или газом, а также проявляется при приеме различных медикаментов. Но сдвиг лейкоформулы влево не обязательно свидетельствует о патологии — временный дисбаланс клеток может возникать после тяжелых физических нагрузок и довольно быстро приходит в норму.

Обратная ситуация, то есть сдвиг лейкоцитарной формулы вправо, означает преобладание зрелых нейтрофилов над молодыми. Такое распределение белых кровяных телец свидетельствует о лучевой болезни, недостатке витамина B12, а также о болезнях печени и почек. Сдвиг вправо характерен для пациентов, в недавнем времени перенесших переливание крови.

Повышение показателей

Увеличение числа нейтрофилов в крови может быть признаком множества заболеваний, а также различных специфических состояний пациента. Этот эффект можно наблюдать при возникновении инфекционных болезней, в том числе и грибковых (например, кандидоз), ревматизме, повышении уровня глюкозы в крови при диабете, наличии раковых опухолей любой локализации, отравлениях свинцом или ртутью. Также большое количество нейтрофилов в крови наблюдается после тяжелых эмоциональных, физических, болевых нагрузок, а также под влиянием экстремально низких или высоких температур.

Превышение нормы лимфоцитов служит свидетельством наличия инфекционного заболевания, патологий крови, отравления свинцом или мышьяком, а также может быть последствием приема некоторых лекарственных препаратов.

После перенесенного инфекционного заболевания в крови пациента повышен уровень моноцитов. Также такое состояние крови характерно для людей с аутоиммунными заболеваниями, злокачественными опухолями и при отравлении тетрахлорэтаном и фосфором.

Интересный факт
Перед тем как погибнуть, лейкоциты способны передавать специфический сигнал об опасности находящимся рядом клеткам. К такому выводу пришли ученые из Австралии, проанализировавшие поведение клеток с помощью специального устройства, способного делать несколько сотен снимков в секунду.

Повышенный уровень эозинофилов наблюдается при аллергии на антибиотики, лекарства от туберкулеза и судорожных состояний, паразитарной инвазии, некоторых патологиях кожи и легких, остром течении инфекционного заболевания.

Грипп, ветряная оспа, туберкулез — эти заболевания способны вызвать повышение в крови количества базофилов. Помимо этого концентрация белых кровяных телец данного типа возрастает при аллергических реакциях, язвенном колите, в результате гиперчувствительности к каким-либо пищевым продуктам, а также может указывать на наличие раковых опухолей в организме.

Понижение показателей

Если концентрация нейтрофилов в крови существенно снижена, то врач может диагностировать одно из инфекционных заболеваний (брюшной тиф, туберкулез), повышенную чувствительность к медикаментам (антибиотики, антигистаминные и противовоспалительные препараты), анемию и анафилактический шок.

Лимфоциты в лейкоцитарной формуле имеют сниженные показатели при иммунодефицитных состояниях, острых воспалительных процессах в организме, почечной недостаточности и системной красной волчанке. Кроме этого, увеличение количества частиц свойственно людям, подвергшимся влиянию рентгенологического излучения.

Не менее серьезными причинами бывает вызвано снижение количества моноцитов в анализе крови. К причинам относятся онкогематологические заболевания, пиогенные инфекции и апластическая анемия. К тому же эффект в виде уменьшения количества моноцитов вызывает прием некоторых лекарственных препаратов и состояние сильного шока.

Самое начало воспаления можно диагностировать, если уровень эозинофилов значительно понижен. Также это случается при тяжелом протекании гнойной инфекции и при отравлении тяжелыми металлами.

Беременность, сильный стресс и период овуляции могут быть естественными причинами уменьшения количества базофилов в крови. Среди патологических причин присутствуют инфекционные заболевания и синдром Кушинга.

Лейкоцитарная формула помогает врачу диагностировать и отслеживать уровень эффективности лечения при аллергических реакциях, воспалениях, различных болезнях крови и других патологиях. Имея такие преимущества, как высокая точность, объективность и воспроизводимость, анализ по праву может считаться одним из самых показательных методов исследования крови. Провести процедуру в домашних условиях невозможно, поэтому для определения соотношения разных видов лейкоцитов в крови, следует обратиться в медицинское учреждение.


Повышены базофилы в крови у ребенка, отсутствие базофилов: причины

Белые клетки в крови ребенка представлены несколькими видами. Одним из них являются базофилы, название которых обусловлено окрашиванием лейкоцитов специальными красителями. Такие форменные элементы хоть и содержатся в периферической крови в небольшом проценте, но очень важны для поддержания здоровья ребенка. В чем же заключается их функция, какой уровень базофилов у здоровых детей и почему он может меняться?

Зачем нужны базофилы

Такой вид лейкоцитов относится к гранулоцитам вместе с нейтрофилами и эозинофилами, так как внутри этих клеток присутствуют гранулы.

В базофилах в этих гранулах находятся соединения, среди которых есть гистамин, простагландины, серотонины и многие другие вещества, участвующие в воспалительных и аллергических реакциях.

Такие клетки недолго пребывают в крови (всего несколько часов), после чего оседают в тканях и находятся там примерно 10-14 дней. После перехода из кровеносного русла в ткани базофилы называют «гистиоциты» либо «тучные клетки».

Базофильные лейкоциты активно участвуют в аллергии немедленного типа (анафилактических реакциях). Кроме того, благодаря содержанию гепарина базофилы имеют значение для регуляции свертываемости крови. Попадая к месту воспаления, сталкиваясь с аллергеном, инфекционным агентом или токсином, базофильные лейкоциты выделяют в кровоток содержимое своих гранул, в результате чего повышается проницаемость сосудов, усиливается кровоток и привлекаются другие гранулоциты.

У базофилов также имеется способность к поглощению чужеродных частиц.

Норма у детей

Базофилы в анализе крови ребенка определяют в составе лейкоцитарной формулы (ее также называют лейкограммой), поэтому такие клетки в бланке анализа представлены в процентах от всех лейкоцитов. Нормальным содержанием базофилов у ребенка любого возраста, как у новорожденного, так у дошкольника или подростка, считают 0-1%. Если учитывать абсолютное число таких клеток, то нормой будет 0,01-0,065 х 10

9/л.

Повышенный уровень

Когда у детей повышены базофилы, это называют базофилией либо базофилоцитозом. При таком состоянии абсолютное количество базофильных лейкоцитов будет превышать 0,2 х 109/л.

Причины

Наиболее частой причиной повышенного числа базофилов в крови ребенка является аллергическая реакция, например, на укус насекомого, употребление определенной пищи или прием лекарственного препарата. При этом базофилии не будет в острый период, так как эти лейкоциты в ответ на воздействие аллергена покидают кровоток и переходят в ткани.

Также базофилы повышаются при многих хронических патологиях и при заражении глистами. Длительный воспалительный процесс или аллергия выступают факторами, которые активизируют образование базофилов в костном мозге и повышенное их поступление в кровоток.

Повышенный процент базофилов встречается при таких заболеваниях, как:

  • Гипотиреоз.
  • Хронический синусит.
  • Нефротический синдром.
  • Полицитемия.
  • Язвенный колит.
  • Гепатит.
  • Хронический лейкоз.
  • Ветряная оспа.
  • Лимфогранулематоз.
  • Синдром Иценко-Кушинга.
  • Гемолитическая анемия.
  • Опухолевые процессы.
  • Сахарный диабет.
  • Отравления.

Если ребенок лечился гормональными препаратами, базофилы в его анализе тоже будут повышены. Кроме того, увеличение этих лейкоцитов бывает спровоцировано удалением селезенки, воздействием невысоких доз ионизирующей радиации или дефицитом железа.

Что делать

Если у ребенка содержание базофильных лейкоцитов превышает 1% от всех белых телец крови, то малыша следует показать врачу. Педиатр оценит общее состояние ребенка, жалобы и другие параметры анализа крови, после чего будет искать причину повышенных базофилов (в первую очередь – аллергию или воспалительный процесс).

Как только такая причина будет обнаружена, ребенку назначат лечение, в процессе которого уровень базофилов нормализуется. К примеру, если базофилия спровоцирована лекарственными средствами, после их отмены уровень базофильных лейкоцитов опустится менее 1%. Также врач порекомендует добавить в рацион продукты, из которых ребенок будет получать достаточно витамина В12 (яйца, субпродукты, мясо и другие).

Отсутствие базофилов

Снижение процента базофильных лейкоцитов в лейкограмме у многих детей считается вариантом нормы. Если результат анализа крови ребенка показывает полное отсутствие базофилов, это не считается врачами каким-либо диагностически важным критерием. Подобная картина наблюдается при стрессе, в период выздоровления после инфекционных болезней, после химиотерапии или при эндокринных патологиях, однако изменения при таких заболеваниях не будут ограничиваться лишь базофилопенией.

Рекомендуем к просмотру запись программы доктора Комаровского, посвященную клиническому анализу крови ребенка:

В заключение

У ребенка норма базофилов постоянно меняется в зависимости от возраста, и это нормально. Любые отклонения от нормы у детей не должны оставаться без внимания, даже если отсутствуют жалобы. Чем раньше установить причины и поставить диагноз, тем эффективнее будет лечение и быстрее наступит выздоровление.

Базофилы повышены у ребенка: причины, признаки и лечение

Не занимайтесь самолечением. При первых признаках заболевания обращайтесь к врачу.

Специфической клинической картины того, что базофилы повышены у ребенка, нет. Характер симптоматики будет зависеть от первопричинного фактора, поэтому родителям необходимо обращаться за медицинской помощью, а не проводить симптоматическое лечение на свое усмотрение.

Диагностика основывается на лабораторном анализе крови. В зависимости от его результатов будет определена дальнейшая диагностическая программа и лечение. Прогноз носит индивидуальный характер.

О том, что повышены базофилы, говорят тогда, когда их численность больше допустимой нормы по возрасту: как у новорожденных детей, так и у малышей более старшего возраста оптимальным количеством будет не более 1% в лейкоцитарной формуле. Абсолютное содержание базофилов (абс) – 0,01-0,065 х 109/л.

Патологические причины превышения границы:

  • хронический синусит;
  • гипотиреоз;
  • нефротический синдром;
  • неспецифический язвенный колит;
  • полицитемия;
  • хронический лейкоз;
  • ветряная оспа и другие инфекционные заболевания;
  • синдром Иценко-Кушинга;
  • гемолитическая анемия;
  • онкологические заболевания;
  • сахарный диабет;
  • аллергические реакции;
  • паразитарные заболевания.

Причины того, что базофилы повышенные, из-за чего и произошло повышение количества клеток в лейкоцитарной формуле, могут быть обусловлены другими факторами, которые не являются отдельными заболеваниями:

  • прием гормональных препаратов;
  • неправильное питание;
  • перенесенные накануне инфекционные или воспалительные заболевания;
  • дефицит железа.

Причины повышения количества базофилов могут быть и генетически обусловленными – при наличии врожденных заболеваний, которые действуют на кроветворную систему опосредованно.

Специфической клинической картины такой патологический процесс не имеет.

Собирательный симптоматический комплекс может включать в себя следующие признаки:

  • плохой аппетит;
  • сонливость, апатичное настроение;
  • субфебрильная или повышенная температура тела;
  • нарушение со стороны функционирования желудочно-кишечного тракта;
  • нарушение цикла сна – ребенок плохо спит ночью, долго не может уснуть, часто просыпается;
  • высыпания на теле;
  • повышенное слезотечение, ринит;
  • симптоматика ОРВИ;
  • общее недомогание, слабость.

Такие симптомы имеют самые разные причины – от простой простуды до сложного инфекционного заболевания или отравления. Поэтому родителям следует как можно скорее обратиться к врачу, а не проводить лечение самостоятельно.

Определить количество базофилов можно путем проведения общего клинического анализа крови. Забор жидкости осуществляется из пальца.

Правила забора капиллярной крови

Чтобы получить достоверные анализы ОАК, родителям необходимо правильно подготовить малыша к процедуре:

  • не кормить ребенка в день сдачи анализа;
  • проследить за тем, чтобы предшествующие сутки малыш не испытывал физических или эмоциональных нагрузок;
  • если ребенок принимает какие-либо медикаменты, то надо согласовать с врачом вопрос отмены их на сутки.

В момент сдачи крови ребенок должен пребывать в спокойном физическом и эмоциональном состоянии, поэтому родителям лучше предварительно провести беседу и объяснить, что будет делать врач, и зачем это нужно.

По результатам ОАК врач определит дальнейшие диагностические мероприятия и назначит лечение. Если будет установлено, что количество базофилов существенно выше нормы, то назначается повторный общий анализ крови и БАК.

Препаратов, действие которых было бы направлено именно на понижение количества базофилов, не существует.

Поэтому лечение будет проводиться только комплексно:

  • прием медикаментов, действие которых направлено на устранение первопричинного фактора;
  • диетическое питание;
  • физиотерапевтические процедуры, лечение в учреждениях санаторно-курортного типа.

Прогноз будет носить индивидуальный характер и зависеть от формы первопричинного патологического процесса, степени тяжести его течения, общих показателей здоровья ребенка.

В качестве профилактики следует проводить мероприятия по предотвращению заболеваний, которые входят в этиологический перечень, а также по укреплению иммунной системы ребенка. Нелишним будет систематически проходить медицинский осмотр раз в полгода.

Сохранить в закладки:

Базофилия: значение, симптомы и причины

Базофилия — это когда в крови человека слишком много базофилов. Базофилы — это разновидность белых кровяных телец.

Базофилия не является заболеванием сама по себе, но может быть важным маркером других основных медицинских проблем.

Поделиться на Pinterest Базофилия обычно указывает на наличие другого основного заболевания.

У здоровых людей базофилы составляют минимальное количество клеток организма.Однако у людей с базофилией аномально высокое количество базофилов.

Базофилы — это белые кровяные тельца, вырабатываемые костным мозгом. Лейкоциты помогают организму бороться с инфекциями.

Высокий уровень лейкоцитов может указывать на иммунный ответ в организме, который защищает его от инфекций и других проблем. Однако, когда у человека есть базофилия, увеличение лейкоцитов может быть вызвано более серьезными причинами.

Базофилия редко существует независимо и чаще всего указывает на наличие другого состояния.

Наиболее частые причины базофилии включают:

  • инфекции
  • аллергии
  • расстройства и заболевания, характеризующиеся хроническим воспалением
  • миелопролиферативные расстройства

инфекции

Инфекции часто вызывают воспалительную реакцию в организме, которая может вызвать человек более склонен к развитию базофилии.

Однако развитие базофилии в результате острой инфекции или болезни встречается редко. Некоторые заболевания, в том числе ветряная оспа и туберкулез, могут повысить вероятность развития базофилии у человека.

Аллергия

Аллергия и аллергические реакции на продукты питания и лекарства могут вызывать базофилию. Серьезность аллергии или реакции может коррелировать с тяжестью базофилии.

Хроническое воспаление

Многие расстройства и заболевания напрямую связаны с хроническим воспалением. У человека с заболеванием, характеризующимся воспалением, может быть больше шансов заболеть базофилией.

К состояниям, вызывающим хроническое воспаление, относятся:

Миелопролиферативные расстройства

Миелопролиферативные расстройства заставляют костный мозг чрезмерно продуцировать различные типы клеток крови, включая базофилы.

Миелопролиферативные заболевания, которые могут вызывать базофилию, включают следующие:

  • эссенциальная тромбоцитемия
  • хронический миелогенный лейкоз
  • истинная полицитемия
  • Pinterest первичный миелофиброз
  • системный мастоцитоз
  • гиперэозинофильный синдром усталость, боли в животе и спазмы.

    Чрезмерно высокое количество базофилов может вызвать множество неспецифических симптомов.

    Базофилия может вызывать:

    • боль в животе и спазмы
    • зуд
    • необъяснимую потерю веса
    • усталость
    • лихорадку
    • недомогание или общее недомогание

    Однако симптомы у людей с базофилией могут быть разными в зависимости от их основного медицинского состояния.

    У людей с базофилией из-за инфекции наблюдаются симптомы инфекции, которые могут включать жар, усталость и недомогание.

    У человека с базофилией в результате аллергии будут типичные симптомы аллергии, в том числе:

    • чихание
    • насморк или заложенный нос
    • зуд в глазах
    • сыпь или крапивница
    • свистящее дыхание
    • опухоль

    Человек, который имеет базофилию в результате ВЗК может испытывать:

    • спазмы в животе
    • диарея
    • кровотечение из прямой кишки
    • боль в ректальной области

    Базофилия, вызванная состоянием, вызывающим хроническое воспаление, может вызывать такие симптомы, как:

    • усталость
    • боли в мышцах
    • отек
    • легкая лихорадка
    • онемение и покалывание в руках и ногах
    • кожные высыпания в случае псориаза

    Люди с базофилией в результате миелопролиферативного расстройства могут иметь различные симптомы в зависимости от того, какое заболевание у них есть. Симптомы могут включать:

    • слабость
    • головные боли
    • изменения зрения
    • легкое кровотечение и синяки
    • одышка
    • онемение или покалывание в руках и ногах
    • боль в костях

    Симптомы основных причин базофилии у всех разные. Людям с необъяснимыми симптомами, которые не проходят со временем, следует посетить врача.

    Врачи часто замечают базофилию во время общего анализа крови с дифференциалом (общий анализ крови с дифференциалом).Когда разница выявляет высокий уровень базофилов, врач, скорее всего, назначит дополнительные тесты, чтобы определить причину.

    Основываясь на других симптомах человека, эти тесты могут включать в себя комбинацию следующего:

    • анализы крови
    • биопсия костного мозга
    • УЗИ и визуализационные тесты
    • генетическое тестирование

    Базофилия сама по себе не вызывает осложнений, но основные причины базофилии могут. Осложнения зависят от причины базофилии и могут быть серьезными.

    К ним относятся следующие:

    • сильное кровотечение
    • увеличенная селезенка
    • частые инфекции

    Базофилию вряд ли можно лечить напрямую. Вместо этого лечение будет сосредоточено на основном заболевании человека.

    Бактериальные инфекции, вызывающие базофилию, требуют антибиотиков. Врач также может порекомендовать отдых и много жидкости.

    Лечение аллергии включает:

    • избегание аллергена
    • антигистаминные препараты
    • крем с гидрокортизоном
    • кортикостероиды
    • эпинефрин

    Лечение воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит и ВЗК, может включать иммунодепрессанты и иммунодепрессанты.

    Лечение миелопролиферативного заболевания, вероятно, будет сложным и будет варьироваться в зависимости от ситуации человека. Он может включать следующее:

    Перспективы людей с базофилией варьируются в зависимости от основной причины. Легкие инфекции должны исчезнуть после отдыха и лечения.

    Воспалительные заболевания и аллергии часто являются пожизненными состояниями, с которыми можно справиться с помощью лекарств и изменения образа жизни.

    Людям с базофилией, вызванной тяжелым заболеванием, например миелопролиферативным заболеванием, следует вместе с врачом разработать индивидуальный план лечения.

    Количество базофилов: Медсестринское дело 2020 Реанимационное отделение

    Отделение: Глядя в лаборатории

    DOI: 10.1097 / 01.CCN.0000559778.07144.9d

    Метрики

    Фон

    Базофилы, составляющие небольшой процент от общего количества лейкоцитов, считаются фагоцитарными. Базофильные гранулы содержат гепарин, гистамин и серотонин. Базофилы ткани называются тучными клетками и похожи на базофилы крови.Обычно тучные клетки не обнаруживаются в периферической крови и редко встречаются в здоровом костном мозге. Подсчет базофилов используется для оценки хронического воспаления. Существует положительная корреляция между высоким количеством базофилов и высокими концентрациями гистамина в крови, хотя эта корреляция не подразумевает причинно-следственных связей.

    Нормальные контрольные значения для взрослых

    • Абсолютное количество базофилов: от 15 до 50 / мм 3 или от 0,02 до 0,05 × 10 9 / л
    • Дифференциал: от 0% до 1.0% от общего количества лейкоцитов.

    Возможные причины базофилии

    (увеличенное количество) более 50 / мм 3 или более 0,05 × 10 9 / л

    • Гранулоцитарный (миелоцитарный) лейкоз
    • Острый базофильный лейкоз
    • миелоидная метаплазия, миелопролиферативные нарушения
    • Болезнь Ходжкина
    • реже ассоциируется с:
      • воспаление, аллергия или синусит
      • Истинная полицитемия
      • хроническая гемолитическая анемия
      • спленэктомия
      • ионизирующее излучение
      • гипотиреоз
      • инфекций, включая туберкулез, оспу, ветряную оспу, грипп
      • инъекция чужеродного белка.

    Возможные причины базопении

    (уменьшенное количество) <15 / мм 3 или <0,02 × 10 9 / л

    • острая инфекция
    • гипертиреоз
    • стрессовые реакции (например, беременность, инфаркт миокарда)
    • пролонгированная стероидная терапия, химиотерапия, лучевая терапия
    • наследственное отсутствие базофилов.

    Мешающие факторы

    Ложноположительные значения могут быть вызваны:

    • дезипрамин
    • пароксетин
    • третиноин
    • триазолам
    • венлафаксин.

    Ложноотрицательные значения могут быть вызваны:

    Источник: Fischbach FT, Fischbach MA. Руководство по лабораторным и диагностическим исследованиям . 10-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Уолтерс Клувер; 2018.

    Wolters Kluwer Health, Inc. Все права защищены. Просмотреть полный текст статьи

    Неонатальные базофилы подавляют функцию дендритных клеток в раннем возрасте, чтобы снизить Th2-иммунитет у новорожденных мышей

    Введение

    Самые ранние исследования иммунной системы новорожденных показали что воздействие Ag на новорожденных больше подходит для индукции толерантности, чем иммунитета (1–3).Хотя это понятие свидетельствует о плохом детском иммунитете и восприимчивости новорожденных к микробным инфекциям (4, 5), оно сталкивается с дилеммой в отношении чрезмерной чувствительности новорожденных к иммуноопосредованным аллергическим реакциям (6). С годами мы начали разгадывать эту загадку, и появились доказательства того, что слабая защита новорожденных от микробов связана с нехваткой Th2-клеток и преобладанием детской аллергии с избытком Th3-лимфоцитов (6, 7). Эти выводы, однако, были сделаны на основе исследований, которые были сосредоточены только на вторичных неонатальных реакциях, поскольку технические ограничения не позволяли иначе.В последнее время были разработаны модели, облегчающие анализ первичного иммунного ответа новорожденных (8–10). Мы использовали OVA 323-339 пептид (OVAp) -специфические трансгенные Т-клетки DO11.10 TCR для увеличения частоты ответных клеток и Ig-OVA, молекулу Ig, генетически сконструированную для переноса OVAp, для оптимизации презентации Ag (10). С помощью этих инструментов мы разработали систему переноса Т-клеток от новорожденного к новорожденному, которая была адаптирована для отслеживания Т-клеток in vivo, и проанализировали их первичные неонатальные реакции (10). Неожиданно полученные данные показали, что клетки Th2 и Th3 развиваются при первичном неонатальном ответе (11).Однако повторное испытание Ag приводит к апоптозу клеток Th2, отсюда смещение вторичного неонатального иммунитета к клеткам Th3 (11). Кроме того, апоптоз Th2 зависел от IL-4, поскольку нейтрализация этого цитокина восстанавливает вторичный иммунитет Th2 (11). Это было интригующим, потому что клетки Th2 обычно экспрессируют обычный IL-4R (IL-4Rα / common γ), через который IL-4 не передает сигнал (12). Впоследствии было обнаружено, что клетки Th2 активируют IL-13Rα1, и эта цепь связывается с IL-4Rα с образованием гетерорецептора IL-4Rα / IL-13Rα1 (HR) (11, 13).Хотя было показано, что HR влияет на иммунные ответы иначе, чем обычный IL-4R (14), у новорожденных HR маркирует клетки Th2 для апоптоза (11, 13) и поддерживает смещение вторичного иммунитета к клеткам Th3 (7 , 15). Слабый Th2-иммунитет у новорожденных происходит из-за повышенной регуляции IL-13Rα1, что коррелирует с недостатком в окружающей среде IL-12, цитокина, продуцируемого неонатальными дендритными клетками (ДК) во время презентации Ag (13, 16). Фактически, экзогенный IL-12 или обогащение DC из взрослых мышей предотвращает активацию IL-13Rα1 и экспрессию HR на первичных клетках Th2 (13, 16).Каким образом функция неонатальных ДК и их IL-12 ограничивается, что приводит к снижению неонатального иммунитета, остается неясным. Поскольку нарушение гена IL-13Rα1 сохраняет обычный IL-4R, но изменяет экспрессию HR, мы решили использовать IL-13Rα1-дефицитных мышей (17) для выяснения физиологического механизма, лежащего в основе нарушения функции цитокина IL-12, связанной с неонатальными ДК. В этой статье мы показываем, что новорожденные мыши с дефицитом IL-13Rα1 подавляют клетки Th3, но при этом приобретают способность развивать как первичный, так и вторичный иммунитет Th2.Это было связано с повышенной продукцией ИЛ-12 неонатальными ДК, но с минимальной секрецией ИЛ-4 базофилами (БА). Следовательно, дифференцировка Th3 была сокращена, тогда как развитие Th2 было усилено, что привело к искажению иммунитета новорожденного Th2 вместо Th3. Представлены доказательства, указывающие на то, что HR на неонатальных DC захватывает IL-4 из BA и ограничивает продукцию IL-12, обеспечивая активацию IL-13Rα1 и экспрессию HR на Th2-клетках. Это раскрывает еще одну парадигму, с помощью которой HR поддерживает неонатальный иммунитет.

    Материалы и методы

    Мыши

    Мышей BALB / c (H-2d) были приобретены у Harlan Sprague Dawley (Индианаполис, Индиана). DO11.10 / Rag2 — / — трансгенных мышей (H-2 d ), экспрессирующих OVA-специфический TCR, были описаны ранее (18). IL-13Rα1-дефицитные мыши, у которых экспрессия гена IL-13Rα1 была нарушена путем делеции экзонов 7, 8 и 9, были созданы в нашей лаборатории и были ранее описаны (17). IL-13Rα1 — / — DO11.10 / Rag2 — / — мышей были получены путем скрещивания мышей IL-13Rα1 — / — BALB / c с DO11.10 / Rag2 — / — мышей. Мыши MHC II — / — BALB / c (cAN 129 S6 [B6] Ii tm1 Liz — / — H-2d) были приобретены в лаборатории Джексона (Бар-Харбор, штат Мэн). Все мыши были выращены и содержались в нашем учреждении по уходу за животными на время экспериментов. Все экспериментальные процедуры выполнялись в соответствии с рекомендациями Комитета по уходу и использованию животных Университета Миссури.

    Ags

    OVAp (ISQAVHAAHAEINEAGR) включает аминокислотные остатки 323–339 OVA и является иммуногенным для мышей BALB / c (H-2 d ).В качестве отрицательного контроля использовали пептид гемагглютинина (НА) вируса гриппа, аминокислотные остатки 110–120 (SFERFEIFPKE). Оба пептида были приобретены у EZBiolab (Кармель, Индиана). IgW, молекула BALB / c IgG2b Ig, полученная путем трансфекции генов H и L-цепей антител против арсоната 91A3 в не-Ig-секретирующую линию B-клеток миеломы SP2 / 0, была описана ранее (11). Ig-OVA, экспрессирующий OVAp в V-области H-цепи IgW, также был описан ранее (10).

    Выделение CD4 T-клеток, DC, BA и общих предшественников BA / тучных клеток

    CD4 T-клеток.

    В клетках селезенки сначала удаляли DC с использованием микрогранул против CD11c (Miltenyi Biotech), а Т-клетки очищали путем положительной селекции на колонках с микрошариками против CD4.

    ДЦ.
    ДК

    очищали из селезенки (SP) неонатальных мышей IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + BALB / c путем положительной селекции на колонках с микрогранулами против CD11c (Miltenyi Biotec).

    БА, полученные из костного мозга.

    Клетки костного мозга (BM) (1 × 10 7 / мл) новорожденных и взрослых мышей IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + BALB / c инкубировали с rIL-3 ( 20 нг / мл) в течение 3 дней.Неприкрепленные клетки собирали и повторно культивировали с rIL-3 в течение 3 дней при плотности 1 × 10 6 / мл. Повторное культивирование неприлипающих клеток с rIL-3 в свежей среде повторяли еще раз, и затем клетки были истощены по клеткам CD11c + и CD11b + с помощью MACS (Miltenyi Biotec). Затем c-kit FcεR1α + BA были отсортированы на сортировщике клеток MoFloTM XDP (Beckman Coulter).

    Общие предшественники ВА / тучных клеток.

    BM-клетки новорожденных IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + BALB / c мышей культивировали в течение 5 дней с rIL-3, а затем метили анти-c-kit, анти-FcγRII / III и анти-β7 Abs.Клетки c-kit β7 hi FcγRII / III hi сортировали на сортировщике клеток MoFloTM XDP (Beckman Coulter).

    Приспособительный перенос Т-клеток и APC

    Перенос неонатальных Т-клеток.

    Суммарные клетки селезенки (3 × 10 6 ) из однодневных мышей IL-13Rα1 — / — или IL-13Rα1 + / + DO11.10 / Rag2 — / — мышей были перенесены в 1-дневные мыши IL-13Rα1 — / — или IL-13Rα1 + / + BALB / c путем в / в инъекция через лицевую вену с помощью иглы № 30, как описано ранее (10).

    Перенос неонатальных предшественников БА / тучных клеток.

    Очищенные общие предшественники BA / тучных клеток (BMCP) из неонатальных мышей IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — были перенесены (5 × 10 4 клеток / мышь) в 1-d- старые мыши MHC-II — / — или IL-13Rα1 — / — путем в / в инъекция через лицевую вену.

    Перевод неонатальных ДК.

    Очищенные DC из новорожденных IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — мышей были перенесены (3 × 10 4 клеток / мышь) в неонатальных мышей MHC-II — / — с помощью i .v. инъекция через лицевую вену.

    Комбинированный перенос неонатальных DC, BA и CD4 T-клеток.

    Очищенные BMCP (5 × 10 4 клеток / мышь) и неонатальные DC (3 × 10 4 клеток / мышь) из IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — мышей были перенесены с очищенными CD4 Т-клетками DO11.10 (5 × 10 4 клеток / мышь) в неонатальных мышей MHC-II — / — путем в / в инъекция через лицевую вену.

    Стимуляция ДК и БА in vitro

    ДК.

    Очищенные ДК новорожденных (3 × 10 5 клеток / лунка) и взрослых (5 × 10 5 клеток / лунка) стимулировали LPS (10 мкг / мл) или LPS + IL-4 (100 нг / мл. ) в течение 24 часов, и IL-12 в супернатанте культуры измеряли с помощью ELISA.

    БА.

    Клетки (1 × 10 5 клеток / лунку) стимулировали пептидогликаном (PGN; 10 мкг / мл) в течение 24 часов, и цитокины IL-4 и IL-13 в супернатанте культуры определяли с помощью ELISA.

    Проточная цитометрия

    Абс.

    Ат, используемые в этом исследовании, были приобретены у BD Pharmingen или eBioscience, и это анти-CD3 (500A2), анти-CD4 (RM4-5), анти-CD8 (53-6,7), F4 / 80 (BM8). , анти-c-Kit (CD117; 2B8), анти-CD11b (M1 / 70), анти-CD19 (1D3), анти-CD16 / 32 (2.4G2), анти-CD11c (HL3), анти-IL-4Rα (mIL-4R-M1), анти-FcεRII (B3B4), анти-Ly-6G (RB6-8C5), анти-Ly6-C (HK1.4), Siglec F (E50-24440), анти-IA b (NIMR-4), анти-CD80 (16-10A1), анти-CD86 (PO3.1), анти-FcεR1α (MAR-1), анти-TCR OVA (KJ1-26), анти-β7 интегрин (FIB27), анти-IL-4, анти-IFN-γ, анти-CD34 (RAM34) и анти-CD40 (3/23).

    Выявление БА и их предков.

    Для обнаружения BA и их предшественников в BM, периферической крови (PB) и SP из этих органов были приготовлены одноклеточные суспензии и окрашены смесью Abs против общего клона (CD4, CD8, CD19, CD11b, и CD11c) и клеточно-специфические маркеры. BA обозначены как Lin c-kit FcεR1α + , BAP как Lin CD34 + FcεRIα + c-kit , BMCPs как Lin c-kit — β7 hi FcγRII / III hi , общий предшественник миелоидных клеток (CPMC) как Lin IL-7Rα1 Sca1 c-kit + FcγRII / III 903 и Lo предшественники гранулоцитарных макрофагальных клеток (PGMC) как Lin IL-7Rα1 Sca1 c-kit + FcγRII / III hi .

    Размножение BA у новорожденных

    Новорожденным мышам вводили одну инъекцию rIL-3 (400 нг / мышь) в день 1 вместе с Ig-OVA. Еще одна инъекция только rIL-3 была сделана на 2 и 3 дни. Частоту БА в SP и крови анализировали с помощью проточной цитометрии.

    Истощение БА у новорожденных

    Новорожденным мышам вводили внутрибрюшинно. 0,5 мкг антител MAR-1 против FcεR1α на 1, 2 и 3 дни после рождения и частоту BA в SP и PB анализировали с помощью проточной цитометрии на 5 день.

    Анализ Т-клеточных ответов

    Ex vivo ответы.

    Через две недели после переноса Т-клеток и воздействия Ig-OVA (100 мкг / мышь) SP-клетки, содержащие как Т-клетки, так и APC, стимулировали в течение короткого периода (4 часа) 10 мкМ OVAp для увеличения накопления цитокинов в цитоплазма и облегчить внутриклеточное обнаружение. CD4 Т-клетки были помечены на поверхностный CD4 и TCR OVA путем окрашивания антителами против CD4 и KJ1-26, соответственно. Впоследствии клетки пермеабилизировали 0,2% сапонином и окрашивали на внутриклеточный IFN-γ и IL-4 цитокин-специфическими антителами.Производство цитокинов анализировали методом проточной цитометрии.

    Напомним ответы.

    Через две недели после переноса Т-клеток и воздействия Ig-OVA (100 мкг / мышь) клетки селезенки, содержащие как Т-клетки, так и APC, стимулировали 10 мкМ OVAp в течение 24 часов, а частоту цитокин-продуцирующих клеток определяли с помощью ELISPOT, тогда как количество цитокинов, секретируемых в супернатанте, определяли с помощью ELISA. В некоторых экспериментах с участием мышей MHC II — / — в культуру селезенки добавляли загруженные OVAp MHC II + / + BALB / c APC (2 × 10 5 клеток / лунку, в течение 24 часов) для переноса презентации пептида в виде остаточных APC (от переноса) было бы недостаточно для этой задачи.В других экспериментах культуру стимулируют PMA (50 нг / мл) и иономицином (500 нг / мл) в течение 4 часов.

    Дополнительные отзывы.

    Через два месяца после переноса Т-клеток и воздействия Ig-OVA (100 мкг / мышь) мышей заражали 125 мкг OVAp в CFA. Десять дней спустя SP (1 × 10 6 клеток / лунка) и лимфатический узел (LN; 5 × 10 5 клеток / лунка), содержащие как Т-клетки, так и APC, стимулировали 10 мкМ OVAp в течение 24 часов и частоту цитокин-продуцирующих клеток определяли с помощью ELISPOT, тогда как количество цитокинов, секретируемых в супернатанте, определяли с помощью ELISA.

    Т-клеточные ответы in vitro.

    Спленоциты из IL-13Rα1 + / + и / или IL-13Rα1 — / — DO11.10 / Rag2 — / — У мышей были истощены CD11c + и CD11b + клеток и OVAp. -специфические CD4 + Т-клетки очищали положительной селекцией на микрогранулках, связанных с антителами к CD4 (Miltenyi Biotech). CD4 + Т-клетки (3 × 10 5 клеток / лунка) стимулировали очищенными БА (3 × 10 4 клеток / лунку) или DC (3 × 10 4 клеток / лунку) в присутствии 10 мкМ OVA или HA пептида в течение 24 часов.CD4 Т-клетки были помечены на поверхностный CD4 и TCR OVA путем окрашивания антителами против CD4 и KJ1-26, соответственно. Впоследствии клетки пермеабилизировали 0,2% сапонином и окрашивали на внутриклеточный IFN-γ и IL-4 цитокин-специфическими антителами. Продукция цитокинов анализировалась с помощью проточной цитометрии и ELISA.

    Анализы обнаружения цитокинов

    ELISA.

    IL-4, IL-12, IL-13 и IFN-γ были обнаружены в супернатанте культуры с использованием стандартного протокола, как описано ранее (11, 13).OD 450 считывали на счетчике SpectraMax 190 (Molecular Devices, Саннивейл, Калифорния) и анализировали с использованием программного обеспечения SOFTmax PRO 3.1.1. Градуированные количества рекомбинантного цитокина были включены для построения стандартной кривой. Концентрации цитокинов экстраполировали из линейной части стандартной кривой.

    ELISPOT.

    Обнаружение IFN-γ и IL-4 с помощью ELISPOT проводили, как описано ранее (11, 13, 16). Вкратце, мультиэкранные планшеты с ГК (Millipore, Bedford, MA) были покрыты захватывающим Ab, а свободные участки были насыщены культуральной средой DMEM, содержащей 10% FCS.Затем добавляли 1 × 10 6 клеток SP / лунку и культуру стимулировали 10 мкМ OVAp. Добавляли биотинилированное антитело против IFN-γ (1 мкг / мл) и антитело против IL-4 (2 мкг / мл), и связанное антитело выявлялось с помощью авидин-пероксидазы. Пятна подсчитывали с использованием программного обеспечения Immunospot (Cellular Technology, Кливленд, Огайо).

    Анализ презентации Ag

    Спленоциты из IL-13Rα1 + / + и / или IL-13Rα1 — / — DO11.10 / Rag2 — / — мышей были истощены по CD11c + и CD11b + Клетки и OVAp-специфические CD4 + Т-клетки очищали положительной селекцией на микрогранулках, связанных с антителами к CD4 (Miltenyi Biotech).CD4 + Т-клетки (3 × 10 5 клеток / лунку) затем метили CFSE и стимулировали очищенными БА (3 × 10 4 клеток / лунку) в присутствии 10 мкМ OVA или HA пептида, или 1 мкМ химеры Ig-OVA или IgW. Через 72 часа пролиферацию Т-клеток определяли путем измерения разведения CFSE, как описано ранее (19).

    Статистический анализ

    Непарный двусторонний критерий Стьюдента t был использован для анализа данных на всех фигурах, кроме рис. 8А, где использовался ANOVA с посттестом Бонферрони для сравнения более двух групп.Программное обеспечение Prism v4.0c (GraphPad) использовалось во всех статистических анализах. Значимость данных обозначается следующим образом: * p <0,05, ** p <0,01.

    Дополнительный материал в Интернете

    Дополнительный материал На рис. 1 показано in vivo восстановление Th3-ответов экзогенным ИЛ-4 у мышей с дефицитом ИЛ-13Rα1. Дополнительный рис. 2 показывает сравнение частоты различных врожденных и лимфоидных клеток у мышей с дефицитом IL-13Rα1 и мышей с достаточным уровнем IL-13Rα1.

    Результаты

    Новорожденные, у которых отсутствует функциональный IL-13Rα1, развивают вторичный иммунный ответ с перекосом Th2

    Воздействие Ag на новорожденных обычно вызывает слабый вторичный иммунитет Th2, но избыток клеток Th3 (3, 9, 20).Однако нейтрализация IL-13Rα1 восстанавливает вторичные Th2-ответы новорожденных (11). Точно так же вторичные ответы Th2 развиваются у новорожденных мышей, у которых нарушен ген IL-13Rα1 и нарушена экспрессия HR (рис. 1). Действительно, мыши с IL-13Rα1 — / — , которым вводили Ig-OVA в день рождения и заражали OVAp в CFA (OVAp / CFA) в возрасте 7 недель, проявляли сильные ответы IFN-γ (Th2) как в SP и LN по сравнению с мышами IL-13Rα1 + / + (рис. 1А). Чтобы получить представление о механизме, с помощью которого нефункциональный HR восстанавливает вторичные ответы Th2, мы адаптировали дефицит IL-13Rα1 к системе трансгенной передачи TCR от новорожденного к новорожденному (10, 11, 13, 16) и провели точный анализ ответов.Соответственно, при переносе неонатальных IL-13Rα1 — / — DO11.10 Т-клетки либо на IL-13Rα1 — / — , либо на IL-13Rα1 + / + новорожденным мышам BALB / c, и хозяевам давали Ig- OVA и позже провокация OVAp / CFA, ответы Т-клеток DO11.10 были смещены в сторону клеток Th2 (рис. 1B). Действительно, когда у доноров Т-клеток был интактный IL-13Rα1, ответы SP и LN IFN-γ были минимальными, тогда как ответы IL-4 были нормальными у мышей, подвергшихся воздействию Ig-OVA, относительно IgW, независимо от того, были ли хозяева IL- 13Rα1 недостаточен или достаточен (рис.1Б). Напротив, когда у доноров Т-клеток был нефункциональный IL-13Rα1, ответы SP и LN IFN-γ были восстановлены, тогда как ответы IL-4 были минимальными у мышей, подвергшихся воздействию Ig-OVA по сравнению с IgW, независимо от того, были ли хозяева IL-13Rα1 дефицит или достаточен (рис. 1B). Фактически, обобщенные результаты различных экспериментов подтверждают данные репрезентативных экспериментов и снова показывают, что, когда донорские Т-клетки дефицитны по IL-13Rα1, воздействие Ig-OVA и заражение OVA / CFA дает вторичные ответы SP и LN, которые проявляются больше Th2, но ниже Th3-клетки в значительной степени по сравнению с донорскими Т-клетками от мышей IL-13Rα1 + / + , независимо от того, является ли хозяин достаточным или недостаточным IL-13Rα1 (рис.1С). В целом, дефицит HR восстанавливает вторичный иммунитет Th2, но сводит на нет ответы Th3.

    РИСУНОК 1.

    Удаление IL-13Rα1 приводит к перекосу вторичного иммунитета новорожденных в сторону Th2-клеток. ( A ) Новорожденным мышам IL-13Rα1 — / — или IL-13Rα1 + / + BALB / c вводили Ig-OVA в физиологическом растворе и через 2 месяца заражали OVAp / CFA. Клетки SP и LN, полученные от трех до шести мышей, стимулировали OVAp, а через 24 часа определяли IFN-γ с помощью ELISA. Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок из трех экспериментов.( B ) Новорожденные реципиенты IL-13Rα1 — / — или IL-13Rα1 + / + BALB / c неонатальных Т-клеток из IL-13Rα1 — / — или IL-13Rα1 + / + Донорам DO11.10 вводили Ig-OVA (черные столбцы) или IgW (белые столбцы), а затем провоцировали OVAp / CFA. Клетки SP и LN собирали на 10 день после заражения и стимулировали OVAp in vitro. Продукция IFN-γ ( левый столбец ) и IL-4 ( правый столбец ) клетками SP и LN анализировалась с помощью ELISA.Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. Это представитель пяти экспериментов. ( C ) Скомпилированные результаты пяти экспериментов, проведенных, как описано в (B). Столбцы представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка пяти экспериментов. Статистический анализ использовал тест Стьюдента t для сравнения результатов между донорскими Т-клетками из IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + мышей в обоих IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + хостов.

    Удаление IL-13Rα1 нарушает баланс первичных неонатальных ответов по отношению к клеткам Th2

    У новорожденных мышей как клетки Th2, так и клетки Th3 развиваются в первичном ответе (11, 13, 16).Однако первые экспрессируют IL-13Rα1, который связывается с IL-4Rα, образуя HR, который отмечает гибель клеток во время повторного заражения Ag, отсюда смещение вторичного неонатального иммунитета к клеткам Th3 (11). Когда экспрессия IL-13Rα1 аннулируется делецией гена, можно ожидать сохранения Th3 вместе с восстановленными клетками Th2 во вторичном ответе. Однако это было не так, и результаты показывают, что, в то время как клетки Th2 возникают во вторичном ответе мышей IL-13Rα1 — / — , аналоги Th3 были значительно уменьшены.Это побудило нас очертить механизм, лежащий в основе потери вторичных неонатальных Th3-ответов у мышей с дефицитом IL-13Rα1. С этой целью мы начали с определения, развиваются ли клетки Th3 в первичных ответах, и если да, то реагируют ли они на отзыв с помощью Ag. Результаты были еще более интригующими, поскольку новорожденные с IL-13Rα1 — / — не могли развить первичные клетки Th3, и ответы были смещены в сторону клеток Th2 (рис. 2). Действительно, Т-клетки IL-13Rα1 + / + DO11.10 развивали сбалансированные первичные ответы Th2 и Th3 ex vivo при воздействии на Ag в хозяевах IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — (рис. .2А). Однако Т-клетки IL-13Rα1 — / — DO11.10 давали ответы, которые были искажены в сторону клеток Th2 (14,0%) с очень небольшим количеством клеток Th3 (3,3%) в хозяевах IL-13Rα1 — / — , но сбалансированные клетки Th2 и Th3 в хозяевах IL-13Rα1 + / + (рис. 2А). Объединенные результаты трех экспериментов подтверждают наблюдение, что устранение IL-13Rα1 позволяет наивным DO11.10 Т-клеткам дифференцироваться в клетки Th2, но препятствует образованию первичных клеток Th3, когда мыши-хозяева также лишены функционального IL-13Rα1 (рис.2Б). Анализ ответов первичных клеток при стимуляции in vitro с помощью OVAp снова указывает на то, что сбалансированный первичный иммунитет Th2 / Th3 смещается в ответные ответы смещения со смещением Th3, когда донорские Т-клетки и / или мыши-хозяева являются достаточными для IL-13Rα1 независимо от того. от того, измеряются ли цитокины с помощью ELISA или ELISPOT (фиг. 2C). Однако, когда как донорские Т-клетки, так и мыши-хозяева были дефицитными по IL-13Rα1, было больше Th2, но уменьшились ответы отзыва Th3 при любом анализе цитокинов (рис.2С). Эти результаты являются Ag-специфическими, потому что ни один из ответов не развился, когда воздействие проводилось с контрольным IgW позвоночника вместо Ig-OVA. Скомпилированные результаты от трех до пяти различных экспериментов подтверждают наблюдение, что, когда и донорские Т-клетки, и мыши-хозяева испытывают дефицит IL-13Rα1, ответные реакции значительно смещены в сторону Th2-клеток (рис. 2D). В целом, результаты показывают, что смещение первичных ответов в сторону Th2 с минимальным количеством клеток Th3 требует дефицита IL-13Rα1 в APC хозяина в дополнение к донорским T-клеткам.

    РИСУНОК 2.

    Удаление IL-13Rα1 нарушает баланс первичного неонатального иммунитета и искажает ответы на клетки Th2. ( A D ) IL-13Rα1 + / + и IL-13Rα1 — / — новорожденные мыши BALB / c, реципиенты IL-13Rα1 — / — или IL-13Rα1 + / + Т-клеткам от доноров DO11.10 в возрасте 1 день вводили Ig-OVA или контрольный IgW в физиологическом растворе, а через 14 дней анализировали их первичный ex vivo и повторный ответ в селезенке. (A) Репрезентативная продукция ex vivo внутриклеточного IFN-γ и IL-4 CD4 + KJ1-26 + DO11.10 Т-клеток. (B) Собранная ex vivo продукция внутриклеточного IFN-γ и IL-4 CD4 + KJ1-26 + DO11.10 Т-клетками из трех экспериментов. Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка. (C) Вспомните ответы IFN-γ и IL-4 после стимуляции in vitro с помощью OVAp, как измерено с помощью ELISA ( верхние панели, ) и ELISPOT ( нижние панели, ). Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. (D) Скомпилированные результаты пяти экспериментов, проведенных, как описано в (C). Столбцы представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка пяти экспериментов.В статистическом анализе использовался тест Стьюдента t для сравнения результатов между донорскими Т-клетками от IL-13Rα1 — / — по сравнению с IL-13Rα1 + / + мышей в обоих IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + хостов.

    Th2-смещенный первичный неонатальный иммунитет у мышей с дефицитом IL-13Rα1 соответствует снижению частоты BAs и BAP.

    Учитывая, что клетки Th3 не могут развиваться у новорожденных мышей IL-13Rα1 — / — , мы предположили, что во время примирования с помощью Ag , существует нехватка ИЛ-4 из окружающей среды, который необходим для дифференциации наивных Т-клеток по фенотипу Th3 (21).Чтобы проверить эту гипотезу, мы предоставили экзогенный IL-4 во время неонатального воздействия Ag, и были проанализированы первичные, ex vivo, а также повторные ответы Th3. Соответственно, 1-дневные реципиенты IL-13Rα1 — / — BALB / c IL-13Rα1 — / — неонатальные Т-клетки DO11.10 получали Ig-OVA и одну инъекцию IL-4 в день в течение 3 дней. последовательные дни. Затем клетки Th3 анализировали на 14 день после воздействия Ig-OVA. Результаты ясно показывают, что Т-клетки DO11.10 становятся способными дифференцироваться в клетки Th3, когда воздействие Ag осуществляется в присутствии экзогенного IL-4 (дополнительный рис.1). Фактически, частота клеток Th3, продуцирующих IL-4, увеличивалась в зависимости от дозы цитокинов, поскольку процентное содержание клеток IL-4 + увеличивалось с фонового уровня 2,3% в отсутствие IL-4 до 8,5 и 23,6% с 200 и 400 нг экзогенного ИЛ-4 соответственно (дополнительный рисунок 1А). Кроме того, когда клетки стимулировали in vitro с помощью Ag, не было продукции IL-4 в культуре от мышей, которые не получали экзогенный IL-4 во время примирования, независимо от того, проводилась ли стимуляция с помощью OVAp или отрицательного контроля, HA пептид (дополнительный рис.1Б). Однако секреция IFN-γ наблюдалась при OVAp, но не при стимуляции пептидом HA. Напротив, была продукция IL-4 в культурах мышей-реципиентов экзогенного IL-4 при стимуляции OVAp, но не пептидом HA, и это было аналогично IFN-γ, что указывает на то, что как Th2-, так и Th3-ответы развиваются во время примирования с помощью Ag в присутствии экзогенного ИЛ-4. В целом, эти наблюдения показывают, что у новорожденных с IL-13Rα1 — / — имеется недостаток в окружающем IL-4, что ограничивает дифференцировку Th3, если не обеспечивается экзогенный цитокин.

    Поскольку IL-4 имеет решающее значение для дифференцировки Th3 и восстанавливает ответы Th3 у новорожденных с IL-13Rα1 — / — , возможно, что IL-13Rα1 играет роль в развитии и / или функции клеток, продуцирующих IL-4. врожденной иммунной системы. Чтобы решить эту проблему, мы начали с определения частоты клеток, которые, как известно, служат источником IL-4 у новорожденных с IL-13Rα1 — / — по сравнению с IL-13Rα1 + / + . Полученные данные показывают, что IL-13Rα1 + / + и IL-13Rα1 — / — новорожденные имеют сопоставимые частоты Т-клеток (CD4 и CD8), В-клеток (B220), макрофагов (CD11b), обычных DC (CD11c). , эозинофилы (Siglec F) и нейтрофилы (Gr-1) (дополнительный рис.2A – F). Однако наблюдалось значительное снижение частоты BM BA у новорожденных с IL-13Rα1 — / — по сравнению с IL-13Rα1 + / + (рис. 3A). Кроме того, также наблюдалось снижение частоты BAP и BMCP, соответственно, чего не наблюдалось с PCMC и PGMC (рис. 3A). Объединенные результаты пяти экспериментов показывают, что снижение частоты БА и их предшественников у новорожденных с IL-13Rα1 — / — является статистически значимым по сравнению с новорожденными с IL-13Rα1 + / + (рис.3А). Это, вероятно, привело к снижению частоты БА в ПБ (рис. 3В). Поскольку тучные клетки (c-kit + FcεR1α + ) не были обнаружены ни в одном из штаммов (рис. 3В), а БА, как известно, служат источником ИЛ-4 (22, 23), сниженная частота БА у Мыши IL-13Rα1 — / — могут быть ответственны за недостаток цитокина у этих животных. Дальнейшее исследование этого вопроса показало, что БА, происходящие из BM, как у новорожденных, так и у взрослых мышей IL-13Rα1 — / — , продуцируют значительно меньше IL-4, но больше цитокина IL-13, чем их аналоги IL-13Rα1 + / + в случае vitro стимуляция лигандом TLR-2, PGN (рис.3С). Более того, как новорожденные, так и взрослые мыши с IL-13Rα1 — / — имели более низкие уровни сывороточного IgE по сравнению с мышами IL-13Rα1 + / + (фиг. 3D). Поскольку В-клетки требуют, чтобы IL-4 претерпел переключение на IgE, вероятно, что снижение продукции этого изотипа у мышей IL-13Rα1 — / — связано с недостатком IL-4 в окружающей среде у этих животных.

    РИСУНОК 3. Удаление

    IL-13Rα1 снижает частоту неонатальных БА и препятствует продукции цитокина IL-4 и сывороточного IgE.( A ) Верхние панели показывают частоту BA, BAP, BMCP, CPMC и PGMC в BM IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + новорожденных. Гистограммы на нижних панелях показывают среднее значение ± стандартное отклонение скомпилированных частот клеток от трех до пяти новорожденных. ( B ) Верхние панели показывают частоту PB BA; нижняя панель показывает среднее ± стандартное отклонение скомпилированных частот клеток от трех до пяти новорожденных. ( C ) Продукция IL-4 и IL-13 BA у новорожденных ( левые панели ) и взрослых ( правые панели ) IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + мышей на стимуляция PGN, лигандом TLR2.Столбцы представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. Результаты представляют четыре эксперимента с двумя-четырьмя мышами в группе. ( D ) Уровни сывороточного IgE у новорожденных и взрослых мышей IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + BALB / c, измеренные с помощью ELISA. Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок.

    БА регулируют Th3-иммунитет у новорожденных.

    IL-13Rα1 — / — мышей имеют более низкую частоту зрелых БА и БАТ (рис. 3). Учитывая, что БА служат источником ИЛ-4 для дифференцировки Th3 (22, 24), уменьшенное количество БА может быть причиной нехватки ИЛ-4 в окружающей среде и, как следствие, плохой дифференцировки Th3 в ИЛ-13Rα1 — / — мышей.Чтобы проверить это предположение, мы стремились стимулировать генерацию БА in vivo и протестировать восстановление дифференцировки Th3. Первоначальный анализ стимуляции дифференцировки БА путем введения rIL-3 мышам IL-13Rα1 — / — показал увеличение частоты БА в крови с 2,1 ± 0,56% (или абсолютное количество клеток 33000 ± 2500 / мл) в необработанных мышей до 9,09 ± 1,26% (или абсолютное количество клеток 157000 ± 24000 / мл) у мышей, получавших rIL-3 (фиг. 4A). Скомпилированные результаты трех экспериментов показали, что такое увеличение является значительным и соответствует предыдущим сообщениям о расширении БА in vivo (25).Кроме того, когда IL-13Rα1 — / — новорожденным реципиентам неонатальных Т-клеток от мышей-доноров IL-13Rα1 + / + DO11.10 давали Ig-OVA в сочетании с rIL-3, первичные ex vivo и повторные ответы Th3 были восстановлен (рис. 4B – D). Действительно, процент клеток Th3 ex vivo увеличился с 2% у мышей без rIL-3 до 7,8% у реципиентов rIL-3 (фиг. 4B). Процент клеток Th2 был одинаковым в обеих группах мышей. Кроме того, после стимуляции in vitro с помощью OVAp, ответные цитокиновые ответы Th3 у мышей-реципиентов rIL-3 значительно увеличились, как измерено с помощью внутриклеточного окрашивания и ELISA (рис.4C, 4D). Затем мы попытались обогатить зрелыми БА IL-13Rα1 + / + для восстановления продукции IL-4 и неонатальной дифференцировки клеток Th3, но это вызвало мгновенную смерть новорожденных мышей, возможно, из-за дегрануляции БА и избыточного высвобождения серотонина и гистамина . Альтернативой было обогащение BMCP от мышей IL-13Rα1 + / + вместо зрелых BA и тестирование на восстановление дифференцировки неонатального Th3. Результаты показали увеличение частоты БА в крови, которая была выше, чем у мышей без переноса БМКП (рис.4E). Обобщенные результаты трех экспериментов показали, что такое увеличение статистически значимо. Когда IL-13Rα1 — / — новорожденных реципиентов неонатальных Т-клеток от доноров IL-13Rα1 — / — DO11.10 также перенесли BMCP и подверглись воздействию Ig-OVA, оба ответа ex vivo и повторные Th3 были восстановлен (рис. 4F). Действительно, процент ex vivo Th3-клеток повысился с 3,6% у мышей без переноса BMCP до 8,1% у реципиентов переноса BMCP (фиг. 4F). Процент клеток Th2 был одинаковым в обеих группах мышей.Кроме того, после стимуляции in vitro с помощью OVAp, ответные цитокиновые ответы Th3 у мышей-реципиентов переноса BMCP значительно увеличились (фиг. 4F). В целом, экспансия БА, управляемая IL-3 или IL-13Rα1 + / + BMCP, восстанавливает дифференцировку Th3 у мышей IL-13Rα1 — / — .

    РИСУНОК 4.

    IL-13Rα1 на BAs контролирует развитие неонатального иммунитета Th3. IL-13Rα1 — / — новорожденным давали rIL-3 ( A D ), BMCP ( E и F ) или антитела против FcεR1α MAR-1 ( G I ).Затем мышам переносили Т-клетки DO11.10 от новорожденных мышей IL-13Rα1 + / + и инъецировали Ig-OVA. (A) Частота SP и PB BA после инъекции rIL-3, но до переноса Т-клеток. Точечные графики показывают репрезентативный эксперимент, а гистограммы показывают скомпилированные частоты из трех экспериментов. Столбики представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка. (B) Ex vivo ответы внутриклеточного IL-4 и IFN-γ Т-клеток DO11.10. (C и D) Вспомните цитокиновые ответы, измеренные с помощью внутриклеточного окрашивания (C) и ELISA (D).(E) Частота SP и PB BA после переноса BMCP, но до переноса Т-клеток. Точечные диаграммы показывают репрезентативный эксперимент, а гистограммы показывают результаты скомпилированной частоты из трех экспериментов. (F) Ex vivo внутриклеточные (точечные графики) и повторные (гистограммы) цитокиновые ответы. (G) Частота PB BA после контрольной инъекции MAR-1 или hIg, но до переноса Т-клеток. (H) Ex vivo внутриклеточные цитокиновые ответы Т-клеток DO11.10 после воздействия Ig-OVA. Левая панель показывает репрезентативные результаты цитокинов; , правые панели показывают обобщенные результаты трех экспериментов.Столбики представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение. (I) Вспомните цитокиновые ответы, измеренные с помощью ELISA, после стимуляции спленоцитов in vitro с помощью OVAp или контрольного пептида НА. Столбцы представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. Этот эксперимент повторяли трижды. * p <0,05, ** p <0,01.

    Поскольку IL-13Rα1, по-видимому, регулирует дифференцировку Th3 у новорожденных мышей, контролируя частоту BA и их способность продуцировать IL-4, можно предположить, что истощение этих клеток в IL-13Rα1 + / + мышей ограничит развитие Th3-клеток и искажение неонатального иммунитета по отношению к Th2-клеткам.Чтобы проверить эту предпосылку, мы истощили BA путем внутрибрюшинной инъекции антител против FcεR1α (клон MAR-1) и протестировали новорожденных на ex vivo и вспомнить ответы Th3. Результаты показывают, что режим истощения снижает частоту BA с 1,0% у мышей, получавших изотипический контроль (Ig [hIg] хомяка), до 0,03% у мышей-реципиентов антител MAR-1 (фиг. 4G). Следствие этого эффективного истощения БА выражается в уменьшении ex vivo и восстановлении первичных ответов Th3 (рис. 4H). Действительно, хотя процент Th3-клеток был почти равен процентному содержанию Th2-клеток у мышей, получавших hIg изотипического контроля, частота Th3-клеток была значительно снижена по сравнению с Th2-клетками у мышей-реципиентов MAR-1 Ab (фиг. .4H). Кроме того, несмотря на то, что у мышей-реципиентов изотипического контроля в ответе на отзыв доминировал IL-4, у мышей с истощенным содержанием BA наблюдался перекос в сторону IFN-γ (Th2) (фиг. 4I). Хотя известно, что MAR-1 Ab истощает тучные клетки вместе с BA (26), это не повлияет на результат, потому что тучные клетки, как известно, не представляют Ag и не были бы инициированы для производства IL-4 в этой системе. Это указывает на то, что истощение БА препятствует дифференцировке Th3 и искажает неонатальный иммунитет по отношению к клеткам Th2.В целом, результаты показывают, что IL-13Rα1 использует BA и их IL-4 для контроля Th3 иммунитета новорожденных.

    Неонатальные BAs способны представлять Ag и поддерживать дифференцировку Th3 зависимым от IL-13Rα1 образом

    Представленные данные показывают, что BAs необходимы для продуцирования IL-4 для развития неонатальных клеток Th3. Однако, не ясно, требует ли такой вклад БАВ в настоящее Ag, особенно с учетом того, что у взрослых мышей эта функция остается дискуссионным (27-31). Чтобы ответить на этот вопрос в неонатальной системе, мы исследовали BA на экспрессию MHC и костимулирующих молекул, а затем на презентацию Ag Т-клеткам как OVAp, так и Ig-OVA.Результаты показывают, что БА, полученные из клеток BM или PB мышей IL-13Rα1 + / + и IL-13Rα1 — / — , экспрессируют сопоставимые уровни молекул CD80, CD86, CD40 и MHC класса II (фиг. 5A, 5Б).

    РИСУНОК 5.

    И IL-13Rα1 — / — , и IL-13Rα1 + / + BA функционируют как APC. BA-производные BM ( A ) и PB ( B ) окрашивали антителами против CD80, CD86, CD40 и MHC-II (открытая гистограмма) или изотипическим контролем (закрашенная гистограмма). и экспрессию маркера анализировали с помощью проточной цитометрии на Lin c-kit + FcεR1α + gated BA.Данные представляют четыре эксперимента. ( C и D ) CFSE-меченные DO11.10 CD4 + Т-клетки (1 × 10 6 / лунка) инкубировали с БА, полученными из BM (1 × 10 4 / лунку) из IL. -13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — в присутствии OVAp (C) или Ig-OVA (D), и презентацию Ag измеряли разбавлением CFSE, как описано в «Материалы и методы» . Это представитель трех независимых экспериментов.

    Более того, когда происходящие из BM BA загружали OVAp или Ig-OVA и инкубировали с наивным DO11, меченным CFSE.10 CD4 Т-клеток, они были способны индуцировать деление Т-клеток (фиг. 5C, 5D). Кроме того, хотя разведение CFSE было сходным, независимо от того, были ли BA от мышей IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — , большее количество Т-клеток подверглось делению с помощью OVAp по сравнению со стимуляцией Ig-OVA. Это, вероятно, отражает тот факт, что свободный пептид не требует интернализации и процессинга, тогда как Ig-OVA требует связывания и интернализации через FcγR и процессинга внутри эндосом (32). Тем не менее, результаты показывают, что BA от новорожденных мышей, как и от взрослых животных (27–30), оснащены функциональными механизмами обработки и представления, как и профессиональные APC, такие как DC.Более того, когда БА нагружали OVAp и инкубировали с наивными Т-клетками DO11.10, Т-клетки производили ИЛ-4, но не ИФН-γ, что предполагает, что БА поддерживают дифференцировку Th3, но не Th2, потому что они не способны продуцировать IL-12 (рис. 6A). Обратите внимание, что BA от мышей IL-13Rα1 — / — были гораздо менее эффективны в управлении дифференцировкой Th3, возможно, потому, что они продуцируют меньше IL-4 (рис. 3C). Механизм презентации BA также функционирует in vivo как перенос MHC-достаточных BA вместе с неонатальным DO11.10 Т-клеток у новорожденных мышей с дефицитом MHC восстанавливают представление Ag, и у животных развиваются первичные ответы Th3 при воздействии Ig-OVA (фиг. 6B). Что еще более важно, БА IL-13Rα1 — / — были менее эффективны, чем БА IL-13Rα1 + / + в индукции ответов Th3, потому что дефицит IL-13Rα1 препятствует способности клеток продуцировать IL-4, необходимый для поддержания Дифференциация Th3. Полученные данные имеют важное значение, поскольку обобщенные результаты трех экспериментов подтверждают отсутствие ответов IFN-γ и сниженную эффективность IL-13Rα1 — / — BA в управлении дифференцировкой Th3.В целом, неонатальные БА способны представлять Ig-OVA in vivo, что, вероятно, облегчается с помощью FcγR (29), продуцировать IL-4 и поддерживать дифференцировку наивных Т-клеток в клетки Th3, и IL-13Rα1 играет решающую роль в этой функции. .

    РИСУНОК 6.

    IL-13Rα1 контролирует презентацию Ag и функцию программирования Т-клеток у неонатальных BA и DC. ( A ) Презентация Ag in vitro и последующая дифференцировка Т-клеток, управляемая OVAp-нагруженными IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — , происходящими из BM, как измерено по продукции цитокинов.Точечные диаграммы показывают внутриклеточные цитокины, тогда как гистограммы показывают секрецию цитокинов в супернатанте культуры. ( B ) Взрослые мыши BALB / c с дефицитом MHC-II, реципиенты неонатальных DO11.10 CD4 + Т-клетки получали БА, полученные из BM, из IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — новорожденных мышей, и хозяев иммунизировали Ig-OVA. На 14 день SP-клетки стимулировали PMA и иономицином, и продукцию цитокинов измеряли с помощью внутриклеточного окрашивания ( левые панели, ) и ELISA ( правые панели, ).Точечные диаграммы показывают продукцию внутриклеточных цитокинов Т-клетками DO11.10. Гистограммы показывают секрецию цитокинов в культуральном супернатанте мышей-реципиентов IL-13Rα1 + / + (черные столбцы) или IL-13Rα1 — / — (белые столбцы) БА, полученных из BM. ( C ) Продукция IL-12 DC из IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + новорожденных и взрослых мышей при стимуляции in vitro с помощью LPS. ( D и E ) Дифференциация наивных Т-клеток DO11.10 в Th2 (IFN-γ) и Th3 (IL-4) при стимуляции нагруженными OVAp DC из взрослого (D) и неонатального (E) IL- 13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + мышей, как измерено с помощью внутриклеточного окрашивания (точечные диаграммы) и ELISA (гистограммы).Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. Данные представляют два эксперимента.

    IL-13Rα1 контролирует продукцию IL-12 DC и играет критическую роль в дифференцировке Th2

    Результаты, представленные на рисунках 1 и 2, показывают, что первичный неонатальный ответ смещен в сторону Th2 вместо Th3, когда IL-13Rα1 нефункционален в БТР. Поскольку дифференцировка наивных Т-клеток в клетки Th2 требует продукции IL-12 с помощью APC, мы предположили, что IL-13Rα1 может играть роль в продукции IL-12, контролируя дифференцировку Т-клеток.Чтобы проверить это предположение, мы начали с сравнения продукции IL-12 DC у мышей IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + мышей. Результаты показывают, что при стимуляции LPS, лигандом TLR4, DC мышей IL-13Rα1 — / — продуцируют намного больше IL-12 по сравнению с таковыми у мышей IL-13Rα1 + / + , и это верно для DC от новорожденных и взрослых мышей (рис. 6C). Более того, когда DC были загружены OVAp и использовались для активации и дифференцировки наивного DO11.10 Т-клеток, ДК от мышей IL-13Rα1 — / — давали больший ответ Th2 по сравнению с ДК от мышей IL-13Rα1 + / + независимо от того, были ли животные взрослыми или новорожденными (фиг. 6D, 6E) . Это привело к увеличению IFN-γ в культурах, стимулированных IL-13Rα1 — / — по сравнению с IL-13Rα1 + / + DC (фиг. 6D, 6E). Взятые вместе, эти результаты показывают, что DC, в которых IL-13Rα1 нефункционален, продуцируют большее количество IL-12 и стимулируют лучшую дифференцировку Th2 по сравнению с DC с интактным IL-13Rα1.

    При переносе в MHCII

    — / — мышей, ДК IL-13Rα1 — / — смещают первичный неонатальный иммунитет в сторону Th2, тогда как БА IL-13Rα1 — / — сводят на нет развитие ответов Th3

    In vitro, IL -13Rα1 — / — неонатальные БА были способны обрабатывать и представлять Ag в той же степени, что и БА IL-13Rα1 + / + , но из-за пониженной способности продуцировать IL-4 они были гораздо менее эффективны в управлении Th3 дифференциация (рис. 3, 6). Однако неонатальные ДК IL-13Rα1 — / — продуцируют большее количество IL-12, чем ДК IL-13Rα1 + / + , и поддерживают лучшую дифференцировку Th2 (рис.6C – E). Затем мы попытались изучить влияние IL-13Rα1 на функцию этих нелимфоидных клеток in vivo и определить тип неонатального иммунитета, который возникает, когда IL-13Rα1 — / — DC и BA служат в качестве APC в неонатальном MHCII — / — мышей. Результаты показывают, что новорожденные мыши-реципиенты неонатальных ДК IL-13Rα1 + / + наряду с Т-клетками IL-13Rα1 + / + DO11.10 и с введением Ig-OVA развивают аналогичные частоты клеток Th2 и Th3 ex vivo (3,6 против 3,4%), но при стимуляции OVAp ответные реакции смещаются в сторону Th3-клеток, потому что их IL-4 управляет апоптозом IL-13Rα1 + Th2-клеток (рис.7А). Напротив, перенос IL-13Rα1 — / — неонатальным DCs давал более высокую частоту Th2 по сравнению с клетками Th3 ex vivo (6,8 против 4%), и ответная реакция была смещена в сторону клеток Th2 (фиг. 7A). БА, однако, имели больший эффект на клетки Th3 и не поддерживали развитие клеток Th2, потому что они не продуцируют IL-12 (фиг. 7B). Действительно, БА IL-13Rα1 — / — , которые продуцируют пониженные уровни IL-4, давали более низкую частоту клеток Th3 ex vivo, которые плохо отвечали на стимуляцию OVAp, по сравнению с БА IL-13Rα1 + / + (рис.7Б). В целом, IL-13Rα1 формирует неонатальный иммунитет, контролируя продукцию IL-4 BA и IL-12 DC.

    РИСУНОК 7.

    IL-13Rα1 осуществляет дифференциальный контроль DC- и BA-опосредованного программирования Т-клеток in vivo. MHC-II — / — IL-13Rα1 + / + Неонатальные мыши BALB / c, реципиенты DC или BA от 1-дневного IL-13Rα1 + / + или IL-13Rα1 — / — мышей наряду с неонатальными Т-клетками DO11.10 и хозяевам вводили Ig-OVA. На 14-й день были собраны SP клетки из хозяев MHC-II — / — IL-13Rα1 + / + , дополненные MHC-II-достаточными DC из MHC-II + / + IL-13Rα1 + / + (для использования в качестве APC), и культуру стимулировали пептидом OVA.Ex vivo (точечные графики) и повторные (гистограммы) цитокиновые ответы CD4 Т-клетками затем анализировали с помощью внутриклеточного окрашивания и ELISA, соответственно. ( A и B ) Продукция цитокинов Т-клетками от хозяев-реципиентов (A) DC или (B) BA. Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. Данные представляют два эксперимента.

    IL-4 от неонатальных BAs использует HR для регулирования продукции IL-12 DC и контролирует первичные клетки Th2

    Результаты на рис.7 показывают, что BA продуцируют IL-4 для поддержки дифференцировки клеток Th3, тогда как DC секретируют IL-12 для поддержания программ Th2. Эти наблюдения объясняют баланс между клетками Th2 и Th3 в первичном ответе новорожденного, но не разрешают онтогенетическую экспрессию HR на клетках Th2. Ранее мы показали, что неонатальные DC продуцируют IL-12 в количестве, достаточном для управления дифференцировкой Th2, но не в достаточном количестве, чтобы противодействовать положительной регуляции HR на этих клетках (13, 16). Поскольку неонатальные DCs экспрессируют HR (33), а BAs продуцируют IL-4, поэтому логично предположить, что уменьшенная продукция IL-12 с помощью DC является результатом негативной регуляции IL-4 со стороны BA.Чтобы проверить этот постулат, мы провели эксперименты по совместному переносу DC и BA и обнаружили, что, когда неонатальные DC не экспрессируют HR (HR DC), значимые (согласно анализу ANOVA с пост-тестом Бонферрони) первичные ответы Th2 развиваются независимо от количества ИЛ-4 производства БА HR (HR BA) или HR + (HR + BA) (рис. 8A, левая панель ). Напротив, когда DC представляют собой HR + (HR + DC), даже небольшое количество IL-4, продуцируемого HR BA, оказывает глубокое влияние на развитие Th2-ответов, аналогичных HR + . БА, продуцирующие большее количество ИЛ-4 (рис.8А, левая панель ). Таким образом, IL-4 из BA эффективно использует HR для противодействия функции постоянного тока и продукции IL-12. С другой стороны, первичные неонатальные ответы Th3 показали прямую корреляцию с количеством IL-4, продуцируемым BA, когда DC были HR (HR DC). Действительно, первичный ответ Th3 был выше, когда BA были HR + (сравните HR + BA: HR DC по сравнению с HR BA: HR DC; рис. 8A, правая панель ).Однако, когда у DC был HR, первичный ответ Th3 был одинаковым независимо от того, были ли BA HR + или HR (сравните HR + BA: HR + DC с HR BA: HR + DC), несмотря на то, что BA HR + продуцируют более высокий уровень IL-4. Возможно, это связано с поглощением IL-4 DC HR + , в противном случае ответ должен быть на уровнях, сопоставимых с HR + BA: HR DC. Это предполагает, что экспрессия HR на DC может ограничивать доступность IL-4 для программирования Th3.В целом, IL-4 от BA использует HR на DC для управления программированием первичных клеток Th2. Это утверждение дополнительно подтверждается данными о том, что добавление IL-4 во время стимуляции DC с помощью LPS (лиганда TLR4) снижает продукцию IL-12 с помощью DC HR + по сравнению с DC HR (рис. 8B, левая панель ). ). Фактически, когда работала функция HR, продукция IL-12 снижалась примерно в 5 раз. Таким образом, кажется, что когда DC лишены HR, они продуцируют больше IL-12 в присутствии IL-4, возможно, из-за передачи сигналов через обычный IL-4R.Однако, когда присутствует HR, такое увеличение продукции IL-12 сводится к нулю, указывая на то, что IL-4 использует HR для противодействия функции обычного IL-4R. В целом, HR осуществляет ступенчатую негативную регуляцию против программ Th2, побуждая BAs противостоять функции DC в течение ранней жизни и затем выступая в качестве маркера смерти первичных Th2-клеток при более позднем столкновении с Ag (Рис. 9).

    РИСУНОК 8.

    IL-4 из BAs модулирует продукцию IL-12 DC для поддержания контроля над первичным иммунитетом Th2 у новорожденного.( A ) Новорожденные MHC-II — / — IL-13Rα1 + / + мышей-реципиентов (по три на группу) BA и DC от 1-дневного IL-13Rα1 + / + (HR + BA: HR + DC) или IL-13Rα1 — / — (HR BA: HR DC) мыши получали неонатальные Т-клетки DO11.10 CD4 + и инъецировали Ig- OVA. На 14 день клетки SP собирали и инкубировали с нагруженными OVAp MHC-II + / + DC (чтобы служить APC). Продукция IFN-γ и IL-4 KJ1-26 + CD4 + DO11.10 Т-клеток измеряли с помощью ELISPOT. Столбики представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение пятнообразующих единиц (SFU) для трех лунок. Результаты являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. ( B ) Продукция IL-12 под действием IL-13Rα1 — / — и IL-13Rα1 + / + DC при стимуляции контрольной средой (NIL), только LPS или в комбинации с цитокином rIL-4 ( левая панель ). Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех лунок. Правая панель показывает кратное изменение продукции IL-12 под действием IL-13Rα1 + / + и IL-13Rα1 — / — DC, индуцированных экзогенным IL-4.Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка продуцирования цитокинов, полученное при стимуляции в присутствии или в отсутствие IL-4. Данные получены из трех экспериментов. * р <0,05.

    РИСУНОК 9.

    Пошаговая регуляция неонатального иммунитета с помощью IL-4α / IL-13Rα1 HR. Во время неонатального воздействия Ag, BA функционируют как APC и продуцируют IL-4. Этот цитокин связывается с HR на соседних Ag-представляющих DC и сигнализирует о неисправности и снижении продукции IL-12. Ограниченный IL-12 в неонатальной среде, хотя и достаточен для стимулирования дифференцировки наивных Т-клеток в Th2-клетки, не может противодействовать положительной регуляции IL-13Rα1.Следовательно, происходит образование HR на неонатальных Th2-клетках, которое служит маркером смерти этих клеток. Во время повторного заражения Ag клетки Th3 продуцируют IL-4, который сигнализирует об апоптозе клеток Th2, что приводит к смещению вторичного иммунитета по отношению к клеткам Th3. Фактически, если DC лишены HR, IL-4 из BA не сможет ограничить продукцию IL-12 DC. В этом случае дифференцировка Th2 будет происходить, но без экспрессии HR, что приведет к сбалансированному неонатальному иммунитету Th2 / Th3.

    Обсуждение

    Клетки Th2 обычно экспрессируют обычный IL-4R (IL-Rα / common γ), который не поддерживает передачу сигналов цитокином IL-4 (12, 34).В более ранних исследованиях, исследуя IL-4 на предмет гибели неонатальных Th2-клеток, мы обнаружили, что IL-13Rα1 активируется в процессе дифференцировки клеток, индуцированной Ag, и связывается с IL-4Rα, обеспечивая HR, который поддерживает передачу сигналов IL-4 и запускает апоптоз. неонатальных клеток Th2 при повторной встрече с Ag (11, 13, 16). Таким образом, IL-13Rα1 служит маркером гибели первичных неонатальных клеток Th2 (7, 15). Хотя эти находки объяснили Th3 предвзятость вторичного неонатального иммунитета, повышение уровня IL-13Rα1 в процессе развития оставалось неясным.Дальнейшие исследования показали, что отсроченное созревание ДК у новорожденных и последующая презентация Ag в условиях ограниченного IL-12 в окружающей среде ответственны за активацию IL-13Rα1 и экспрессию HR на неонатальных Th2 клетках (13). Фактически, IL-12, который, как было показано, восстанавливает неонатальную Th2-чувствительность (11), как было обнаружено, не только поддерживает дифференцировку Th2-клеток, но также противодействует положительной регуляции IL-13Rα1 (16). В этом отчете мы раскрыли еще один аспект, с помощью которого IL-13Rα1 побуждает BAs препятствовать функции DC, создавая основу для экспрессии HR на Th2-клетках (рис.9). Действительно, показано, что BA в раннем возрасте функционируют как APC, продуцируют цитокин IL-4 и способствуют программам клеток Th3, как сообщалось для взрослых BA (22, 27–29). В неонатальном периоде, однако, IL-4 получает дальнейшую задачу задействовать HR на DC и ослабить их функцию и выработку IL-12 (Рис. 9). Это подтверждается данными о том, что DC, достаточные для IL-13Rα1, где IL-4 может осуществлять передачу сигналов через HR, поддерживают первичные ответы, лишенные Th2-клеток, что резко контрастирует со значительными Th2-клетками, наблюдаемыми с IL-13Rα1– дефицитные DC.Более того, HR, по-видимому, внутренне поддерживает защитный механизм для сохранения этой обратной регуляции неонатальных программ Th2 и Th3. Действительно, когда HR функционирует, DC продуцируют меньше IL-12, тогда как BA секретируют больше IL-4. Кроме того, учитывая, что HR имеет высокое сродство к IL-4 (35, 36), даже скромные количества цитокинов, продуцируемых BA HR , поддерживают сниженные ответы Th2, пока DC экспрессируют HR. Хотя полученные данные подтверждают функциональное разнообразие, приписываемое HR (14, 37), и объясняют механизм, лежащий в основе малочисленности клеток Th2 в раннем возрасте, способность HR подрывать воспалительные Т-клетки у новорожденных могла быть установлена ​​на ранних сроках беременности.Фактически, было высказано предположение, что для сохранения приживления плода в утробе матери интерфейс матери и плода должен быть кондиционирован, чтобы ограничить присутствие провоспалительных лимфоцитов (38). Действительно, макрофаги и трофобласты в децидуальной оболочке продуцируют IDO, который избирательно индуцирует триптофановое голодание воспалительных Th2-клеток (39). Более того, трофобласты продуцируют IL-13, который индуцирует экспрессию IL-13Rα1 на соседних материнских APC и способствует развитию противовоспалительных клеток Th3, но ограничивает ответы Th2 (40).Хотя неясно, как IL-13Rα1 поддерживает этот дисбаланс лимфоцитов на интерфейсе плода, предположительно, возможно, что цепь ассоциируется с IL-4Rα, что приводит к экспрессии HR на APC. Таким образом, можно предположить, что IL-4 клеток Th3 может затем использовать HR для ограничения продукции IL-12 эмбриональными APC и ограничения дифференцировки клеток Th2. Учитывая, что неонатальные APC экспрессируют IL-13Rα1 в день рождения (33), вероятно, что управляемая трофобластом экспрессия IL-13Rα1 распространяется на APC плода.Последние переходят к неонатальной иммунной системе во время рождения и поддерживают дисбаланс Th2 / Th3 в раннем возрасте через IL-4 от БА. Это, вероятно, подтверждается постепенным процессом колонизации новорожденных комменсалами двумя способами. С одной стороны, наблюдается задержка созревания DC и, таким образом, ограниченное накопление IL-12 в окружающей среде (13, 16). С другой стороны, маргинальная комменсальная колонизация приводит к повышению уровня сывороточного IgE, который, в свою очередь, активирует БА с выработкой ИЛ-4 (41) и дополнительно способствует подавлению выработки ИЛ-12 ДК.Кроме того, еще предстоит определить, могут ли врожденные лимфоидные клетки (42), такие как нуоциты (43), врожденные клетки-помощники 2 (44) и естественные клетки-помощники (45), которые, как было показано, продуцируют цитокины Th3, такие как IL-13 , способствуют поддержанию неонатального дисбаланса Th2 / Th3 посредством аналогичного процесса.

    В целом, IL-13Rα1, по-видимому, побуждает БА подавлять функцию ДК и влияет на детский иммунитет, что приводит к чувствительности к аллергическим реакциям и восприимчивости к микробным инфекциям и, возможно, к низкой эффективности детских вакцин.

    Выраженная базофилия костного мозга у ребенка с острым миелоидным лейкозом с криптической t (8; 21) (q22; q22) транслокацией хромосомы

    Первичные злокачественные заболевания базофилов, то есть острый базофильный лейкоз, встречаются редко. 1 Однако базофилия может сопровождать другие гематологические злокачественные новообразования. Базофилия костного мозга и периферической крови обычно сопровождает хронический миелолейкоз (ХМЛ) и является важным диагностическим признаком этого заболевания. 2 У тех пациентов, у которых наблюдается обострение болезни или бластный криз, наличие базофилии полезно для отличия основного ХМЛ от de novo острого миелоидного лейкоза (ОМЛ).Базофилия редко бывает связана с острым лейкозом. В некоторых случаях возникает повышенное количество базофилов, содержащих аномалии t (6; 9) (p23; q34) или хромосомы 12p. 3,4 В этом отчете мы описываем необычный случай AML, содержащий загадочный t (8; 21) с участием генов AML1 и ETO , который был связан с выраженной базофилией костного мозга. Насколько нам известно, это первое сообщение об ассоциации выраженной базофилии с экспрессией химерного белка AML1-ETO.

    Пациентка, 3,8-летняя белая женщина, обратилась к педиатру с двухдневной историей лихорадки и боли в горле. Общий анализ крови показал нормальный уровень лейкоцитов, гемоглобин 5 г / дл и количество тромбоцитов 16 × 10 9 / л. Ее направили в местный детский онкологический центр, где ей сделали переливание крови и диагностическое обследование, включая аспирацию костного мозга. Создавалось впечатление острого лейкоза, возможно, представляющего бластный кризис ХМЛ.После перевода в наше учреждение при физикальном обследовании у нее были обнаружены петехии и поражения контагиозным моллюском. Когда были взяты аспират костного мозга и биопсия, у нее появлялась крапивница везде, где к ней прикасались, и была обнаружена дерматография. Анализ периферической крови показал количество лейкоцитов 12,2 × 10 9 / л, гематокрит 32%, с разницей в 32% нейтрофилов, 1% полосатых форм, 1% миелоцитов, 38% бластов, 26% лимфоцитов, 1% моноцитов, 1% базофилов и количество тромбоцитов 64 × 10 9 / л.Исследование периферической крови выявило 38% миелобластов, некоторые из которых содержат стержни Ауэра (рис. 1а). Мазки аспирата костного мозга были гиперклеточными и содержали частые бласты, а иногда клетки содержали стержни Ауэра (рис. 1c). Примечательно, что 26% ядерных клеток в костном мозге были базофилами на различных стадиях созревания (рис. 1c). Хотя преобладание лейкозных бластов имело миелобластные особенности, были идентифицированы редкие бласты, содержащие отчетливые базофильные гранулы (не показаны).Исследования проточной цитометрии показали, что бласты экспрессируют CD33, CD13, CD15, CD65, CD11b, CD34 и цитоплазматическую миелопероксидазу; часть бластов также коэкспрессирует CD19. Анализ RT-PCR был выполнен на РНК, выделенной из костного мозга пациента, и был сильно положительным по экспрессии химерных транскриптов AML1-ETO (рис. 1b). Обычный цитогенетический анализ выявил 46, XX, add (21) (q22). Флуоресценция in situ -гибридизация (FISH) с использованием набора зондов для AML1-ETO (Spectrumorange-Spectrumgreen; Vysis, Downers Grove, IL, USA) была проведена для оценки присутствия криптического t (8; 21).Слитый сигнал AML1-ETO наблюдался на der (21), что указывает на скрытую вставку части ETO в локус AML1 . Ожидаемый реципрокный сигнал слияния на der (8) не наблюдался (рисунок 1d). Сигнал ETO , который должен быть на 8q22, наблюдался на 8qter, что указывает на то, что инверсия полос (8q22q24.3), возможно, произошла до реаранжировки гена. Кроме того, FISH с использованием зондов для окраски всей хромосомы для хромосом 8 (меченные биотином; Камбио, Кембридж, Великобритания) и 21 (меченные дигоксигенином; Ventana Medical Systems, Тусон, Аризона, США) идентифицировали загадочную вставку материала ДНК хромосомы 8 на хромосома 21, предполагая, что перестройка гена AML1-ETO является результатом вставки части гена ETO в локус AML1 (данные не показаны).

    Рис. 1

    (a) Частые бласты среднего размера присутствовали в периферической крови, некоторые из которых содержали стержни Ауэра (× 1000, исходное увеличение). (b) Анализ ОТ-ПЦР для обнаружения экспрессии транскриптов AML1-ETO. Дорожка 1, вода отрицательный контроль; дорожка 2, настоящее дело; дорожка 3, клетки Касуми-1, линия положительных контрольных клеток, содержащая t (8; 21). (c) Миелобласты и многочисленные базофилы, некоторые из которых частично дегранулировали, присутствуют в костном мозге (× 1000, исходное увеличение).(d) Гибридизация с метафазной флуоресценцией in situ, показывающая наличие скрытой транслокации t (8:21), приводящей к слиянию генов AML1-ETO . Сигнал слияния (желтый) наблюдался на der (21), а сигнал обратного слияния не наблюдался на der (8q). Оставшаяся часть гена ETO была расположена рядом с концом der (8q), что указывает на инверсию полос 8q22q24.3.

    Пациентка прошла индукционную химиотерапию цитарабином и кладрибином для лечения ОМЛ с быстрым выведением миелобластов из костного мозга.Степень базофилии снизилась за 5 месяцев с момента первичного обращения к пациенту; однако он все еще присутствует. Последний аспират костного мозга пациента соответствовал морфологической ремиссии, хотя содержал 5% базофилов; Анализ ОТ-ПЦР, проведенный на том же образце, был слабо положительным для транскрипта AML1-ETO (данные не показаны). Интересно, что дерматография пациента исчезла одновременно с уменьшением базофилии костного мозга.

    В дополнение к типичной французско-американо-британской морфологии (FAB) -M2, присутствие t (8; 21) в AML было связано с наличием нескольких отличительных цитологических особенностей.К ним относятся бласты с выступающими стержнями Ауэра и выраженной положительной МПО, большие цитоплазматические гранулы лососевого цвета и эозинофилия костного мозга. 5 Помимо эозинофилии, при ОМЛ, содержащих транслокацию хромосомы t (8; 21), иногда наблюдались другие гематологические нарушения. Например, Kohli et al. 6 описали пациента с t (8; 21) -ассоциированным ОМЛ, у которого был выраженный лейкоцитоз и многочисленные незрелые миелоидные формы в периферической крови, имитирующие ХМЛ.

    Базофилия не была описана в связи с ОМЛ с t (8; 21). Настоящий случай характеризовался наличием выраженной базофилии костного мозга, открытие, которое увеличивало возможность бластного кризиса основного хронического миелолейкоза. Неясно, представляет ли этот случай острый лейкоз с базофильной дифференцировкой или базофилия является реактивной, возможно, вторичной по отношению к синтезу лейкемическими бластами фактора, который способствует росту и дифференцировке базофилов.Мы попытались выполнить FISH, чтобы определить, содержат ли базофилы хромосомную транслокацию t (8; 21); однако эти исследования было трудно интерпретировать из-за аутофлуоресценции, испускаемой базофильными гранулами (данные не показаны). Анализ ОТ-ПЦР, выполненный на аспирате костного мозга в ремиссии, который содержал 5% базофилов, был только слабо положительным для t (8; 21), что позволяет предположить, что последняя интерпретация может быть правильной.

    Таким образом, мы представили необычный случай AML с загадочным t (8; 21), который был связан с поразительной базофилией костного мозга.Этот случай важен, поскольку он расширяет спектр морфологических находок, наблюдаемых при t (8; 21) -ассоциированном ОМЛ, и иллюстрирует важность цитогенетических и молекулярных диагностических анализов при оценке ОМЛ, особенно тех, которые имеют необычные морфологические особенности.

    Подсчет лейкоцитов — Общий анализ крови

    Подсчет лейкоцитов — Полный анализ крови

    Подсчет лейкоцитов (WBC) и дифференциал


    Лейкоциты, или лейкоцитов , делятся на две основные группы: гранулоцитов, и негранулоцитов (также известных как агранулоциты).

    • гранулоцитов , которые включают нейтрофилов, эозинофилов и базофилов , имеют гранулы в цитоплазме клеток. нейтрофилов , е осинофилы и базофилы также имеют многодольчатое ядро. В результате они также так называемые полиморфноядерные лейкоциты или «поли». Ядра нейтрофилов также кажутся сегментированными, поэтому их также можно назвать сегментированными нейтрофилами или «сегс.«
    • The негранулоксированный белый клетки крови, лимфоцитов и моноцитов , не имеют гранул и имеют нелобулярные ядра. Они есть иногда их называют мононуклеарными лейкоцитами.

    Продолжительность жизни белых кровяных телец колеблется от От 13 до 20 дней, после чего они уничтожаются в лимфатическая система. Когда незрелые лейкоциты впервые высвобождаются из костного мозга в периферическую кровь, их называют «полосы» или «удары».«Лейкоциты борются инфекция через процесс, известный как фагоцитоз. В течение фагоцитоз, лейкоциты окружают и уничтожают чужеродные организмы. Лейкоциты также производят, транспортируют и распространять антитела как часть иммунного ответа организма.

    Два измерения лейкоцитов обычно делается в CBC:

    • общее количество лейкоцитов в микролитр (1×10 -6 литров) крови, выраженное абсолютным числом «X» тысяч лейкоцитов и
    • процент каждого из пяти типов лейкоцитов.Этот тест известен как дифференциал или «разница» и приводится в процентах.

    Нормальные значения общего количества лейкоцитов и дифференциал у взрослых мужчин и женщин составляет:

    • Всего лейкоцитов: 4,500 — 10,000
    • Резинки или ножи: 3-5%
    • Гранулоциты (или полиморфонуклеары)
      • нейтрофилов (или сегментов) : 50 — 70% относительное значение (2500-7000 абсолютное значение)
      • Эозинофилы: 1-3% относительное значение (100-300 абсолютное значение)
      • Базофилы: 0.4% — 1% относительное значение (40-100 абсолютное значение)
    • Агранулоциты (или мононуклеары)
      • Лимфоциты: 25-35% относительное значение (1700-3500 абсолютное значение)
      • Монциты: относительное значение 4-6% (200-600 абсолютное значение)

    Каждый дифференциал всегда добавляет до 100%.Чтобы сделать точную оценку, рассмотрите оба относительные и абсолютные значения. Например, относительное значение 70% нейтрофилы могут казаться в пределах нормы; однако, если общая WBC составляет 20000, абсолютное значение (70% x 20000) будет аномально высокое количество — 14000.


    Мгновенная обратная связь:

    Это важно учитывать как относительные, так и абсолютные значения различных типов лейкоцитов при интерпретации дифференциала лейкоцитов.


    Количество лейкоцитов меняется с возрастом и во время беременности.

    • В день рождения у новорожденного повышенное содержание лейкоцитов. количество лейкоцитов колеблется от 9000 до 30 000. Это число выпадает на взрослого уровни в течение двух недель.
    • Процент нейтрофилов высокий для первые несколько недель после рождения, но затем лимфоциты преобладание видно.
    • До 8 лет лимфоциты преобладают, чем нейтрофилы.
    • У пожилых людей общее количество лейкоцитов снижается немного.
    • При беременности наблюдается лейкоцитоз, в первую очередь за счет увеличения нейтрофилов с небольшим увеличение лимфоцитов.

    Лейкоцитоз, количество лейкоцитов выше 10000, обычно из-за увеличения одного из пяти типов лейкоцитов и ему дается имя ячейки, которая показывает основной увеличивать.

    • Нейтрофильный лейкоцитоз = нейтрофилия
    • Лимфоцитарный лейкоцитоз = лимфоцитоз
    • Эозинофильный лейкоцитоз = эозинофилия
    • Моноцитарный лейкоцитоз = моноцитоз
    • Базофильный лейкоцитоз = базофилия

    В ответ на острую инфекцию, травму или воспаление, лейкоциты выделяют вещество, называемое колониестимулирующий фактор (CSF).CSF стимулирует костный мозг для увеличения производства лейкоцитов. В человеке с нормально функционирующий костный мозг, количество лейкоцитов при необходимости ячейки могут удвоиться в течение нескольких часов. Увеличение количество циркулирующих лейкоцитов редко связано с увеличением все пять типов лейкоцитов. Когда это происходит, чаще всего из-за обезвоживания и гемоконцентрации. При некоторых заболеваниях такие как корь, коклюш и сепсис, повышение лейкоцитов клетки настолько драматичны, что картина напоминает лейкоз.Лейкемоидная реакция, лейкоцитоз временного характера, обязательно дифференцируется от лейкемии, где лейкоцитоз одновременно постоянный и прогрессивный.

    Терапия стероидами изменяет лейкоцитозный ответ. Когда кортикостероиды назначают здоровым людям, количество лейкоцитов поднимается. Однако, когда кортикостероиды назначают человеку с тяжелой инфекцией, инфекция может значительно распространяться без ожидаемого повышения уровня лейкоцитов.Важно помнить, что лейкоцитоз как признак инфекции может маскироваться у пациента, принимающего кортикостероиды.


    Мгновенная обратная связь:

    Кортикостероиды может замаскировать инфекцию, подавляя воспалительную реакцию и высвобождение лейкоцитов.


    Лейкопения возникает при WBC падает ниже 4000.Вирусные инфекции, подавляющие бактериальные инфекции и заболевания костного мозга могут вызывать лейкопению. Пациенты с тяжелой лейкопенией должны быть защищены от чего-либо. что нарушает целостность кожи, подвергая ее риску инфекция, из-за которой у них недостаточно лейкоцитов, чтобы Борьба. Например, больные лейкопенией не должны иметь внутримышечные инъекции, ректальные температуры или клизмы.

    Лекарства, которые могут вызывать лейкопению, включают:

    • Антиметаболиты
    • Барбитураты
    • Антибиотики
    • Противосудорожные препараты
    • Антитиреоидные препараты
    • Мышьяки
    • Противоопухолевые препараты
    • Сердечно-сосудистые препараты
    • Диуретики
    • Анальгетики и противовоспалительные средства
    • Отравление тяжелыми металлами

    Лейкоциты: критические низкие и высокие значения

    • A WBC менее 500 подвергает пациента риску смертельной инфекции.
    • A WBC более 30,000 указывает на массивную инфекцию или серьезное заболевание, такое как лейкемия.

    Когда пациент получает химиотерапию, подавляет выработку лейкоцитов костным мозгом, точка на который считается самым низким, называется надиром.


    © RnCeus.com

    Тест активации базофилов на основе экспрессии CD203c в диагностике аллергии на коровье молоко у детей | Европейский журнал медицинских исследований

  • 1.

    de Boissieu D, Dupont C: Временной ход аллергии на сильно гидролизованные белки коровьего молока у младенцев. J Pediatr 2000, 136: 119–20. 10.1016 / S0022-3476 (00)

    -5

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 2.

    de Boissieu D, Dupont C: Аллергия на сильно гидролизованные белки коровьего молока у младенцев: безопасность и продолжительность применения смесей на основе аминокислот. J Pediatr 2002, 41: 271–3.

    Артикул Google Scholar

  • 3.

    Fiocchi A, Bouygue GR, Restani P, Bonvini G, Startari R, Terracciano L: Точность кожных уколов при IgE-опосредованных побочных реакциях на бычьи белки. Ann Allergy Asthma Immunol 2002, 89 (6 Приложение 1): 26–32.

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 4.

    de Boissieu D, Waguet JC, Dupont C: Тесты на атопические пластыри для выявления аллергии на коровье молоко с пищеварительными симптомами. J Pediatr 2003, 142: 203–5. 10.1067 / mpd.2003.92

    Статья PubMed Google Scholar

  • 5.

    Sampson HA, Ho DG: Взаимосвязь между концентрациями IgE в пищевых продуктах и ​​риском положительных пищевых проблем у детей и подростков. J Allergy Clin Immunol 1997, 100: 444–51. 10.1016 / S0091-6749 (97) 70133-7

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 6.

    Isolauri E, Turjanmaa K: Комбинированные кожные уколы и пластыри позволяют выявить пищевую аллергию у младенцев с атопическим дерматитом. J Allergy Clin Immunol 1996, 97: 9–15. 10.1016 / S0091-6749 (96) 70277-4

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 7.

    Heine RG, Elsayed S, Hosking CS, Hill DJ: Аллергия на коровье молоко в младенчестве. Curr Opin Allergy Clin Immunol 2002, 2: 217–25.10.1097 / 00130832-200206000-00011

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 8.

    Гамильтон Р.Г., Адкинсон Н.Ф .: Анализы in vitro для диагностики IgE-опосредованных нарушений. J Allergy Clin Immunol 2004, 114: 213–25. 10.1016 / j.jaci.2004.06.046

    Статья CAS PubMed Google Scholar

  • 9.

    Boumiza R, Debard AL, Monneret G: Тест активации базофилов с помощью проточной цитометрии: последние достижения в клинических исследованиях, стандартизация и новые перспективы. Clin Mol Allergy 2005, 3: 9–13. 10.1186 / 1476-7961-3-9

    PubMed Central Статья PubMed Google Scholar

  • 10.

    Buhring HJ, Seiffert M, Giesert C, Marxer A, Kanz L, Valent P, Sano K: Маркер активации базофилов, определяемый антителом 97A6, идентичен эктонуклеотидпирофосфатазе / фосфодиэстеразе 3. 76 Кровь Кровь 2001, 97: 3303–5. 10.1182 / кровь.V97.10.3303

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 11.

    Potapinska O, Gorska E, Zawadzka-Krajewska A, Kulus M, Wasik M, Demkow U: Полезность измерения экспрессии CD203c на базофилах после активации пыльцой травы и антигенами Dermatophagoides pteronyssinus. Предварительное изучение. Pneumonol Alergol Pol 2009, 77: 138–44.

    PubMed Google Scholar

  • 12.

    Потапинская О., Демков Ю., Васик М: Проточно-цитометрический тест активации базофилов как метод диагностики аллергии. Pneumonol Alergol Pol 2009, 77: 152–8.

    PubMed Google Scholar

  • 13.

    Гонсалес-Муньос М., Виллота Дж., Монео I: Анализ активации базофилов с помощью проточной цитометрии при аллергии на клещей домашней пыли у детей. Pediatr Allergy Immunol 2002, 19: 342–7.

    Артикул Google Scholar

  • 14.

    Bühring HJ, Streble A, Valent P: Базофилоспецифический эктофермент E-NPP3 (CD203c) в качестве маркера активации клеток и диагностики аллергии. Int Arch Allergy Immunol 2004, 133: 317–29. 10.1159 / 000077351

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 15.

    Kahlert H, Cromwell O, Fiebig H: Измерение способности активировать базофилы аллергенов пыльцы травы, аллергоидов и гипоаллергенных рекомбинантных производных с помощью проточной цитометрии с использованием анти-CD203c. Clin Exp Allergy 2003, 33: 1266–72. 10.1046 / j.1365-2222.2003.01756.x

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 16.

    Ocmant A, Mulier S, Hanssens L, Goldman M, Casimir G, Mascart F: Тесты активации базофилов для диагностики пищевой аллергии у детей. Clin Exp Allergy 2009, 39: 1234–45. 10.1111 / j.1365-2222.2009.03292.x

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 17.

    Tokuda R, Nagao M, Hiraguchi Y, Hosoki K, Matsuda T., Kouno K, Morita E, Fujisawa T: Антиген-индуцированная экспрессия CD203c на базофилах предсказывает IgE-опосредованную аллергию на пшеницу. Allergol Int 2009, 58: 193–9. 10.2332 / аллерголинт.08-OA-0023

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 18.

    Host A, Halken S: Проспективное исследование аллергии на коровье молоко у датских младенцев в течение первых 3 лет жизни.Клиническое течение относительно клинико-иммунологического типа реакции гиперчувствительности. Allergy 1990, 45: 587–96. 10.1111 / j.1398-9995.1990.tb00944.x

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 19.

    Boumiza R, Debard A, Monneret G: Тест активации базофилов с помощью проточной цитометрии: последние достижения в клинических исследованиях, стандартизация и новые перспективы. Clin Mol Allergy 2005, 3: 9–14.10.1186 / 1476-7961-3-9

    PubMed Central Статья PubMed Google Scholar

  • 20.

    Михова А., Абугалия М., Иванова Т., Николов Г., Тасков Х., Петрунов Б: Сравнение двух методов проточной цитометрии для дегрануляции базофилов у пациентов, сенсибилизированных к пыльце трав. Allergy 2006, 61: 1078–83. 10.1111 / j.1398-9995.2006.01087.x

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 21.

    Monneret G, Gutowski M, Bienvenu J: Обнаружение индуцированной аллергеном активации базофилов путем экспрессии антигена CD63 с использованием метода трехцветной проточной цитометрии. Clin Exp Allergy 1999, 115: 393–6.

    CAS Google Scholar

  • 22.

    Kinet JP: Высокоаффинный рецептор IgE (FcεRI): от физиологии к патологии. Ann Rev Immunol 1999, 17: 931–72.10.1146 / annurev.immunol.17.1.931

    Артикул CAS Google Scholar

  • 23.

    Bock SA: Естественная история пищевой чувствительности. J Allergy Clin Immunol 1982, 69: 173–7. 10.1016 / 0091-6749 (82)

  • -3

    Артикул CAS PubMed Google Scholar

  • 24.

    Sampson HA, Scanlon SM: Естественная история пищевой гиперчувствительности у детей с атопическим дерматитом. J Педиатр Ольга Цепела 1989, 115: 23–7.

    Артикул CAS Google Scholar

  • 25.

    Rubio A, Vivinus-Nebot M, Bourrier T, Saggio B, Albertini M, Bernard A: Польза теста активации базофилов при принятии решения о том, когда повторно вводить коровье молоко у детей с аллергией. Аллергия 2010. DOI: 10.1111 / j.1398–9995.2010.02432

    Google Scholar

  • Понимание результатов скрининга новорожденных с низким уровнем Т-клеток

    Вы только что получили результаты обследования новорожденного с низким содержанием Т-лимфоцитов.Что это значит?

    Младенцы могут казаться здоровыми при рождении и при этом иметь проблемы со здоровьем, которые необходимо выявлять и лечить. Перед выпиской вашему ребенку были проведены стандартные обследования новорожденных, которые включали взятие нескольких капель крови из пятки ребенка и тестирование на наличие ряда заболеваний. Один из тестов может выявить проблемы с иммунной системой, называемый тестом TREC, и у вашего ребенка результат этого теста был либо ненормальным, либо не дал четкого результата.Следовательно, необходимо как можно скорее провести дополнительное тестирование.

    Каждый штат решает, какие именно тесты необходимы в рамках скрининга новорожденных. Щелкните здесь, чтобы узнать о текущем статусе SCID Newborn Screening в США

    Что такое тестирование TREC?

    Тестирование

    TREC проверяет детей на тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД), ​​широко известный как болезнь пузырчатого мальчика, и другие заболевания с низким уровнем Т-лимфоцитов. Этот тест показывает, что у вашего ребенка может быть небольшое количество белых кровяных телец, называемых Т-лимфоцитами, иногда называемых Т-лимфоцитами.Когда Т-клетки развиваются в вилочковой железе, образуются TREC (круги для удаления рецепторов Т-клеток).

    Если у ребенка низкий уровень TREC, это вызывает опасения, что у ребенка может не быть или очень мало Т-лимфоцитов. Эти лейкоциты являются жизненно важными компонентами иммунной системы для предотвращения опасных для жизни инфекций.

    Важно помнить, что тест TREC очень полезен для скрининга на низкий уровень Т-клеток, но он не подтверждает диагноз — он только определяет что-то ненормальное.Как мы расскажем позже, дополнительное тестирование и советы ваших врачей помогут определить, действительно ли у вашего ребенка низкий уровень Т-лимфоцитов или их нет.

    Как работает тестирование TREC?

    По мере того, как Т-клетки развивают свой рецептор, небольшой фрагмент ДНК, который обычно наблюдается во всех человеческих Т-клетках, образует круг, который остается внутри развивающейся клетки — это TREC. У младенцев большинство Т-клеток имеют TREC. Поскольку TREC представляют собой небольшой фрагмент ДНК, их можно надежно обнаружить даже на высушенных образцах крови с помощью метода тестирования, называемого полимеразной цепной реакцией (ПЦР).ПЦР может использоваться для обнаружения наличия определенного участка ДНК, что делает его идеальным тестом для поиска TREC.

    Почему важны оценка и дальнейшее наблюдение со стороны специалиста?

    Заболевания, связанные с первичным иммунодефицитом, являются серьезными генетическими заболеваниями, и при отсутствии надлежащего диагноза и лечения они могут представлять опасность для жизни.

    Тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД) обычно считается наиболее серьезным из заболеваний, связанных с первичным иммунодефицитом.Младенцы с ТКИН выглядят здоровыми при рождении, но без раннего лечения, чаще всего путем трансплантации костного мозга от здорового донора, эти младенцы не могут выжить. У заболевших младенцев отсутствуют Т-клетки, которые нормально работают. Как до, так и после корректирующего лечения младенцев с ТКИН помещают в изоляцию, чтобы защитить их или изолировать от микробов, которые могут вызвать у них заболевание — без принятия таких мер предосторожности семья рискует нанести необратимый ущерб, снижая шансы на успешный исход после пересадка.(Для получения дополнительной информации см. Брошюру IDF «SCID: Руководство для родителей», в которой описаны следующие шаги, меры безопасности, лечение, причины и многое другое).

    Помимо ТКИД, другие расстройства, связанные с низким уровнем Т-лимфоцитов, требуют постоянного ухода со стороны специалиста, например клинического иммунолога, который обладает знаниями и опытом, чтобы определить, какие методы лечения наиболее подходят для индивидуальных потребностей каждого пациента. Клинические иммунологи прошли специальную подготовку по распознаванию, диагностике и лечению расстройств, связанных с низким уровнем Т-лимфоцитов.

    Младенцы с окончательным диагнозом ТКИД немедленно отправляются на лечение, соответствующее их диагнозу. Дети без такого окончательного диагноза также нуждаются в постоянном обследовании и последующем наблюдении у специалиста, чтобы убедиться, что причина низкого уровня Т-лимфоцитов понятна и лечиться соответствующим образом.

    Какие состояния или расстройства могут наблюдаться у младенцев, у которых нет Т-лимфоцитов или их низкий уровень?

    Основная причина, по которой TREC тестируют у новорожденных, — это обнаружение SCID, но могут быть идентифицированы и другие состояния.Тест может идентифицировать:

    • Комбинированный иммунодефицит (негерметичный ТКИД)
    • Врожденные аномалии, связанные с Т-лимфоцитами
    • Недоношенность
    • Синдром Ди Джорджи
    • Генетические синдромы, связанные с низким уровнем Т-клеток
    • Лимфопения (низкое количество лимфоцитов) младенческого возраста
    • Другие первичные иммунодефициты
    • Вторичный дефицит Т-клеток из-за потери Т-клеток
    • Тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД)
    • Транзиторная иммуносупрессия от материнских лекарств или определенных вирусных воздействий во время беременности

    Все дети с низким уровнем Т-лимфоцитов должны пройти обследование клиническим иммунологом, чтобы помочь семьям и педиатрам выбрать лучший план лечения и наблюдения с учетом индивидуальных потребностей каждого ребенка.

    Распространены ли низкие Т-клетки у младенцев?

    По данным скрининга новорожденных, примерно у 1 из 20 000 младенцев наблюдается низкий уровень Т-лимфоцитов.

    У скольких детей с ненормальным тестом TREC низкий уровень Т-клеток, не связанный с SCID?

    40-50% младенцев с аномальным тестом TREC имеют низкий уровень Т-лимфоцитов. Из них около двух третей будут иметь низкие Т-клетки, не связанные с ТКИД.

    Как проходят тесты?

    Департамент здравоохранения каждого штата определяет типы и порядок проведения других тестов, поэтому точный процесс может варьироваться от штата к штату.Независимо от конкретных деталей, для постановки диагноза необходимо более точное обследование. Вам нужно будет принести своего ребенка, чтобы человек, обученный брать кровь у маленьких детей, взял небольшое количество крови вашего ребенка для анализа. Как правило, базовое тестирование будет включать в себя полный анализ крови с дифференциалом (CBC с diff), который показывает различные типы лейкоцитов иммунной системы. Обычно у младенцев с аномальными TREC также будет низкое абсолютное количество лимфоцитов (также известное как ALC).Исследования лимфоцитов будут подсчитывать количество лимфоцитов [это включает Т-клетки и другие типы лимфоцитов, называемые В-клетками и естественными киллерами (NK) -клетками].

    Обычно проводится некоторый тест функции Т-клеток, чтобы определить, насколько хорошо работают Т-клетки, по крайней мере, в пробирке. Самый распространенный тип теста — это пролиферация лимфоцитов до митогенов. Митогены — это вещества растительного происхождения, которые стимулируют размножение здоровых функциональных Т-клеток, но не дефектных. В этом тесте Т-клетки пациента инкубируются с различными митогенами в пробирке, а затем измеряется способность клеток делиться или пролиферировать в ответ на эти стимулы.Хотя нормальный результат несколько обнадеживает, есть ограниченные данные, позволяющие предположить, что нормальный результат пролиферации коррелирует с хорошо функционирующими Т-клетками в организме. Большинство лабораторий проверяют по крайней мере два из трех следующих митогенов — фитогемагглютинин, семечки или конканавалин A.

    Поскольку низкий уровень Т-клеток может возникнуть из-за хромосомных аномалий, ваш врач может назначить тест, называемый кариотипом, который представляет собой анализ крови, который определяет и оценивает размер, форму и количество хромосом в образце пациента.Родственный тест, называемый флуоресцентной гибридизацией in situ (также известный как FISH), особенно полезен для исключения таких синдромов, как синдром Ди Джорджи. Другие тесты, которые могут быть выполнены для диагностики синдрома делеции 22q11, включают мультиплексную амплификацию зонда, зависящую от лигирования (также известную как MLPA) или хромосомный микрочип (также известный как CMA). Какой тест проведет ваш врач, скорее всего, будет зависеть от доступности и стоимости теста, страхового покрытия и осведомленности врача о тесте.

    Также может быть показано генетическое тестирование, особенно если подозрение на ТКИД является высоким.Большинство коммерческих лабораторий генетического тестирования предлагают «панель SCID», которая содержит переменное количество генов, вызывающих SCID. Эти тесты анализируют генетическую последовательность пациента, чтобы найти мутации в генах на панели. Иногда на этих панелях не выявляются мутации, вызывающие заболевание, поэтому ваш врач может порекомендовать более обширное генетическое тестирование, такое как секвенирование всего экзома, которое проверяет все гены пациента. Ваш врач обычно должен получить предварительное разрешение от вашей страховой компании перед любым генетическим тестированием.

    Может ли в конечном итоге диагностироваться ТКИД у вашего ребенка?

    Важно отметить, что некоторые младенцы с аномальными TREC и низким уровнем Т-лимфоцитов при рождении со временем нормализуются, не страдая от серьезных инфекций или плохого состояния здоровья. Однако у многих младенцев с аномальными тестами TREC в конечном итоге диагностируется какая-либо форма SCID или другой первичный иммунодефицит после исчерпывающей оценки.

    Что делать ребенку в ожидании диагноза? Как мне уберечь своего ребенка от болезни?

    Требуется время, чтобы провести тщательное обследование ребенка с отклонениями от нормы TREC.Некоторые лабораторные тесты возвращаются быстро, в то время как другие, например, генетические, могут занять недели или месяцы. Иногда врачи хотят повторять анализы через какое-то время, чтобы попытаться найти какие-либо тенденции в количестве клеток ребенка, особенно если цифры погранично низкие и / или ребенок не слишком болен.

    Как бы сложно это ни казалось, постарайтесь сохранять спокойствие и помните, что вы не одиноки. Ваш клинический иммунолог может помочь вам на каждом этапе этого запутанного и сложного процесса.Они готовы предоставить вам точную, научно обоснованную информацию, чтобы вы могли принимать обоснованные решения за своего ребенка.

    В течение этого времени наиболее безопасным способом действий является предположение, что у ребенка может быть иммунная проблема, пока не будет доказано обратное. Если у ребенка действительно первичный иммунодефицит, то он подвергается более высокому риску развития инфекций, которые могут быть опасными для жизни, если их не распознать и не лечить надлежащим образом. Таким образом, рекомендуется принять меры предосторожности:

    • Спросите своего иммунолога, что вам следует и чего не следует делать, пока ваш ребенок все еще проходит обследование.
      • Проконсультируйтесь с врачом, если у ребенка появятся признаки или симптомы инфекции (например, лихорадка, кашель или диарея).
      • Обсудите со своим иммунологом, следует ли вашему ребенку делать регулярные прививки. У младенцев с низким уровнем лимфоцитов иммунизация часто откладывается до тех пор, пока не станет больше известно об иммунной системе вашего ребенка.
    • Спросите своего иммунолога, можно ли кормить грудью или кормление смесью лучше в настоящее время, поскольку грудное вскармливание может подвергнуть ребенка инфекции, называемой цитомегаловирусом (также известной как ЦМВ).ЦМВ может быть очень вредным, особенно если вашему ребенку нужна пересадка. Если ваш ребенок госпитализирован по какой-либо причине, убедитесь, что врачи больницы проконсультируются с вашим иммунологом, прежде чем начинать стандартное лечение.
    • Поддерживайте хорошую гигиену, включая частое мытье рук или использование дезинфицирующего средства для рук.
    • Избегайте контакта с больными людьми, когда у вас есть новорожденный. Обязательно спросите своего иммунолога, что делать, если ваш ребенок случайно контактирует с больным человеком, например со старшим братом, сестрой или родителем.
    • В целом, убедитесь, что у вас налажено хорошее общение со своим клиническим иммунологом и педиатром. Не стесняйтесь задавать вопросы и обязательно приходите на прием к врачу.

    Также не забудьте связаться с Фондом иммунодефицита (IDF) для получения дополнительных ресурсов и поддержки. Заболевания, связанные с первичным иммунодефицитом, затрагивают многие семьи, и IDF может помочь вам создать сеть поддержки, состоящую из людей, которые понимают, через что вы проходите. Зайдите на: www.primaryimmune.org/ask-idf.

    Глоссарий

    Комбинированный иммунодефицит — Иммунодефицит, когда и Т-, и В-лимфоциты недостаточны или отсутствуют.

    Цитомегаловирус — Цитомегаловирус (ЦМВ) — распространенный вирус, который может заразить практически любого. Большинство людей не знают, что у них ЦМВ, потому что он редко вызывает симптомы. Однако, если вы беременны или имеете ослабленную иммунную систему, ЦМВ является поводом для беспокойства. После заражения ЦМВ ваше тело сохраняет вирус на всю жизнь.Однако, если вы здоровы, ЦМВ обычно остается в спящем состоянии. ЦМВ передается от человека к человеку через жидкости организма, такие как кровь, слюна, моча, сперма и грудное молоко.

    Синдром Ди Джорджи — Синдром Ди Джорджи является первичным иммунодефицитным заболеванием, вызываемым аномальной миграцией и развитием определенных клеток и тканей во время внутриутробного развития плода. Как часть порока развития, вилочковая железа может быть поражена, и выработка Т-клеток может быть нарушена, что приведет к низкому количеству Т-клеток и частым инфекциям.Синдром ДиДжорджи часто, но не исключительно, вызван делециями в хромосоме 22 (отсюда и другое название синдром делеции 22q11.2). Однако было показано, что другие хромосомные аномалии, такие как делеции на хромосоме 10, также вызывают синдром ДиДжорджи.

    ДНК — Дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК), которая содержит биологические инструкции, которые делают каждый вид уникальным. ДНК вместе с содержащимися в ней инструкциями передается от взрослых организмов к их потомству во время размножения.

    Заболевания первичного иммунодефицита (PI) — Заболевания первичного иммунодефицита (PI) представляют собой группу из более чем 350 редких хронических заболеваний, при которых часть иммунной системы организма отсутствует или функционирует неправильно. Хотя эти заболевания не заразны, они вызваны наследственными или генетическими дефектами, и, хотя некоторые расстройства присутствуют при рождении или в раннем детстве, расстройства могут затронуть любого, независимо от возраста и пола. Некоторые влияют на одну часть иммунной системы; другие могут повлиять на один или несколько компонентов системы.

    Тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД) — Тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД, произносится как «занос») — это потенциально смертельный первичный иммунодефицит, при котором сочетается отсутствие функции Т-клеток и В-клеток. Существует как минимум 13 различных генетических дефектов, которые могут вызвать ТКИД. Эти дефекты приводят к крайней восприимчивости к очень серьезным инфекциям. Это состояние обычно считается наиболее серьезным из первичных иммунодефицитов.

    Круг для вырезания рецепторов Т-клеток (TREC) — TREC образуются в вилочковой железе как тип иммунных или лейкоцитов, называемых Т-клетками.

alexxlab

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *