Клебсиелла окситока у грудничка в кале: Клебсиелла у грудничка в кале

Содержание

лечение, симптомы, норма, чего боится

Клебсиелла у грудничка в кале – это не всегда признак заболевания. Данные микроорганизмы относятся к условно-патогенным, и в небольшим количестве могут присутствовать в кишечнике ребенка постоянно.

Что такое клебсиелла

При определенных условиях происходит активизация микроорганизмов, увеличивается их количество и развивается воспалительная реакция с появлением соответствующей симптоматики. Одновременно клебсиеллы появляются в кале. В этом случае требуется диагностика дисбактериоза, а также соответствующая терапия.

Один из симптомов появления клебсиеллы в организме — дисбактериоз

Выделяется несколько видов микроорганизмов. При попадании в ткани они вызывают развитие воспалительных процессов в различных органах. В детском возрасте клебсиелла приводит к возникновению следующих болезней:

  • менингит;
  • пневмония;
  • острый средний отит;
  • синуситы;
  • пиелонефрит;
  • гнойные процессы в мягких тканях различной локализации.

При выраженном снижении иммунитета клебсиеллы провоцируют развитие сепсиса. Состояние сопровождается появлением и размножением микроорганизмов в крови с последующим распространением по всему организму.

Почему активизируется инфекция

Клебсиелла у грудничка в кале появляется из-за увеличения количества микроорганизмов в кишечнике. Обычно это происходит при воздействии определенных факторов:

  • нарушение метаболизма на фоне сахарного диабета;
  • врожденный иммунодефицит;
  • снижение иммунитета;
  • хронические заболевания, способствующие истощению организма младенца;
  • длительное применение антибиотиков, приводящее к угнетению нормальной микрофлоры и активизации условно-болезнетворных микроорганизмов;
  • искусственное вскармливание.

Также увеличение количества бактерий в кишечнике может происходить при употреблении пищи немытыми руками, при контакте с животными.

Важно следить за чистотой в доме. Младенец в процессе познания окружающего мира норовит попробовать различные предметы на вкус. Из-за недостаточной гигиены повышается риск развития кишечных инфекций, включая сальмонеллез и шигеллез. Грудничок может легко заразиться гельминтами, что тоже провоцирует рост количества клебсиелл.

Симптомы, которые указывают на наличие клебсиеллы в организме

На возможную активизацию клебсиеллы указывают такие симптомы:

  • вздутие живота;
  • частое отхождение газов;
  • систематическое срыгивание;
  • субфебрильная температура;
  • колики, вызывающие выраженное беспокойство ребенка;
  • частый жидкий стул;
  • появление в кале прожилок крови, слизи, гноя;
  • ухудшение аппетита;
  • нарушение сна;
  • гнилостный запах стула.
Клебсиелла у грудничка в кале с повышением количества микробов вызывает дисбактериоз

На фоне функциональных нарушений пищеварительной системы страдают другие органы. Ребенок становится вялым, капризным, плохо ест и спит. Кожные покровы бледные, часто имеют сероватый оттенок. Отмечается недостаточная прибавка веса.

Диагностика

Выявление клебсиелл в кале проводится при помощи бактериологического исследования. Это лабораторный анализ, который подразумевает посев кала или мазка со слизистой оболочки прямой кишки на специальные питательные среды.

Исследование дает возможность установить:

  • факт наличия клебсиеллы у грудничка в кале;
  • количество микроорганизмов в единице объема исследуемого биологического материала;
  • вид и штамм бактерий — у ребенка в кале обычно появляется клебсиелла окситока;
  • устойчивость выделенных микроорганизмов к антибиотикам.

Бактериологический посев – это информативное и ценное исследование. Определение устойчивости к антибиотикам дает возможность оценить, чего боится бактерия, а также подобрать наиболее эффективный препарат для лечения. Это очень важно в современных условиях, так как большое количество штаммов клебсиелл обладает устойчивостью к различным антибиотикам.

Для выяснения причины появления микроорганизмов в кале младенца назначаются различные методики исследований:

  • клинический анализ крови и мочи;
  • анализ на определение концентрации глюкозы;
  • иммунологические и аллергические пробы;
  • выявление антител к различным возбудителям инфекционных заболеваний;
  • при необходимости, исследование мочи, мокроты, крови на наличие возбудителя;
  • УЗИ внутренних органов.

На основании всех данных объективного обследования врач определяет дальнейшую лечебно-профилактическую тактику. Норма клебсиелл в 1 г кала не должна превышать 105 клеток. При эпизодическом увеличении количества назначается медицинское наблюдение с периодическим бактериологическим посевом кала.

Последствия и осложнения

Систематическое повышение количества клебсиелл в кале ребенка провоцирует развитие осложнений:

  • нарушение пищеварения с недостаточным усваиванием питательных веществ и витаминов;
  • отставание ребенка в развитии;
  • повышение риска развития воспалений в различных органах и тканях;
  • снижение активности иммунитета, провоцирующее присоединение других инфекций, включая кандидоз;
  • развитие острой кишечной инфекции.
Перед лечением от клебсиеллы нужно провести диагностику

В большинстве случаев у детей с диагностированными пневмонией, менингитом, пиелонефритом, синуситами, которые были вызваны клебсиеллами, отмечалось увеличение количества бактерий в кишечнике.

Лечение

Проведение терапевтических мероприятий требуется, когда количество клебсиелл в кале ребенка превышает норму. Лечение заключается в следующем:

  • уменьшение количества клебсиелл;
  • профилактика инфекционно-воспалительных процессов различной локализации;
  • восстановление нормальной микрофлоры кишечника;
  • улучшение работы пищеварительной системы и других органов.

Терапевтические мероприятия проводятся в 2 этапа:

  1. Снижение количества клебсиелл с помощью антибактериальных средств: антибиотики назначаются только врачом по строгим показаниям. Обычно предварительно проводится определение чувствительности выделенных микроорганизмов к антибиотику. Как правило, используются средства с широким спектром действия, к которым относятся полусинтетические пенициллины и цефалоспорины.
  2. Восстановление нормальной микрофлоры – назначение пробиотиков. Одновременно рекомендуется увеличить количество кисломолочных продуктов в рационе.

Назначаются мероприятия, направленные на снижение факторов, спровоцировавших увеличение количества клебсиелл в кишечнике.

Лечение дисбактериоза должен назначать только врач. Попытки самостоятельно восстановить микрофлору кишечника приводят к усугублению состояния и развитию негативных последствий.

Также интересно почитать: открытое овальное окно в сердце у детей

Клебсиелла окситока — Педиатрия — 1.05.2014

анонимно (Женщина, 27 лет)

Клебсиелла окситока в зеве при беременности

Здравствуйте. На скрининге в 22 недели обнаружили взвесь в околоплодных водах,врачи сказали, что это внутриктробная инфекция. Сдав мочу, кровь,мазок из влагалища и зева обнаружили в зеве Стрептококк вириданс 10*5 ….

анонимно (Женщина, 25 лет)

Клебсиелла окситока

Здравствуйте! Ребенку год и 2 месяца!Болели 2 раза ангиной гнойной, 2 недели назад обнаружила налет на миндалинах, лор сказал у нас аденоидид, сжали кровь и мазок. Выявили клебсиеллу окситока 10*6…

анонимно (Женщина, 25 лет)

Раздражение горла Клебсиелла Окситока

Добрый день! После лечения хеликобактер антибиотиками (амоксициллин и кларитромицин) стало болеть горло. Сначала было ощущение комка в горле, после — раздражение задней стенки. Раздражение усиливается или уменьшается периодами, связи ни…

Александр Медведь (Женщина, 29 лет)

Клебсиелла окситока и золотистый стафилакок

Ребенку три месяца, с рождения начались аллергические реакции. Две недели назад пришлось прекратить кормление грудью и перейти на смеси. До этого месяц докармливала смесью. На смесь аллергии не было. Но…

анонимно (Мужчина)

Как вылечит золотистый стафилококк и клебсиеллу окситока

Здравствуйте! Ребенку 11 месяцев, 10 из которых мы боремся с золотистым стафилококком и клебсиеллой окситока в кале. Сначала выявили золотистый стафилококк,лечили курсом пиобактериофага комплксного. Как результат — плюс к нему…

анонимно

Как справиться с клебсиеллой окситока

Добрый день! Малышке 4 месяца и 3 недели, на грудном вскармливании, начал беспокоить животик, ребенок не спал несколько ночей , сейчас тоже плохо спит но уже не платет а постоянно…

Евгения Кузнецова

клебсиелла окситока.

Здравствуйте. Моему ребенку 1,5 мес. В б/п кала была обнаружена клебсиелла окситока. Врач назначила бактериофаг. Мы нашли только бактериофаг клебсиелл пневмонии. Поможет ли он в нашем случае? существует ли бактериофаг…

klebsiella oxytoca в кале и моче, норма и лечение

Патологические процессы инфекционного характера при современных условиях жизни проявляются достаточно часто. По статистике паразиты проникают в организм детей чаще, нежели во взрослые человеческие органы.

Детский иммунитет, который не успел сформироваться на том уровне, чтобы защитить малыша от заболеваний, пропускает в органы малыша разного вида бактерии, провоцирующие серьезные патологические процессы.

Бактерия носит условно-патогенный характер. Проявляет себя при определенных провоцирующих для этого условиях.

Она, попадая в толстую кишку, создает немалое количество желудочно-кишечных патологий. Важно знать, что этот микроорганизм может быть провокатором пневмонии.

 

Содержание статьи

Клиническая картина klebsiella oxytoca у ребенка

Клебсиелла окситока ребенка атакует после общения с инфицированным носителем. Передаваться инфекция способна:

  • воздушно-капельным способом;
  • через грязные руки;
  • невымытые овощи, фрукты;
  • из-за несоблюдения правил гигиены;
  • грудничкам паразит передается через молоко, если мамы не соблюдают личную гигиену перед и после кормлением грудью.

Особенности микроорганизма в том, что он находится в горле, слизистых оболочках дыхательной системы, на кожных покровах, в моче и не приносит никакого вреда до определенного момента.

Паразит klebsiella oxytoca у грудничка симптомы имеет не всегда ярко выраженные. Наличие инфекции можно точно определить после лабораторных исследований.

Родители должны обращать внимание на признаки, которые сигнализируют о проникновении бактерии в организм крохи:

  • У малыша наблюдается частое вздутие живота. Ребенок беспокойно себя ведет. Поджимая ножки к животику, плачет, что является звоночком о проявлении болевых ощущений.
  • Малыш часто срыгивает, даже при употреблении небольшого количества еды.
  • Значительно снижается аппетит.
  • Грудничок не набирает вес по норме.
  • Наблюдается метеоризм, который сочетается с болями живота, толстой кишки.
  • Приступы рвоты могут достигать 20 раз в течение суток.
  • Обезвоживается организм из-за приступов рвоты.
  • Кал имеет неприятный, кислый запах;
  • В кале грудничка присутствуют примеси слизи с кровяными выделениями.
  • Процедура дефекации проходит болезненно.
  • Температура тела выше нормы, градусник может показывать 39 градусов и выше.
  • Может присутствовать приступ лихорадки.
  • Появляются синяки под глазами.
  • Кожные покровы становятся бледными.
  • Наблюдается сильный кашель с выделением мокроты.
  • Спазмы в кишечнике и пищеводе.

Родители, обеспокоенные состоянием здоровья своего чада, не могут самостоятельно установить наличие бактерий. Симптоматика имеет схожести с дисбактериозом, а он мучает 90% новорожденных.

Распознать бактерию можно по результатам лабораторных исследований. Обнаруживается клебсиелла окситока в кале у ребенка, так как инфекция в 70% случаев локализуется в желудочно-кишечном тракте.

Если у новорожденного родители часто замечают беспокойное состояние, малыш подымает ножки к животику, что свидетельствует о болевых ощущениях, наблюдаются усиленные газообразования, это может быть сигналом о проникновении бактериальной инфекции клебсиеллы окситоки.

Находят клебсиелла окситока у грудничка в моче гораздо реже, чем в кале.

Проникает она в мочу случайно, не имеет симптомов, не провоцирует осложнений и заболеваний разных видов.

Важно выявить патологию при первых проявлениях и своевременно приступить к лечению.

Последствиями длительного прогрессирования паразитов могут стать провокаторами ряда патологических процессов в детском организме:

  • офтальмологические заболевания;
  • недуги инфекционного характера;
  • патологии мочеполовых органов;
  • заболевания суставов;
  • заболевания оболочек мозга;
  • чаще всего случаются заболевания желудочно-кишечного тракта.

Прогрессировать бактерия клебсиелла окситока при слабой иммунной системе, после лечения других заболеваний антибактериальными средствами.

Клебсиелла окситока лечение у детей требует после полного обследования, подтвержденного диагноза специалистами.

Как диагностировать болезнь у детей

Предварительно диагностика проводится на основании симптомов, после расспросов родителей о состоянии ребенка.

Конкретных признаков, по которым устанавливается наличие паразитов не существует. Поэтому специалист для правильного заключения направляет маленьких пациентов сдать дополнительные лабораторные анализы.

Испражнения являются главным материалом при исследовании. При сепсисе рекомендуют дополнительно исследовать кровь больного.

Современная медицина определила наиболее распространенные методы исследования:

  1. Бактериоскопический метод. Мазок исследуется под микроскопом после окрашивания по специальной методике. При наличии бактерии в мазке находятся граммоотрицательные палочки, которые расположены небольшими группами или по отдельности.
  2. Бактериологическая методика исследования, при которой высеивают материал на питательную среду, и регистрируют рост характерных колоний.
  3. В редких случаях пользуются серологическим способом. Проводится реакция агглютинации со специальным реагентом. Если в материале находится возбудитель, то происходит образование специфического осадка.

Дополнительными методами исследования выступают общий анализ крови, мочи, колоноскопия, копрограмма.

Внимание: показатели копрограммы детей имеют значительные отличия от данных исследования взрослого человека, поэтому лучше, если результат посмотрит специалист и проконсультирует с профессиональной точки зрения.

Расшифровка анализов

Результата исследования на дисбактериоз покажет не только существование микроорганизмов в кале ребенка, но и их количество. Сдавать анализ и получать результат рекомендуют в лаборатории детского медицинского учреждения.

Норма klebsiella oxytoca грудного ребенка не должна превышать 10 в 5 степени бактерий на каждый грамм кала.

Показатель klebsiella oxytoca в кале у грудничка 10 в 8 степени считается значительным отклонением от нормы и требует незамедлительного терапевтического вмешательства.

При данном результате у малыша держится высокая температура до пяти дней. Если своевременно не начать лечение последствиями могут быть серьезные патологические процессы.

Какое лечение для детей можно выбрать

При наличии в организме клебсиелла окситока у грудничка лечение должно проходить по назначению доктора. Оно основано на двух направлениях:

  • Подавить рост патогенной микрофлоры.
  • Восстановление нормальной микрофлоры.

Чтобы лечение привело к эффективному результату, специалисты приписывают лекарственные препараты.

«Умные» вирусы Бактериофаги, которые избавляют организм от паразитов. Применять малышам рекомендуют до употребления пищи три раза в сутки.

Дозировку определяет лечащий доктор, зависит доза от количества микроорганизмов.

Курс лечения длится не менее семи дней. Часто средства вводят с помощью клизмы, этот прием более эффективный.

Пробиотики Аципол, Линекс, Бифидумбактерин. Восстанавливают баланс микрофлоры, подселяя в нее нормальные бактерии. Их дают малышам в течение десяти дней два раза в сутки.

Обеспечить благоприятную среду для роста нормальной микрофлоры в кишечнике помогают пребиотики. Наиболее эффективным по результатам лечения определили Хилак форте.

При легкой форме проявления недуга лечение проходит дома под наблюдением специалиста. Если форма тяжелая, ребенка госпитализируют в стационарное отделение.

Помощниками при борьбе с паразитами являются растворы хлорида натрия и глюкозы. Если у ребенка нет рвотных приступов, растворы вводят перорально. Если рвота прогрессирует, их вводят внутривенно.

Реабилитационный период

Обязательно проводится курс укрепительной терапии. Иммунитет ребенка восстанавливается специально разработанной специалистом диетой.

Рацион питания насыщен полезными веществами, исключает химические вещества. Грудное кормление корректируется доктором независимо от формы недуга.

Реабилитационный период включает прием витаминных комплексов, врачом могут быть назначены средства народной медицины.

Обязательными являются курсы массажа, которые проводит мама с опытом в данной сфере или же профессиональный массажист.

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники

Сыпь, сафиллококк и клебсиелла в кале — Вопрос гастроэнтерологу

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 69 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гинеколога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 97.13% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Клебсиелла у грудничка в кале и моче: симптомы, лечение

Симптомы клебсиеллы у грудничка зависят от того, где локализуется возбудитель. Если речь идет о клебсиелле пневмонии, то она вызывает воспаление легких и локализуется в альвеолах. Если воспалительный процесс локализуется возле корня легкого, то тогда развивается очаговая пневмония. Когда воспаление охватывает отдельную долю легкого, то речь идет о крупозной или долевой пневмонии.

Воспаление легких, вызванное клебсиеллой пневмонии, чаще наблюдается у новорожденных с развитием ранней пневмонии. Данный возбудитель относится к флоре, которая является больничной, что и является фактором заражения ребенка после родов. Что касается пневмонии у грудничка, то клебсиелла может вызывать воспалительный процесс в любом возрасте, тогда фактором передачи могут быть больные люди.

Первые признаки воспаления легких появляются уже в первый день заболевания. Ведущим симптомом является интоксикационный. При этом ребенок начинает плохо кушать, капризничает, повышается температура тела. В начале заболевания температура тела может быть субфебрильной, но на второй день она, как правило, повышается до 39. Чем меньше возраст ребенка, тем меньше нужно ориентироваться на показатель температуры, поскольку она может и не подниматься у совсем маленьких деток.

Вместе с этими симптомами появляются признаки одышки. Для пневмонии характерна первая-вторая степень одышки. У грудничков это проявляется бледностью кожи и цианозом вокруг рта, который появляется при беспокойстве ребенка. Кроме этого в акте дыхания принимают участие дополнительные мышцы – можно заметить у ребенка раздувание крыл носа, втягивание надключичных областей. Ребенок при этом неактивный, чаще лежит и не хочет играть. Важно на данном этапе хорошо поить ребенка, ведь с повышенной температурой он теряет много жидкости. Кроме этих симптомов характерным для пневмонии является кашель. Сначала он имеет сухой характер, если пневмония развивалась без предыдущего ринита. Далее кашель становится более глубоким  и влажным. Интоксикация нарастает с повышением температуры тела. Также наблюдается увеличение частоты дыхания ребенка и увеличение частоты сердцебиения.

Все эти симптомы дыхательной недостаточности  говорят о большой вероятности пневмонии, на что сразу нужно обращать внимание. Тот факт, который точно может сказать о клебсиелле, как возбудителе пневмонии, нельзя выделить на начальном этапе. Более точная диагностика может быть только после проведения лабораторных исследований. Клебсиелла и золотистый стафилококк у грудничка, как возбудители воспалительного процесса в легких, характеризуются развитием тяжелого течения пневмонии. Сочетание этих двух возбудителей приводит к быстрому развитию некротических изменений в альвеолах, которые сложно в дальнейшем корректировать. Такие пневмонии, как правило, развиваются у деток с тяжелыми сопутствующими патологиями или иммунодефицитами.

Клебсиелла окситока у грудничка вызывает развитие стоматита и гингивита. Она в нормальных условиях может быть на коже в небольшой концентрации, но при определенных условиях попадает на слизистую и начинает размножаться. Поэтому пик заболеваемости клебсиеллой окситока – это возраст деток начиная с шести месяцев. Именно в это время  начинается прорезывание зубов и ребенок может заражаться через грязные предметы и игрушки. Первые симптомы стоматита, вызванного именно клебсиеллой, характеризуются наличием воспалительных очагов на слизистой. Элементы высыпаний имеют цвет белых точек, которые покрывают всю слизистую оболочку изнутри ротовой полости, или могут быть единичные очаги на слизистой щеки. Высыпания в ротовой полости вызывают зуд и жжение, поэтому ребенок не может ничего кушать и отказывается от груди. Может повышаться температура тела. Такой стоматит имеет опасность распространения далее на желудочно-кишечный тракт с развитием воспаления. Поэтому важно сразу обращать внимание на первые признаки стоматита.

Если клебсиелла попадает восходящим путем на мочевыводящие пути и почки, то это может приводить к развитию воспаления органов мочеполовой системы. И клебсиелла, как один из возможных возбудителей, занимает одно из наиболее приоритетных мест. Она вызывает острый пиелонефрит у девочек первого года жизни у более, чем 45% случаев.

Первые симптомы пиелонефрита или инфекции мочеполовых путей чаще проявляются повышением температуры тела. Ребенок также становится беспокойным и отказывается от еды. При этом никаких других симптомов нет, поскольку сказать о боли в спине малыш не может. Единственный симптом, который мама может заметить – это нарушение процесса мочеиспускания. Ребенок может меньше или наоборот чаще мочиться, а цвет мочи может быть мутный. Но это сложно диагностировать, если малыш носит подгузник. Поэтому нужно чтобы мама на это обратила особое внимание, особенно если нет никаких других причин для повышения температуры.

Клебсиелла, как возбудитель кишечной инфекции, является наиболее частым проявлением инфицирования у грудничка. Это объясняется тем, что у малыша она находится в кишечнике в небольшом количестве, и в определенных условиях при снижении местной полезной флоры могут возникать симптомы кишечной инфекции. Это проявляется тем, что ребенок становится беспокойным, кричит и уже на этом фоне могут развиваться колики. Частым симптомом, который может насторожить в плане инфицирования клебсиеллой, может быть нарушение характера стула. Чаще всего развивается жидкий стул , что должно насторожить маму. Стул может быть обычным, но увеличение количества стула больше пяти за день также можно считать поносом. Это происходит из-за того, что размножается патогенный микроорганизм и вызывает движение воды из клеток кишечника в пространство – это приводит к началу диареи. Если диарея развивается на фоне клебсиеллы, то может повышаться температура тела, как реакция на любую инфекцию. Рвота – характерный симптом тяжелого течения кишечной инфекции у грудничка, вызванной клебсиеллой. Ребенок может рвать едой, которую он ел еще накануне. При тяжелой степени инфицирования может быть обезвоживание на фоне диареи и рвоты. Стадии обезвоживания, которые характерны для поражения именно клебсиеллой, ограничиваются только первой, поскольку клебсиелла по своему механизму не может вызывать серьезной диареи. Но главными признаками обезвоживания может быть сухость слизистых ребенка, отсутствие пота в области подмышек.

Разные виды клебсиеллы могут вызывать разные симптомы, в зависимости от органа, в котором локализован воспалительный процесс.

[25], [26], [27], [28]

Чем опасна клебсиелла для грудничка: симптомы и лечение инфекции

23 ноября 2018 14:00

Клебсиелла относится к условно-патогенным бактериям и именно ее зачастую считают «виновницей» развития дисбактериоза у малышей. Она действительно очень устойчива к окружающей среде, может сохраняться долгое время, как на предметах, так и на теле человека и погибает лишь спустя 30 минут при температуре 65 градусов. Что делать, чтобы помочь малышу справиться с инфекцией?

Читайте такжеГрудничковый массаж: основные принципы и правила

В наши дни все чаще у грудничков встречаются инфекционные заболевания, вызываемые патогенными микроорганизмами. Одними из них являются палочки Фридлендера, провоцирующие появление клебсиеллы. Несмотря на то, что эти палочки считаются достаточно безобидными и могут находиться повсюду, стремительное увеличение их количества имеет самые неожиданные последствия. В чем же причины их размножения клебсиеллы, какие симптомы можно наблюдать при данном заболевании и есть ли необходимость в его лечении, рассмотрим подробнее в данной статье.

Практически каждый родитель боится в результатах анализов на дисбактериоз увидеть это страшное слово – «клебсиелла». Однако данную бактерию можно встретить практически у всех, так как она является одной из множества бактерий, живущих в организме человека, никак себя не проявляя. Но такое «затишье» длится лишь до тех пор, пока в организме сохраняется оптимальная микрофлора. Если же количество «хороших» бактерий по каким-то причинам резко уменьшается, то патогенные бактерии, к которым относится клебсиелла, становится опасными.

Активизироваться клебсиелла начинает не спонтанно. На это ее могут спровоцировать несколько причин:

  • Ослабление иммунитета
  • Несоблюдение гигиенических условий
  • Неочищенная вода и продукты питания
  • Контакт с носителем инфекции

Важно помнить, что в основном патогенные микроорганизмы проникают в ткани новорожденного через мать в процессе родов или после них. Но так же существуют и другие штаммы, проникающие в организм крохи через пыль, еду, воду и шерсть животных.

Интересно, что по данным исследований ВОЗ, клебсиелла является потенциальным кандидатом на роль супербактерий, то есть бактерий, устойчивых к антибиотикам. А это значит, что они представляют собой угрозу для существования людей как вида в целом.

Для формирования супербактерий достаточно двух причин

Не до конца вылеченные инфекции. Зачастую после начала приема антибиотиков, пациенту становится значительно легче и он преждевременно прекращает прием назначенных медикаментов или же врач просчитывается с назначаемым курсом лечения, что так же может повлиять на развитие супербактерий.

Читайте такжеНасморк у грудного ребенка: причины появления и правильное лечение

Использование антибиотиков в большом количестве. Организм человека со многими инфекциями, включая и кишечные сбои, способен справиться самостоятельно. А злоупотребление антибиотиками крайне негативно сказывается на организме человека, так как применение таких сильных медикаментов приводит к тому, что бактерии адаптируются к ним, а значит, перестают на них реагировать.

Так как клебсиелла считается одной из самых распространенных больничных инфекций, она автоматически становится очень опасной, так как в больницах систематически применяются антибиотики. Это чревато тем, что в любой больнице может сформироваться очень устойчивый штамм, а пациенты этой клиники автоматически станут носителями данной супербактерии.

Чаще всего клебсиелла поражает кишечник новорожденного и больше этому подвержены ослабленные и недоношенные малыши. У грудничков клебсиеллез практически всегда протекает достаточно в тяжелой форме. Опасность данного заболевания состоит в том, что ее симптоматику очень легко перепутать с другими воспалительными процессами желудочно-кишечного тракта, такими как:

  • повышение температуры тела до 37-39 градусов
  • частое срыгивание или рвота, иногда это достигает 6-8 раз в сутки
  • очень частый и обильный жидкий стул до 20 раз в сутки
  • может присутствовать примесь крови в кале новорожденного
  • присутствует сероватый оттенок кожных покровов младенца
  • болезненность в области живота, вследствие чего малыш становится капризным
  • присутствует вялость и заторможенность
  • отсутствует аппетит

Инфекции, вызванные клебсиеллой, длятся дольше остальных кишечных инфекций, чем и отличаются от других подобных заболеваний. В связи с сильным обезвоживанием организма грудничка возникает угроза его жизни! Именно поэтому не стоит заниматься самолечением и при любой кишечной инфекции необходимо своевременно проконсультироваться с лечащим врачом.

Читайте такжеВиды аллергических реакций: как защитить ребенка от аллергии

Клебсиеллу возможно обнаружить лишь с помощью лабораторных исследований. Для этого у пациента берут часть каловых или рвотных масс, мазки из носа, анализ крови, в котором могут произойти некоторые изменения.
Анализ кала на дисбактериоз может быть непоказательным, поэтому в странах с хорошо развитой медициной данный анализ считается бесполезным и не применяется в таких случаях.

Причины, при которых необходимо лечить клебсиеллез:

  • превышенное количество бактерии в кале
  • угнетенное самочувствие ребенка

Если же у ребенка наблюдается хороший аппетит, и он не теряет вес, а набирает его по норме, то лечить клебсиеллез нет необходимости.

В чем заключается лечение клебсиеллеза?

Применение лечения с помощью антибиотиков при таком заболевании как клебсиеллез применяется крайне редко, только лишь в тяжелых случаях. Основная методика лечения при более легкой форме заболевания заключается в гидратации, то есть в восполнении жидкости в организме. Зачастую родители не могут справиться с данной проблемой, поэтому им предлагается госпитализация в клинику.

Существует несколько рекомендаций для профилактики клебсиеллеза:

  • кормить ребенка необходимо только тогда, когда он голоден, так как печень играет немаловажную роль в поддержании иммунной системы человека, а значит, она не должна быть перегружена
  • в рацион маленького ребенка или его мамы (при грудном вскармливании) обязательно должно входить большое количество овощей, фруктов, зелени и круп
  • использовать антибиотики в самых крайних случаях, только тогда, когда без них действительно невозможно обойтись.

Нашей девочке 4,5 месяца. Мы полностью на ГВ. За все это время стул ребенка нестабилен: в основном жидкий с непереваренными комочками, иногда просто водой, очень часто сплошная слизистая тягучая масса зеленого цвета. Кроме того, что всегда после кормления долго остается надутая, как шарик, и мучается пуками, но без капризов- нас ничего не беспокоит. Решили сдать анализ на дисбактериоз. У мамы в молоке в одной груди обнаружили Стафилококк epidermikus c не очень мне понятной припиской «немассивная обсемененная». Кал ребенка, картина такая: Патогенной флоры — не обнаружено. E.coli с нормальной ферментной активностью – 15*10 в 10 E.coli со сниженной ферментной активностью – 0 E.coli гемолитические- 0 Золотистый стафилококк- 4* 10 во 2 Бифидо

13 Дек Нашей девочке 4,5 месяца. Мы полностью на ГВ. За все это время стул ребенка нестабилен: в основном жидкий с непереваренными комочками, иногда просто водой, очень часто сплошная слизистая тягучая масса зеленого цвета. Кроме того, что всегда после кормления долго остается надутая, как шарик, и мучается пуками, но без капризов- нас ничего не беспокоит. Решили сдать анализ на дисбактериоз. У мамы в молоке в одной груди обнаружили Стафилококк epidermikus c не очень мне понятной припиской «немассивная обсемененная». Кал ребенка, картина такая: Патогенной флоры – не обнаружено. E.coli с нормальной ферментной активностью – 15*10 в 10 E.coli со сниженной ферментной активностью – 0 E.coli гемолитические- 0 Золотистый стафилококк- 4* 10 во 2 Бифидо- 10в 9 Лакто – 10 в 8 Клебсиелла – 3* 10 в7. Нужно ли лечиться маме и как лечить ребенка, не прибегая к антибиотикам, по более щадящей , но надежной схеме. Нужно ли вообще лечить ребенка с такими анализами и беспокойным стулом? Будем очень благодарны за консультацию

Posted at 14:24h in вопрос-ответ by admin

У Вашего ребёнка дисбиоз кишечника, аэробно-анаэробный, декомпенсированный. Лечение требуют два микроба:

 

–         Стафилококк золотистый ( Staphylococcus aureus) — факультативный и наиболее частый возбудитель стафилококкоза, частый представитель микрофлоры носа и кожи

 

Стафилококк золотистый способен вызывать целую вереницу болезней, от минорных заболеваний кожи, таких как прыщи, папулы, пиодермия, фурункулы, целлюлит, гиподермит, жировая гранулема, карбункулы и т.д.Под его влияние попадают многие органы: кожа, мягкие ткани, кости, суставы; вызывает инфекции в ранах. Как и прежде относится к числу пяти наиболее частых причин нозокомиальных (больничных) инфекций, часто является причиной постоперационных ран (нагноений).

 

–         Клебсиелла ( Klebsiella) — условно-патогенная бактерия.

Представители рода встречаются в фекалиях человека, на коже и слизистых дыхательных путей, в почве, воде, фруктах и овощах. Благодаря капсуле устойчивы в окружающей среде. Бактерии этого рода Вызывают пневмонию, урогенитальные инфекции, в том числе у новорожденных, у ослабленных и пожилых лиц, конъюнктивиты, менингиты, сепсис, острые кишечные инфекции. Klebsiella pneumoniae subsp. ozaenae и Klebsiella pneumoniae subsp. rhinoscleromatis вызывают соответственно озену и риносклерому (гранулематозное поражение слизистой оболочки верхних дыхательных путей).

Для лечения дисбиоза кишечника Вам необходимо обратиться к педиатру по месту жительства или вызвать врача из «Доброго Доктора» по телефону 8029-333-88-77 ежедневно с 9.00 до 19.00.

Эпидермальный стафилококк, который был обнаружен у мамы, в лечении не нуждается.

Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition

Введение: МИК часто диагностируется клинически у младенцев, когда они проявляются ректальным кровотечением, диареей и различной степенью боли. Они реагируют на изменение протеина в смеси или полное исключение протеина молока из рациона матери у младенцев, вскармливаемых грудью. Посев кала часто не проводится, потому что считается, что в этой возрастной группе инфекции встречаются нечасто. Эндоскопия, биопсия и диетические проблемы обычно не выполняются.Недавно Y. Davies и др. Представили ребенка старшего возраста с хронической диареей, вздутием живота и болями в животе. (VSL # 3 сателлитный симпозиум NASPGHAN на встрече в Монреале, 22 октября 2003 г.) Было показано, что у патента кишечная инфекция, вызванная токсигенным штаммом Ко. Ко выращивали из стула. Токсин был продемонстрирован. Пациент ответил на терапию пробиотиками. Здесь мы сообщаем о двух младенцах, у которых наблюдалась явная МИК, и в культуре их стула росло Ко.

Методы: Все культуры стула из практики автора (BB), проведенной за последние 3 года, были проанализированы, и два были признаны положительными на Ко.Краткое описание клинических случаев: 1. L.A., доношенный продукт нормальной беременности и делевери, представленный в возрасте 4 недель с сильными болями во время кормления, раздражительностью и гнойным газом с различной реакцией на выведение молочного белка из рациона матери и консервативным лечением. Через 3 недели у него развился сильный понос со спазмами с кровяными пятнами и слизью. Подозревали колит, вызванный молоком; стул с / х рос Ко. 2. О. доношенный продукт нормальной беременности и родов, представленный 3-месячным анамнезом перемежающегося ректального кровотечения, начавшегося в 10-недельном возрасте, с очевидной временной реакцией на устранение молочного белка из рациона матери, а затем устранение соевого белка.Стул стал более кровавым от слизи. Табурет с / х рос Ко.

Результаты: Ко обычно считается сапрофитом кишечника. В редких случаях считается, что он вызывает диарею или колит, вызванную приемом антибиотиков. Показано, что клинически изолированные штаммы Ко продуцируют низкомолекулярный цитотоксин, который вызывает геморрагический колит на модели подвздошной петли кролика и цитотоксические изменения в культурах клеток.

Заключение: Насколько нам известно, это первый отчет об ассоциации Ко с очевидным MIC.Эпидемиологические и проспективные клинические исследования с соответствующими бактериологическими исследованиями и исследованиями токсинов необходимы для дальнейшего определения их роли в МПК, и они планируются. Посев кала следует рассматривать в МПК и должен включать посев на все потенциальные и редкие патогены из-за относительно подавленного иммунного состояния новорожденного.

Ссылка (S): нет

Количественное и качественное исследование кишечной флоры новорожденных

J Glob Infect Dis.2012 октябрь-декабрь; 4 (4): 188–192.

Нидхи Шарма

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Рама Чаудхри

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Пинаки Паниграхи

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Департамент микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Авторские права: © Journal of Global Infectious Diseases

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями Creative Commons Attribution-Nonco. mmercial-Share Alike 3.0 Unported, что разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

В неонатальном периоде развивающаяся функция кишечного барьера обеспечивает неоптимальную защиту слизистой оболочки от инфекции. Установление нормальной комменсальной микрофлоры играет жизненно важную роль в этом процессе.

Цели:

Определить аэробные и анаэробные бактерии количественными и качественными методами в образцах фекалий новорожденных.

Условия и дизайн:

Проспективное исследование было проведено в двух группах в больнице третичного уровня: в группе А были недоношенные дети и в группе В — доношенные дети.

Материалы и методы:

В исследование были включены 62 недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и гестационным возрастом <34 недель и 29 доношенных новорожденных в возрасте 4 недель. Количественное определение бактериальной нагрузки проводили с помощью десятикратных серийных разведений на соответствующих средах.

Статистический анализ:

Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04.

Результаты и выводы:

Преобладающей аэробной бактерией была Klebsiella pneumoniae . У недоношенных младенцев аэробные бактерии были колонизированы в среднем 2,1 и анаэробными бактериями 0,1. Количественный анализ показал, что количество бактериальных колоний в фекалиях находится в диапазоне 10 4 -10 13 КОЕ / г. Грамотрицательные и грамположительные бактерии постепенно увеличивались с интервалом от 2 до 3 недель. Среднее значение log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3 по 14 день ( P > 0.05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05). Потенциальные патогенные аэробные бактерии преобладают в кишечной флоре недоношенных детей, находящихся на вскармливании в неонатальном отделении. Необходимо изучить меры по устранению этого дисбаланса в микроэкологии кишечника недоношенных детей.

Ключевые слова: Бактериальная флора, фекалии, кишечник, новорожденные, количественное определение

ВВЕДЕНИЕ

В неонатальный период формирование нормальной комменсальной микрофлоры играет важную роль в развитии защиты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.Сообщалось, что бактериальная флора недоношенных детей в отделении интенсивной терапии новорожденных (ОИТН) отличается от здоровых доношенных детей. [1,2] У здоровых желудочно-кишечный тракт доношенных новорожденных был колонизирован разнообразной микрофлорой. в течение 10 дней жизни, тогда как у недоношенных детей микрофлора не получает возможности для колонизации. У младенцев с низкой массой тела при рождении это важный фактор риска неонатальной смертности и заболеваемости, включая сепсис и желудочно-кишечные расстройства.[3,4] Большинство этих младенцев обычно получают лечение антибиотиками широкого спектра действия в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии вскоре после рождения. Таким образом, бактериальная флора этих младенцев характеризуется отложенной колонизацией желудочно-кишечного тракта ограниченным количеством бактерий. [5] Однако имеется ограниченная литература, касающаяся микробной флоры у недоношенных детей, особенно у детей с низкой массой тела при рождении (<1500 г), которые предрасположены к различным инфекционным и желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК).Таким образом, это исследование было проведено с целью определения фекальной микрофлоры у недоношенных детей, поступивших в отделение интенсивной терапии стационара третичного уровня, чтобы оценить риск развития желудочно-кишечных осложнений у этих детей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проспективное исследование (Фаза-I) было проведено в двух группах во Всеиндийском институте медицинских наук, Нью-Дели, Индия, после того, как оно было одобрено с этической точки зрения. В группу А вошли шестьдесят два недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и сроком беременности <34 недель.Из 62 случаев было проведено количественное определение 34 образцов стула и качественный анализ фекальной бактериальной флоры в 28. Образцы были собраны на 3, 7, 14, 21 день (все ± 2 дня) у 34 детей. В группе Б обследовано 29 доношенных новорожденных. Образцы кала были качественно проанализированы.

Один грамм образца стула переносили во флакон со стеклянными шариками (SIGMA Chemicals Co., США), содержащий 1 мл стерильного физиологического раствора, и встряхивали. Готовили десятикратные серийные разведения (10 2 -10 9 ) и 10 мкл каждого разведения культивировали на 5% овечьей крови и агаре МакКонки (Difco Chemicals) для аэробных бактерий.Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов и исследовали через 24 часа и 48 часов. Бактерии были идентифицированы с помощью обычных биохимических тестов, а также с помощью системы API, то есть теста API 20 E, API staph / strep (bioMerieux Vitek Inc.) для различных грамположительных и отрицательных организмов. Для анаэробного культивирования образцы стула высевали на агар для инфузии сердца Brain (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) с добавлением гемина (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) и Vit K (Hi-Media Laboratories, Pvt.Ltd. India) и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение от 48 часов до 72 часов. Анаэробные бактерии были идентифицированы обычными биохимическими методами и системой RapID ANA (Innovative Diagnostic System Inc Norcross, GA).

Общее количество бактерий на грамм стула сообщалось в каждом образце количественного исследования.

Статистика

Подсчет колоний организмов выражали как log 10 подсчет. Для статистических сравнений использовали средний логарифм КОЕ. Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04. Статистический метод для непрерывных переменных использовался с применением t-критерия или критерия Манна-Уитни (где применимо), а для категориальных переменных использовались хи-квадрат или точный критерий Фишера (для сравнения количества колонизированных младенцев). Значимость наблюдалась, если P <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Всего в это исследование был включен 91 ребенок для определения структуры кишечной флоры новорожденных.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Общее количество колоний аэробных бактерий колебалось от 10 4 до 10 13 КОЕ / г.Показатели колонизации наиболее часто выделяемых бактерий приведены в. Характер колонизации изменялся через разные промежутки времени в конце сбора образцов (d21). Количество фекальных бактерий, как грамотрицательных, так и грамположительных, постепенно увеличивалось в течение 2–3 недель. Некоторые образцы нельзя было собрать в определенный промежуток времени, потому что у младенцев не было стула.

Таблица 1

Общее количество бактериальных изолятов у недоношенных детей (Группа A)

Колонизация грамотрицательных организмов увеличивалась с 1 по 21 день во время пребывания в отделении интенсивной терапии.Наблюдалось последовательное увеличение общего числа видов бактерий и значительные изменения в структуре колонизации отдельными видами бактерий с течением времени. К концу первого месяца жизни значительный процент детского стула был заселен Klebsiella pneumoniae ; 17,8% на 3 день, 50% на 7 день, 61% на 14 день, 60% на 21 день ( P <0,05) и E. coli ; 35% на 3-й день, 40% на 7-й день, 38% на 14-й день и 60% на 21-й день. Среднее log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3-го по 14-й день ( P > 0). .05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05) []. Salmonella senftenberg, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum, Klebsiella oxytoca были обнаружены только у младенцев с клиническим анамнезом НЭК.

Таблица 2

Среднее значение log КОЕ у младенцев <1500 г

КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Колонизированными грамотрицательными и положительными аэробными организмами были Klebsiella pneumoniae 41,3%, Escherichia coli 24.1%, Proteus sp 10,3%, Enterococcus faecium 34,4%, Staphylococcus epidermidis 6,8% и Micrococcus sp 3,4% [] и колонизация анаэробных организмов составила Bifidobacterium sp (13,4%) и Clostridium biferment (3,4%). Наблюдалась статистически значимая разница в росте грамположительных организмов в обеих группах ( P <0,05), которая оказалась низкой у недоношенных детей. Рост защитных организмов (полезных бактерий) был статистически незначимым ( P > 0.05) в обеих группах.

Таблица 3

Общее количество видов бактерий у недоношенных и доношенных детей

ОБСУЖДЕНИЕ

Характер бактериальной колонизации в кишечнике новорожденных зависит от различных факторов; гестационный возраст, способ родоразрешения, тип кормления, бактериальные взаимодействия, антимикробная терапия и другие факторы окружающей среды. Сообщалось, что колонизация микрофлоры у детей, вскармливаемых грудью, отличается от кормления молочными смесями. [4,5] Некоторые авторы обнаружили, что фекальная микрофлора у детей, вскармливаемых грудью и детей, вскармливаемых смесью, по существу одинакова; другие показали, что Bifidobacteria являются преобладающей флорой в фекалиях младенцев, вскармливаемых грудью.[6,7] Эти исследования были сосредоточены на доношенных детях и показали, что желудочно-кишечный тракт здоровых доношенных новорожденных колонизирован различными типами аэробных и анаэробных микробных организмов. [8,9]

Iseki K изучал развитие фекальной флоры, как аэробные, так и анаэробные при введении различных кормовых смесей, и наблюдали, как в кишечнике новорожденных сначала колонизировались представители Enterobacteriaceae в первый день жизни, которое постепенно уменьшается на 6 -й день , за которым следует Bifidobacteria , которое увеличивалось через 2-3 дня после приема пищи. жизнь грудного вскармливания младенцев.Однако количество других бактерий (энтеробактерий) было больше у детей, вскармливаемых из бутылочки, чем у детей, вскармливаемых грудью. Эти результаты свидетельствуют о том, что грудное вскармливание защищает незрелый кишечник от системных инфекций. [10] Ира HG и др. . сообщили, что популяция грамположительных бактерий была выше, чем грамотрицательных бактерий у детей с низкой массой тела при рождении, а характер бактериальной колонизации был аналогичен как у детей, вскармливаемых грудным молоком, так и у детей, вскармливаемых молочной смесью, в условиях США. Они выделили Lactobacillus sp.и Bifidobacterium sp. только у одного младенца, находящегося на грудном вскармливании. [11] В другом исследовании было замечено, что представители Enterobacteriaceae, Enterococcus sp. и Staphylococcus sp. были колонизированы в течение 7 -го -го дня жизни без антибактериальной терапии доношенных новорожденных. В исследовании, проведенном Стивенсом Д.К. и сотрудниками, 20 младенцев, которых кормили молочными смесями из хранимых смесей и патентованными смесями на второй неделе жизни среди госпитализированных недоношенных детей, продемонстрировали картину кишечной флоры, отличную от нормальных доношенных детей, что может привести к внутрибольничному сепсису и увеличению заболеваемости системных и локализованных инфекций.Доказано, что использование замороженного грудного молока для подавления колиформных и других потенциально патогенных организмов неэффективно у этих госпитализированных недоношенных новорожденных, особенно тех, которые лечились антибиотиками широкого спектра действия. [12,13] Настоящее исследование было запланировано для определения различных аэробная и анаэробная фекальная бактериальная флора недоношенных детей (<1500 г) в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии. В нашем исследовании большинство младенцев были колонизированы 2-3 видами бактерий в обеих группах, преобладающими видами были Klebsiella pneumoniae и E.coli . Уровень колонизации грамотрицательных бактерий был высоким как у недоношенных, так и у доношенных детей, тогда как количество грамположительных бактерий было меньше у недоношенных. Бактериальная колонизация недоношенного кишечника, вероятно, играет роль в патогенезе и предрасположенности к желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК). Вестра-Мейер и др. . исследовали аэробную и анаэробную фекальную флору при некротическом энтероколите новорожденных, чтобы установить связь между колонизацией конкретной бактериальной флорой и развитием NEC, и сообщили, что уровень выделения грамположительных кокков (GPC) был выше, чем грамотрицательных бацилл (GNB).Обычно выделяемыми аэробными бактериями были Staphylococcus epidermidis (61%), Enterococcus sp. (56%), Klebsiella sp. (37%) и E.coli (29%), а анаэробными организмами были Clostridium sp (61%) и Bacteroides sp (20%). В их исследовании аэробные и анаэробные виды бактерий колонизировали в среднем 2,1 и 0,8 на грамм стула соответственно. Они предположили, что не было значительной разницы в характере колонизации бактерий между исследуемой и контрольной группами.Важным отличием было то, что колонизация Klebsiella sp была выше у тех детей, у которых в анамнезе был диагностирован НЭК [14], тогда как в текущем исследовании Salmonella senftenberg, E.coli, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum и Klebsiella oxytoca выращивали у детей с диагнозом NEC. Было высказано предположение, что патогенная кишечная флора может играть роль в предрасположенности новорожденных к внутрибольничному сепсису и НЭК [15,16] Hoy et al .сообщили, что снижение количества некоторых видов бактерий в фекальной флоре из-за изменения pH после бактериальной ферментации в тонком кишечнике изменяет внутрипросветные условия и предшествует клиническому началу НЭК [17].

Холл и др. . обнаружили дефицит Lactobacilli по сравнению с бактериями формы кишечной палочки у недоношенных детей, которые находились на лечении в отделении интенсивной терапии, и высокое количество Lactobacillus у доношенных детей к 30-дневному возрасту. Это исследование указывает на недостаток полезной флоры у недоношенных детей.[18] Аэробные и анаэробные виды бактерий у недоношенных новорожденных с НЭК или без них были колонизированы в среднем на 2,1 и 0,1 на грамм стула соответственно. В настоящем исследовании Lactobacillus sp. был выделен только в одном образце стула на 7-14 день, тогда как у доношенных новорожденных Bifidobacterium sp были выделены у 4/29 (13,7%), в отличие от Rubatelli et al . из Италии, который сообщил о высокой распространенности Bifidobacterium sp. (47,6%) у детей, вскармливаемых грудью, и Klessen et al .у 89% детей, вскармливаемых грудью, на 7 -й день жизни, которая увеличилась до 95% к 30 -й день, Lactobacilli были выделены в 12/19 (63%) проб стула на 7 -й день. дня и увеличилась до 80-85% в течение двух месяцев. [19,20] Однако удивительно, что в настоящем исследовании Lactobacilli не были выделены ни в одном образце стула грудных младенцев за период 1 -2 месяца. Также выделение Bifidobacterium sp.число доношенных детей было низким по сравнению с вышеупомянутым исследованием. В связи с нашим открытием, необходимо рассмотреть важный вопрос: лучше ли колонизируются дети, вскармливаемые грудью, анаэробами в нашей стране? Большинство недоношенных детей в отделении интенсивной терапии получали антибиотики широкого спектра действия и частично или полностью кормились сцеженным грудным молоком, что может быть фактором, ограничивающим бактериальную колонизацию в кишечнике. Необходимо изучить меры, которые «нормализуют» микробную экологию кишечника. У здоровых доношенных детей грудное молоко способствует колонизации Bifidobacterium и Lactobacillus sp.[21] Показания к грудному вскармливанию просто на основании того, что они помогают нормальному развитию кишечной флоры, для борьбы с кишечной инфекцией, должны быть пересмотрены. Циркулирующее микробное давление в окружающей среде в развивающихся странах, таких как Индия, может препятствовать колонизации анаэробными неспорообразующими грамположительными бациллами, такими как Bifidobacterium , а также Lactobacillus . В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили умеренную степень колонизации Lactobacilli у более крупных недоношенных детей (> 1500 г), которых кормили пробиотиком Lactobacillus rahmnosus . ГГ .В последние годы несколько исследований, включая наше исследование, показали, что многие препараты Lactobacillus могут колонизировать кишечник недоношенных новорожденных и изменять кишечную флору, но приводит ли такая колонизация к клинически значимому улучшению, еще предстоит изучить [22, 23]

Представленные здесь данные основаны на микробиологической изоляции в обычных аэробных и анаэробных средах. Недавние отчеты предполагают, что молекулярные инструменты, основанные на сходстве последовательностей 16 S рДНК, такие как флуоресцентная гибридизация in-situ (FISH) и денатурирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE), помогли преодолеть ограничения традиционных методов микробиологической культуры при изучении состава фекальной микрофлоры.Эти инструменты успешно применялись для изучения развития детской микрофлоры, изменений микрофлоры человека в процессе старения, воздействия пребиотиков и пробиотиков на состав микрофлоры человека, а также влияния диетических вмешательств на микрофлору кишечника [24]. ]

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мы пришли к выводу, что специфическая микробная экология модели колонизации и отсутствие защитных грамположительных анаэробных бактерий, особенно Bifidobacterium sp. и Lactobacillus sp в незрелом кишечнике могут иметь решающее значение в патогенезе НЭК.Предполагается, что использование пробиотиков (препарат, содержащий Lactobacillus ) может иметь защитную роль у этих младенцев, чтобы предотвратить НЭК и другие желудочно-кишечные осложнения.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

Эта работа была поддержана грантом Fogarty 1 RO3 TW 00601 от NIH, США. Мы хотели бы поблагодарить участвующую команду отделения педиатрии NICU, AIIMS за предоставленные кейсы.

Сноски

Источник поддержки: Fogarty Grant 1RO3 TW 00601 от NIH, США

Конфликт интересов: Не заявлено

ССЫЛКИ

1.Ши Х.Н., Уокер А. Бактериальная колонизация и развитие защиты кишечника. Можно J Гастроэнтерол. 2004. 18: 493–500. [PubMed] [Google Scholar] 2. Старк П.Л., Ли А. Микробная экология толстой кишки у младенцев, вскармливаемых грудью и молочными смесями, в течение первого года жизни. J Med Microbiol. 1982; 15: 189–203. [PubMed] [Google Scholar] 3. Лонг СС, Свенсон Р.М. Развитие анаэробной фекальной флоры у здоровых новорожденных. J.Pediatr. 1977; 91: 289–301. [Google Scholar] 4. Хурре А., Каллиомяки М., Раутава С., Ринне М., Салминен С., Изолаури Э.Воздействие на микробиоту кишечника и гуморальный иммунитет. Неонатология. 2008; 93: 236–40. [PubMed] [Google Scholar] 5. Пендерс Дж., Тиджис С., Винк С., Стельма Ф.Ф., Снидерс Б., Куммелинг И. и др. Факторы, влияющие на состав кишечной микробиоты в раннем возрасте. Педиатрия. 2006; 118: 511–21. [PubMed] [Google Scholar] 6. Томпсон-Чагоян О.К., Мальдонадо Дж., Гил А. Колонизация и влияние болезней и других факторов на микробиоту кишечника. Dig Dis Sci. 2007; 52: 2069–77. [PubMed] [Google Scholar] 8.Lundequist B, Nord CE, Winberg J. Состав фекальной микрофлоры у детей, находящихся на грудном вскармливании и в бутылках, от рождения до восьми недель. Acta Paediatr Scand. 1985; 74: 45–51. [PubMed] [Google Scholar] 10. Исэки К. Развитие кишечной флоры у новорожденных. Хоккайдо Игаку Дзасси. 1987; 62: 895–906. [PubMed] [Google Scholar] 11. Ира Х.Г., Ричард С.С., Вики Л.Т., Трейси С.Х., Пинаки П. Микробная флора стула у младенцев с крайне низкой массой тела при рождении. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999; 80: F167–173. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12.Borderon JC, Lionnet C, Rondeau C, Suc AL, Laugier J, Gold F. Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибактериальной терапии в течение первых 7 дней жизни: энтеробактерии, энтерококки, стафилококки. Патол Биол (Париж) 1996; 44: 416–22. [PubMed] [Google Scholar] 13. Стивенон Д.К., Янк Ц., Кернер Дж. А., младший, Год AS. Кишечная флора на второй неделе жизни у госпитализированных недоношенных детей, которых кормили хранимым замороженным грудным молоком или запатентованной смесью. Clin Pediatr (Phila) 1985; 24: 338–41. [PubMed] [Google Scholar] 16.Westra-Meijer CM, Degener JE, Dzoljic-Danilovic G, Michel MF, Mettau JW. Количественное исследование аэробной и анаэробной фекальной флоры при некротическом энтероколите новорожденных. Arch Dis Child. 1983; 58: 523–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Хой С., Миллар М.Р., Маккей П., Годвин П.Г., Лэнгдейл В., Левен М.И. Количественные изменения фекальной микрофлоры, предшествующие некротическому энтероколиту у недоношенных новорожденных. Arch Dis Child. 1990; 65: 1057–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Холл, Массачусетс, Коул С.Б., Смит С.Л., Фуллер Р., Роллс С.Дж.Фактор, влияющий на наличие фекальных лактобацилл в раннем детстве. Arch Dis Child. 1990; 65: 185–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Rubaltelli FF, Biadaiali R, Pecile P, Nicaletti P. Кишечная флора у грудных детей и грудных детей. J Perinat Med. 1998. 26: 186–91. [PubMed] [Google Scholar] 20. Kleessen B, Bunke H, Tovar K, Noaek J, Sawatzki G. Влияние смесей для двух младенцев и грудного молока на развитие фекальной флоры у новорожденных. Acta Paediatr. 1995; 84: 1347–56.[PubMed] [Google Scholar] 21. Эль Мохандес А.Е., Пикард МБ, Симменс С.Дж., Кейзер Дж.Ф. Использование грудного молока в отделениях интенсивной терапии снижает частоту внутрибольничного сепсиса. J Perinatol. 1997; 17: 130–4. [PubMed] [Google Scholar] 22. Агарвал Р., Шарма Н., Чаудри Р., Деорари А., Пол В. К., Геволб Т. и др. Влияние орального Lactobacillus gg на кишечную микрофлору новорожденных с низкой массой тела. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 2003; 36: 397–402. [PubMed] [Google Scholar] 23. Лангендрис Дж. П., Детри Дж., Ван Хис Дж., Ламборай Дж. М., Даримонт Дж., Мозин М. Дж. И др.Влияние ферментированной детской смеси, содержащей бифидобактерии viale, на состав фекальной флоры и pH здоровых доношенных детей. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 1995; 21: 177–81. [PubMed] [Google Scholar] 24. Танака С., Кобаяси Т., Сонгджинда П., Татэяма А., Цубучи М., Киёхара С. и др. Влияние воздействия антибиотиков в раннем постнатальном периоде на развитие кишечной микробиоты. FEMS Immunol Med Microbiol. 2009; 56: 80–7. [PubMed] [Google Scholar]

Количественное и качественное исследование кишечной флоры новорожденных

J Glob Infect Dis.2012 октябрь-декабрь; 4 (4): 188–192.

Нидхи Шарма

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Рама Чаудхри

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Пинаки Паниграхи

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Департамент микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Авторские права: © Journal of Global Infectious Diseases

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями Creative Commons Attribution-Nonco. mmercial-Share Alike 3.0 Unported, что разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

В неонатальном периоде развивающаяся функция кишечного барьера обеспечивает неоптимальную защиту слизистой оболочки от инфекции. Установление нормальной комменсальной микрофлоры играет жизненно важную роль в этом процессе.

Цели:

Определить аэробные и анаэробные бактерии количественными и качественными методами в образцах фекалий новорожденных.

Условия и дизайн:

Проспективное исследование было проведено в двух группах в больнице третичного уровня: в группе А были недоношенные дети и в группе В — доношенные дети.

Материалы и методы:

В исследование были включены 62 недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и гестационным возрастом <34 недель и 29 доношенных новорожденных в возрасте 4 недель. Количественное определение бактериальной нагрузки проводили с помощью десятикратных серийных разведений на соответствующих средах.

Статистический анализ:

Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04.

Результаты и выводы:

Преобладающей аэробной бактерией была Klebsiella pneumoniae . У недоношенных младенцев аэробные бактерии были колонизированы в среднем 2,1 и анаэробными бактериями 0,1. Количественный анализ показал, что количество бактериальных колоний в фекалиях находится в диапазоне 10 4 -10 13 КОЕ / г. Грамотрицательные и грамположительные бактерии постепенно увеличивались с интервалом от 2 до 3 недель. Среднее значение log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3 по 14 день ( P > 0.05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05). Потенциальные патогенные аэробные бактерии преобладают в кишечной флоре недоношенных детей, находящихся на вскармливании в неонатальном отделении. Необходимо изучить меры по устранению этого дисбаланса в микроэкологии кишечника недоношенных детей.

Ключевые слова: Бактериальная флора, фекалии, кишечник, новорожденные, количественное определение

ВВЕДЕНИЕ

В неонатальный период формирование нормальной комменсальной микрофлоры играет важную роль в развитии защиты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.Сообщалось, что бактериальная флора недоношенных детей в отделении интенсивной терапии новорожденных (ОИТН) отличается от здоровых доношенных детей. [1,2] У здоровых желудочно-кишечный тракт доношенных новорожденных был колонизирован разнообразной микрофлорой. в течение 10 дней жизни, тогда как у недоношенных детей микрофлора не получает возможности для колонизации. У младенцев с низкой массой тела при рождении это важный фактор риска неонатальной смертности и заболеваемости, включая сепсис и желудочно-кишечные расстройства.[3,4] Большинство этих младенцев обычно получают лечение антибиотиками широкого спектра действия в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии вскоре после рождения. Таким образом, бактериальная флора этих младенцев характеризуется отложенной колонизацией желудочно-кишечного тракта ограниченным количеством бактерий. [5] Однако имеется ограниченная литература, касающаяся микробной флоры у недоношенных детей, особенно у детей с низкой массой тела при рождении (<1500 г), которые предрасположены к различным инфекционным и желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК).Таким образом, это исследование было проведено с целью определения фекальной микрофлоры у недоношенных детей, поступивших в отделение интенсивной терапии стационара третичного уровня, чтобы оценить риск развития желудочно-кишечных осложнений у этих детей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проспективное исследование (Фаза-I) было проведено в двух группах во Всеиндийском институте медицинских наук, Нью-Дели, Индия, после того, как оно было одобрено с этической точки зрения. В группу А вошли шестьдесят два недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и сроком беременности <34 недель.Из 62 случаев было проведено количественное определение 34 образцов стула и качественный анализ фекальной бактериальной флоры в 28. Образцы были собраны на 3, 7, 14, 21 день (все ± 2 дня) у 34 детей. В группе Б обследовано 29 доношенных новорожденных. Образцы кала были качественно проанализированы.

Один грамм образца стула переносили во флакон со стеклянными шариками (SIGMA Chemicals Co., США), содержащий 1 мл стерильного физиологического раствора, и встряхивали. Готовили десятикратные серийные разведения (10 2 -10 9 ) и 10 мкл каждого разведения культивировали на 5% овечьей крови и агаре МакКонки (Difco Chemicals) для аэробных бактерий.Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов и исследовали через 24 часа и 48 часов. Бактерии были идентифицированы с помощью обычных биохимических тестов, а также с помощью системы API, то есть теста API 20 E, API staph / strep (bioMerieux Vitek Inc.) для различных грамположительных и отрицательных организмов. Для анаэробного культивирования образцы стула высевали на агар для инфузии сердца Brain (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) с добавлением гемина (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) и Vit K (Hi-Media Laboratories, Pvt.Ltd. India) и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение от 48 часов до 72 часов. Анаэробные бактерии были идентифицированы обычными биохимическими методами и системой RapID ANA (Innovative Diagnostic System Inc Norcross, GA).

Общее количество бактерий на грамм стула сообщалось в каждом образце количественного исследования.

Статистика

Подсчет колоний организмов выражали как log 10 подсчет. Для статистических сравнений использовали средний логарифм КОЕ. Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04. Статистический метод для непрерывных переменных использовался с применением t-критерия или критерия Манна-Уитни (где применимо), а для категориальных переменных использовались хи-квадрат или точный критерий Фишера (для сравнения количества колонизированных младенцев). Значимость наблюдалась, если P <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Всего в это исследование был включен 91 ребенок для определения структуры кишечной флоры новорожденных.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Общее количество колоний аэробных бактерий колебалось от 10 4 до 10 13 КОЕ / г.Показатели колонизации наиболее часто выделяемых бактерий приведены в. Характер колонизации изменялся через разные промежутки времени в конце сбора образцов (d21). Количество фекальных бактерий, как грамотрицательных, так и грамположительных, постепенно увеличивалось в течение 2–3 недель. Некоторые образцы нельзя было собрать в определенный промежуток времени, потому что у младенцев не было стула.

Таблица 1

Общее количество бактериальных изолятов у недоношенных детей (Группа A)

Колонизация грамотрицательных организмов увеличивалась с 1 по 21 день во время пребывания в отделении интенсивной терапии.Наблюдалось последовательное увеличение общего числа видов бактерий и значительные изменения в структуре колонизации отдельными видами бактерий с течением времени. К концу первого месяца жизни значительный процент детского стула был заселен Klebsiella pneumoniae ; 17,8% на 3 день, 50% на 7 день, 61% на 14 день, 60% на 21 день ( P <0,05) и E. coli ; 35% на 3-й день, 40% на 7-й день, 38% на 14-й день и 60% на 21-й день. Среднее log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3-го по 14-й день ( P > 0). .05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05) []. Salmonella senftenberg, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum, Klebsiella oxytoca были обнаружены только у младенцев с клиническим анамнезом НЭК.

Таблица 2

Среднее значение log КОЕ у младенцев <1500 г

КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Колонизированными грамотрицательными и положительными аэробными организмами были Klebsiella pneumoniae 41,3%, Escherichia coli 24.1%, Proteus sp 10,3%, Enterococcus faecium 34,4%, Staphylococcus epidermidis 6,8% и Micrococcus sp 3,4% [] и колонизация анаэробных организмов составила Bifidobacterium sp (13,4%) и Clostridium biferment (3,4%). Наблюдалась статистически значимая разница в росте грамположительных организмов в обеих группах ( P <0,05), которая оказалась низкой у недоношенных детей. Рост защитных организмов (полезных бактерий) был статистически незначимым ( P > 0.05) в обеих группах.

Таблица 3

Общее количество видов бактерий у недоношенных и доношенных детей

ОБСУЖДЕНИЕ

Характер бактериальной колонизации в кишечнике новорожденных зависит от различных факторов; гестационный возраст, способ родоразрешения, тип кормления, бактериальные взаимодействия, антимикробная терапия и другие факторы окружающей среды. Сообщалось, что колонизация микрофлоры у детей, вскармливаемых грудью, отличается от кормления молочными смесями. [4,5] Некоторые авторы обнаружили, что фекальная микрофлора у детей, вскармливаемых грудью и детей, вскармливаемых смесью, по существу одинакова; другие показали, что Bifidobacteria являются преобладающей флорой в фекалиях младенцев, вскармливаемых грудью.[6,7] Эти исследования были сосредоточены на доношенных детях и показали, что желудочно-кишечный тракт здоровых доношенных новорожденных колонизирован различными типами аэробных и анаэробных микробных организмов. [8,9]

Iseki K изучал развитие фекальной флоры, как аэробные, так и анаэробные при введении различных кормовых смесей, и наблюдали, как в кишечнике новорожденных сначала колонизировались представители Enterobacteriaceae в первый день жизни, которое постепенно уменьшается на 6 -й день , за которым следует Bifidobacteria , которое увеличивалось через 2-3 дня после приема пищи. жизнь грудного вскармливания младенцев.Однако количество других бактерий (энтеробактерий) было больше у детей, вскармливаемых из бутылочки, чем у детей, вскармливаемых грудью. Эти результаты свидетельствуют о том, что грудное вскармливание защищает незрелый кишечник от системных инфекций. [10] Ира HG и др. . сообщили, что популяция грамположительных бактерий была выше, чем грамотрицательных бактерий у детей с низкой массой тела при рождении, а характер бактериальной колонизации был аналогичен как у детей, вскармливаемых грудным молоком, так и у детей, вскармливаемых молочной смесью, в условиях США. Они выделили Lactobacillus sp.и Bifidobacterium sp. только у одного младенца, находящегося на грудном вскармливании. [11] В другом исследовании было замечено, что представители Enterobacteriaceae, Enterococcus sp. и Staphylococcus sp. были колонизированы в течение 7 -го -го дня жизни без антибактериальной терапии доношенных новорожденных. В исследовании, проведенном Стивенсом Д.К. и сотрудниками, 20 младенцев, которых кормили молочными смесями из хранимых смесей и патентованными смесями на второй неделе жизни среди госпитализированных недоношенных детей, продемонстрировали картину кишечной флоры, отличную от нормальных доношенных детей, что может привести к внутрибольничному сепсису и увеличению заболеваемости системных и локализованных инфекций.Доказано, что использование замороженного грудного молока для подавления колиформных и других потенциально патогенных организмов неэффективно у этих госпитализированных недоношенных новорожденных, особенно тех, которые лечились антибиотиками широкого спектра действия. [12,13] Настоящее исследование было запланировано для определения различных аэробная и анаэробная фекальная бактериальная флора недоношенных детей (<1500 г) в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии. В нашем исследовании большинство младенцев были колонизированы 2-3 видами бактерий в обеих группах, преобладающими видами были Klebsiella pneumoniae и E.coli . Уровень колонизации грамотрицательных бактерий был высоким как у недоношенных, так и у доношенных детей, тогда как количество грамположительных бактерий было меньше у недоношенных. Бактериальная колонизация недоношенного кишечника, вероятно, играет роль в патогенезе и предрасположенности к желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК). Вестра-Мейер и др. . исследовали аэробную и анаэробную фекальную флору при некротическом энтероколите новорожденных, чтобы установить связь между колонизацией конкретной бактериальной флорой и развитием NEC, и сообщили, что уровень выделения грамположительных кокков (GPC) был выше, чем грамотрицательных бацилл (GNB).Обычно выделяемыми аэробными бактериями были Staphylococcus epidermidis (61%), Enterococcus sp. (56%), Klebsiella sp. (37%) и E.coli (29%), а анаэробными организмами были Clostridium sp (61%) и Bacteroides sp (20%). В их исследовании аэробные и анаэробные виды бактерий колонизировали в среднем 2,1 и 0,8 на грамм стула соответственно. Они предположили, что не было значительной разницы в характере колонизации бактерий между исследуемой и контрольной группами.Важным отличием было то, что колонизация Klebsiella sp была выше у тех детей, у которых в анамнезе был диагностирован НЭК [14], тогда как в текущем исследовании Salmonella senftenberg, E.coli, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum и Klebsiella oxytoca выращивали у детей с диагнозом NEC. Было высказано предположение, что патогенная кишечная флора может играть роль в предрасположенности новорожденных к внутрибольничному сепсису и НЭК [15,16] Hoy et al .сообщили, что снижение количества некоторых видов бактерий в фекальной флоре из-за изменения pH после бактериальной ферментации в тонком кишечнике изменяет внутрипросветные условия и предшествует клиническому началу НЭК [17].

Холл и др. . обнаружили дефицит Lactobacilli по сравнению с бактериями формы кишечной палочки у недоношенных детей, которые находились на лечении в отделении интенсивной терапии, и высокое количество Lactobacillus у доношенных детей к 30-дневному возрасту. Это исследование указывает на недостаток полезной флоры у недоношенных детей.[18] Аэробные и анаэробные виды бактерий у недоношенных новорожденных с НЭК или без них были колонизированы в среднем на 2,1 и 0,1 на грамм стула соответственно. В настоящем исследовании Lactobacillus sp. был выделен только в одном образце стула на 7-14 день, тогда как у доношенных новорожденных Bifidobacterium sp были выделены у 4/29 (13,7%), в отличие от Rubatelli et al . из Италии, который сообщил о высокой распространенности Bifidobacterium sp. (47,6%) у детей, вскармливаемых грудью, и Klessen et al .у 89% детей, вскармливаемых грудью, на 7 -й день жизни, которая увеличилась до 95% к 30 -й день, Lactobacilli были выделены в 12/19 (63%) проб стула на 7 -й день. дня и увеличилась до 80-85% в течение двух месяцев. [19,20] Однако удивительно, что в настоящем исследовании Lactobacilli не были выделены ни в одном образце стула грудных младенцев за период 1 -2 месяца. Также выделение Bifidobacterium sp.число доношенных детей было низким по сравнению с вышеупомянутым исследованием. В связи с нашим открытием, необходимо рассмотреть важный вопрос: лучше ли колонизируются дети, вскармливаемые грудью, анаэробами в нашей стране? Большинство недоношенных детей в отделении интенсивной терапии получали антибиотики широкого спектра действия и частично или полностью кормились сцеженным грудным молоком, что может быть фактором, ограничивающим бактериальную колонизацию в кишечнике. Необходимо изучить меры, которые «нормализуют» микробную экологию кишечника. У здоровых доношенных детей грудное молоко способствует колонизации Bifidobacterium и Lactobacillus sp.[21] Показания к грудному вскармливанию просто на основании того, что они помогают нормальному развитию кишечной флоры, для борьбы с кишечной инфекцией, должны быть пересмотрены. Циркулирующее микробное давление в окружающей среде в развивающихся странах, таких как Индия, может препятствовать колонизации анаэробными неспорообразующими грамположительными бациллами, такими как Bifidobacterium , а также Lactobacillus . В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили умеренную степень колонизации Lactobacilli у более крупных недоношенных детей (> 1500 г), которых кормили пробиотиком Lactobacillus rahmnosus . ГГ .В последние годы несколько исследований, включая наше исследование, показали, что многие препараты Lactobacillus могут колонизировать кишечник недоношенных новорожденных и изменять кишечную флору, но приводит ли такая колонизация к клинически значимому улучшению, еще предстоит изучить [22, 23]

Представленные здесь данные основаны на микробиологической изоляции в обычных аэробных и анаэробных средах. Недавние отчеты предполагают, что молекулярные инструменты, основанные на сходстве последовательностей 16 S рДНК, такие как флуоресцентная гибридизация in-situ (FISH) и денатурирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE), помогли преодолеть ограничения традиционных методов микробиологической культуры при изучении состава фекальной микрофлоры.Эти инструменты успешно применялись для изучения развития детской микрофлоры, изменений микрофлоры человека в процессе старения, воздействия пребиотиков и пробиотиков на состав микрофлоры человека, а также влияния диетических вмешательств на микрофлору кишечника [24]. ]

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мы пришли к выводу, что специфическая микробная экология модели колонизации и отсутствие защитных грамположительных анаэробных бактерий, особенно Bifidobacterium sp. и Lactobacillus sp в незрелом кишечнике могут иметь решающее значение в патогенезе НЭК.Предполагается, что использование пробиотиков (препарат, содержащий Lactobacillus ) может иметь защитную роль у этих младенцев, чтобы предотвратить НЭК и другие желудочно-кишечные осложнения.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

Эта работа была поддержана грантом Fogarty 1 RO3 TW 00601 от NIH, США. Мы хотели бы поблагодарить участвующую команду отделения педиатрии NICU, AIIMS за предоставленные кейсы.

Сноски

Источник поддержки: Fogarty Grant 1RO3 TW 00601 от NIH, США

Конфликт интересов: Не заявлено

ССЫЛКИ

1.Ши Х.Н., Уокер А. Бактериальная колонизация и развитие защиты кишечника. Можно J Гастроэнтерол. 2004. 18: 493–500. [PubMed] [Google Scholar] 2. Старк П.Л., Ли А. Микробная экология толстой кишки у младенцев, вскармливаемых грудью и молочными смесями, в течение первого года жизни. J Med Microbiol. 1982; 15: 189–203. [PubMed] [Google Scholar] 3. Лонг СС, Свенсон Р.М. Развитие анаэробной фекальной флоры у здоровых новорожденных. J.Pediatr. 1977; 91: 289–301. [Google Scholar] 4. Хурре А., Каллиомяки М., Раутава С., Ринне М., Салминен С., Изолаури Э.Воздействие на микробиоту кишечника и гуморальный иммунитет. Неонатология. 2008; 93: 236–40. [PubMed] [Google Scholar] 5. Пендерс Дж., Тиджис С., Винк С., Стельма Ф.Ф., Снидерс Б., Куммелинг И. и др. Факторы, влияющие на состав кишечной микробиоты в раннем возрасте. Педиатрия. 2006; 118: 511–21. [PubMed] [Google Scholar] 6. Томпсон-Чагоян О.К., Мальдонадо Дж., Гил А. Колонизация и влияние болезней и других факторов на микробиоту кишечника. Dig Dis Sci. 2007; 52: 2069–77. [PubMed] [Google Scholar] 8.Lundequist B, Nord CE, Winberg J. Состав фекальной микрофлоры у детей, находящихся на грудном вскармливании и в бутылках, от рождения до восьми недель. Acta Paediatr Scand. 1985; 74: 45–51. [PubMed] [Google Scholar] 10. Исэки К. Развитие кишечной флоры у новорожденных. Хоккайдо Игаку Дзасси. 1987; 62: 895–906. [PubMed] [Google Scholar] 11. Ира Х.Г., Ричард С.С., Вики Л.Т., Трейси С.Х., Пинаки П. Микробная флора стула у младенцев с крайне низкой массой тела при рождении. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999; 80: F167–173. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12.Borderon JC, Lionnet C, Rondeau C, Suc AL, Laugier J, Gold F. Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибактериальной терапии в течение первых 7 дней жизни: энтеробактерии, энтерококки, стафилококки. Патол Биол (Париж) 1996; 44: 416–22. [PubMed] [Google Scholar] 13. Стивенон Д.К., Янк Ц., Кернер Дж. А., младший, Год AS. Кишечная флора на второй неделе жизни у госпитализированных недоношенных детей, которых кормили хранимым замороженным грудным молоком или запатентованной смесью. Clin Pediatr (Phila) 1985; 24: 338–41. [PubMed] [Google Scholar] 16.Westra-Meijer CM, Degener JE, Dzoljic-Danilovic G, Michel MF, Mettau JW. Количественное исследование аэробной и анаэробной фекальной флоры при некротическом энтероколите новорожденных. Arch Dis Child. 1983; 58: 523–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Хой С., Миллар М.Р., Маккей П., Годвин П.Г., Лэнгдейл В., Левен М.И. Количественные изменения фекальной микрофлоры, предшествующие некротическому энтероколиту у недоношенных новорожденных. Arch Dis Child. 1990; 65: 1057–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Холл, Массачусетс, Коул С.Б., Смит С.Л., Фуллер Р., Роллс С.Дж.Фактор, влияющий на наличие фекальных лактобацилл в раннем детстве. Arch Dis Child. 1990; 65: 185–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Rubaltelli FF, Biadaiali R, Pecile P, Nicaletti P. Кишечная флора у грудных детей и грудных детей. J Perinat Med. 1998. 26: 186–91. [PubMed] [Google Scholar] 20. Kleessen B, Bunke H, Tovar K, Noaek J, Sawatzki G. Влияние смесей для двух младенцев и грудного молока на развитие фекальной флоры у новорожденных. Acta Paediatr. 1995; 84: 1347–56.[PubMed] [Google Scholar] 21. Эль Мохандес А.Е., Пикард МБ, Симменс С.Дж., Кейзер Дж.Ф. Использование грудного молока в отделениях интенсивной терапии снижает частоту внутрибольничного сепсиса. J Perinatol. 1997; 17: 130–4. [PubMed] [Google Scholar] 22. Агарвал Р., Шарма Н., Чаудри Р., Деорари А., Пол В. К., Геволб Т. и др. Влияние орального Lactobacillus gg на кишечную микрофлору новорожденных с низкой массой тела. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 2003; 36: 397–402. [PubMed] [Google Scholar] 23. Лангендрис Дж. П., Детри Дж., Ван Хис Дж., Ламборай Дж. М., Даримонт Дж., Мозин М. Дж. И др.Влияние ферментированной детской смеси, содержащей бифидобактерии viale, на состав фекальной флоры и pH здоровых доношенных детей. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 1995; 21: 177–81. [PubMed] [Google Scholar] 24. Танака С., Кобаяси Т., Сонгджинда П., Татэяма А., Цубучи М., Киёхара С. и др. Влияние воздействия антибиотиков в раннем постнатальном периоде на развитие кишечной микробиоты. FEMS Immunol Med Microbiol. 2009; 56: 80–7. [PubMed] [Google Scholar]

Количественное и качественное исследование кишечной флоры новорожденных

J Glob Infect Dis.2012 октябрь-декабрь; 4 (4): 188–192.

Нидхи Шарма

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Рама Чаудхри

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Пинаки Паниграхи

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Департамент микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Авторские права: © Journal of Global Infectious Diseases

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями Creative Commons Attribution-Nonco. mmercial-Share Alike 3.0 Unported, что разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

В неонатальном периоде развивающаяся функция кишечного барьера обеспечивает неоптимальную защиту слизистой оболочки от инфекции. Установление нормальной комменсальной микрофлоры играет жизненно важную роль в этом процессе.

Цели:

Определить аэробные и анаэробные бактерии количественными и качественными методами в образцах фекалий новорожденных.

Условия и дизайн:

Проспективное исследование было проведено в двух группах в больнице третичного уровня: в группе А были недоношенные дети и в группе В — доношенные дети.

Материалы и методы:

В исследование были включены 62 недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и гестационным возрастом <34 недель и 29 доношенных новорожденных в возрасте 4 недель. Количественное определение бактериальной нагрузки проводили с помощью десятикратных серийных разведений на соответствующих средах.

Статистический анализ:

Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04.

Результаты и выводы:

Преобладающей аэробной бактерией была Klebsiella pneumoniae . У недоношенных младенцев аэробные бактерии были колонизированы в среднем 2,1 и анаэробными бактериями 0,1. Количественный анализ показал, что количество бактериальных колоний в фекалиях находится в диапазоне 10 4 -10 13 КОЕ / г. Грамотрицательные и грамположительные бактерии постепенно увеличивались с интервалом от 2 до 3 недель. Среднее значение log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3 по 14 день ( P > 0.05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05). Потенциальные патогенные аэробные бактерии преобладают в кишечной флоре недоношенных детей, находящихся на вскармливании в неонатальном отделении. Необходимо изучить меры по устранению этого дисбаланса в микроэкологии кишечника недоношенных детей.

Ключевые слова: Бактериальная флора, фекалии, кишечник, новорожденные, количественное определение

ВВЕДЕНИЕ

В неонатальный период формирование нормальной комменсальной микрофлоры играет важную роль в развитии защиты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.Сообщалось, что бактериальная флора недоношенных детей в отделении интенсивной терапии новорожденных (ОИТН) отличается от здоровых доношенных детей. [1,2] У здоровых желудочно-кишечный тракт доношенных новорожденных был колонизирован разнообразной микрофлорой. в течение 10 дней жизни, тогда как у недоношенных детей микрофлора не получает возможности для колонизации. У младенцев с низкой массой тела при рождении это важный фактор риска неонатальной смертности и заболеваемости, включая сепсис и желудочно-кишечные расстройства.[3,4] Большинство этих младенцев обычно получают лечение антибиотиками широкого спектра действия в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии вскоре после рождения. Таким образом, бактериальная флора этих младенцев характеризуется отложенной колонизацией желудочно-кишечного тракта ограниченным количеством бактерий. [5] Однако имеется ограниченная литература, касающаяся микробной флоры у недоношенных детей, особенно у детей с низкой массой тела при рождении (<1500 г), которые предрасположены к различным инфекционным и желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК).Таким образом, это исследование было проведено с целью определения фекальной микрофлоры у недоношенных детей, поступивших в отделение интенсивной терапии стационара третичного уровня, чтобы оценить риск развития желудочно-кишечных осложнений у этих детей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проспективное исследование (Фаза-I) было проведено в двух группах во Всеиндийском институте медицинских наук, Нью-Дели, Индия, после того, как оно было одобрено с этической точки зрения. В группу А вошли шестьдесят два недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и сроком беременности <34 недель.Из 62 случаев было проведено количественное определение 34 образцов стула и качественный анализ фекальной бактериальной флоры в 28. Образцы были собраны на 3, 7, 14, 21 день (все ± 2 дня) у 34 детей. В группе Б обследовано 29 доношенных новорожденных. Образцы кала были качественно проанализированы.

Один грамм образца стула переносили во флакон со стеклянными шариками (SIGMA Chemicals Co., США), содержащий 1 мл стерильного физиологического раствора, и встряхивали. Готовили десятикратные серийные разведения (10 2 -10 9 ) и 10 мкл каждого разведения культивировали на 5% овечьей крови и агаре МакКонки (Difco Chemicals) для аэробных бактерий.Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов и исследовали через 24 часа и 48 часов. Бактерии были идентифицированы с помощью обычных биохимических тестов, а также с помощью системы API, то есть теста API 20 E, API staph / strep (bioMerieux Vitek Inc.) для различных грамположительных и отрицательных организмов. Для анаэробного культивирования образцы стула высевали на агар для инфузии сердца Brain (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) с добавлением гемина (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) и Vit K (Hi-Media Laboratories, Pvt.Ltd. India) и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение от 48 часов до 72 часов. Анаэробные бактерии были идентифицированы обычными биохимическими методами и системой RapID ANA (Innovative Diagnostic System Inc Norcross, GA).

Общее количество бактерий на грамм стула сообщалось в каждом образце количественного исследования.

Статистика

Подсчет колоний организмов выражали как log 10 подсчет. Для статистических сравнений использовали средний логарифм КОЕ. Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04. Статистический метод для непрерывных переменных использовался с применением t-критерия или критерия Манна-Уитни (где применимо), а для категориальных переменных использовались хи-квадрат или точный критерий Фишера (для сравнения количества колонизированных младенцев). Значимость наблюдалась, если P <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Всего в это исследование был включен 91 ребенок для определения структуры кишечной флоры новорожденных.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Общее количество колоний аэробных бактерий колебалось от 10 4 до 10 13 КОЕ / г.Показатели колонизации наиболее часто выделяемых бактерий приведены в. Характер колонизации изменялся через разные промежутки времени в конце сбора образцов (d21). Количество фекальных бактерий, как грамотрицательных, так и грамположительных, постепенно увеличивалось в течение 2–3 недель. Некоторые образцы нельзя было собрать в определенный промежуток времени, потому что у младенцев не было стула.

Таблица 1

Общее количество бактериальных изолятов у недоношенных детей (Группа A)

Колонизация грамотрицательных организмов увеличивалась с 1 по 21 день во время пребывания в отделении интенсивной терапии.Наблюдалось последовательное увеличение общего числа видов бактерий и значительные изменения в структуре колонизации отдельными видами бактерий с течением времени. К концу первого месяца жизни значительный процент детского стула был заселен Klebsiella pneumoniae ; 17,8% на 3 день, 50% на 7 день, 61% на 14 день, 60% на 21 день ( P <0,05) и E. coli ; 35% на 3-й день, 40% на 7-й день, 38% на 14-й день и 60% на 21-й день. Среднее log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3-го по 14-й день ( P > 0). .05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05) []. Salmonella senftenberg, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum, Klebsiella oxytoca были обнаружены только у младенцев с клиническим анамнезом НЭК.

Таблица 2

Среднее значение log КОЕ у младенцев <1500 г

КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Колонизированными грамотрицательными и положительными аэробными организмами были Klebsiella pneumoniae 41,3%, Escherichia coli 24.1%, Proteus sp 10,3%, Enterococcus faecium 34,4%, Staphylococcus epidermidis 6,8% и Micrococcus sp 3,4% [] и колонизация анаэробных организмов составила Bifidobacterium sp (13,4%) и Clostridium biferment (3,4%). Наблюдалась статистически значимая разница в росте грамположительных организмов в обеих группах ( P <0,05), которая оказалась низкой у недоношенных детей. Рост защитных организмов (полезных бактерий) был статистически незначимым ( P > 0.05) в обеих группах.

Таблица 3

Общее количество видов бактерий у недоношенных и доношенных детей

ОБСУЖДЕНИЕ

Характер бактериальной колонизации в кишечнике новорожденных зависит от различных факторов; гестационный возраст, способ родоразрешения, тип кормления, бактериальные взаимодействия, антимикробная терапия и другие факторы окружающей среды. Сообщалось, что колонизация микрофлоры у детей, вскармливаемых грудью, отличается от кормления молочными смесями. [4,5] Некоторые авторы обнаружили, что фекальная микрофлора у детей, вскармливаемых грудью и детей, вскармливаемых смесью, по существу одинакова; другие показали, что Bifidobacteria являются преобладающей флорой в фекалиях младенцев, вскармливаемых грудью.[6,7] Эти исследования были сосредоточены на доношенных детях и показали, что желудочно-кишечный тракт здоровых доношенных новорожденных колонизирован различными типами аэробных и анаэробных микробных организмов. [8,9]

Iseki K изучал развитие фекальной флоры, как аэробные, так и анаэробные при введении различных кормовых смесей, и наблюдали, как в кишечнике новорожденных сначала колонизировались представители Enterobacteriaceae в первый день жизни, которое постепенно уменьшается на 6 -й день , за которым следует Bifidobacteria , которое увеличивалось через 2-3 дня после приема пищи. жизнь грудного вскармливания младенцев.Однако количество других бактерий (энтеробактерий) было больше у детей, вскармливаемых из бутылочки, чем у детей, вскармливаемых грудью. Эти результаты свидетельствуют о том, что грудное вскармливание защищает незрелый кишечник от системных инфекций. [10] Ира HG и др. . сообщили, что популяция грамположительных бактерий была выше, чем грамотрицательных бактерий у детей с низкой массой тела при рождении, а характер бактериальной колонизации был аналогичен как у детей, вскармливаемых грудным молоком, так и у детей, вскармливаемых молочной смесью, в условиях США. Они выделили Lactobacillus sp.и Bifidobacterium sp. только у одного младенца, находящегося на грудном вскармливании. [11] В другом исследовании было замечено, что представители Enterobacteriaceae, Enterococcus sp. и Staphylococcus sp. были колонизированы в течение 7 -го -го дня жизни без антибактериальной терапии доношенных новорожденных. В исследовании, проведенном Стивенсом Д.К. и сотрудниками, 20 младенцев, которых кормили молочными смесями из хранимых смесей и патентованными смесями на второй неделе жизни среди госпитализированных недоношенных детей, продемонстрировали картину кишечной флоры, отличную от нормальных доношенных детей, что может привести к внутрибольничному сепсису и увеличению заболеваемости системных и локализованных инфекций.Доказано, что использование замороженного грудного молока для подавления колиформных и других потенциально патогенных организмов неэффективно у этих госпитализированных недоношенных новорожденных, особенно тех, которые лечились антибиотиками широкого спектра действия. [12,13] Настоящее исследование было запланировано для определения различных аэробная и анаэробная фекальная бактериальная флора недоношенных детей (<1500 г) в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии. В нашем исследовании большинство младенцев были колонизированы 2-3 видами бактерий в обеих группах, преобладающими видами были Klebsiella pneumoniae и E.coli . Уровень колонизации грамотрицательных бактерий был высоким как у недоношенных, так и у доношенных детей, тогда как количество грамположительных бактерий было меньше у недоношенных. Бактериальная колонизация недоношенного кишечника, вероятно, играет роль в патогенезе и предрасположенности к желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК). Вестра-Мейер и др. . исследовали аэробную и анаэробную фекальную флору при некротическом энтероколите новорожденных, чтобы установить связь между колонизацией конкретной бактериальной флорой и развитием NEC, и сообщили, что уровень выделения грамположительных кокков (GPC) был выше, чем грамотрицательных бацилл (GNB).Обычно выделяемыми аэробными бактериями были Staphylococcus epidermidis (61%), Enterococcus sp. (56%), Klebsiella sp. (37%) и E.coli (29%), а анаэробными организмами были Clostridium sp (61%) и Bacteroides sp (20%). В их исследовании аэробные и анаэробные виды бактерий колонизировали в среднем 2,1 и 0,8 на грамм стула соответственно. Они предположили, что не было значительной разницы в характере колонизации бактерий между исследуемой и контрольной группами.Важным отличием было то, что колонизация Klebsiella sp была выше у тех детей, у которых в анамнезе был диагностирован НЭК [14], тогда как в текущем исследовании Salmonella senftenberg, E.coli, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum и Klebsiella oxytoca выращивали у детей с диагнозом NEC. Было высказано предположение, что патогенная кишечная флора может играть роль в предрасположенности новорожденных к внутрибольничному сепсису и НЭК [15,16] Hoy et al .сообщили, что снижение количества некоторых видов бактерий в фекальной флоре из-за изменения pH после бактериальной ферментации в тонком кишечнике изменяет внутрипросветные условия и предшествует клиническому началу НЭК [17].

Холл и др. . обнаружили дефицит Lactobacilli по сравнению с бактериями формы кишечной палочки у недоношенных детей, которые находились на лечении в отделении интенсивной терапии, и высокое количество Lactobacillus у доношенных детей к 30-дневному возрасту. Это исследование указывает на недостаток полезной флоры у недоношенных детей.[18] Аэробные и анаэробные виды бактерий у недоношенных новорожденных с НЭК или без них были колонизированы в среднем на 2,1 и 0,1 на грамм стула соответственно. В настоящем исследовании Lactobacillus sp. был выделен только в одном образце стула на 7-14 день, тогда как у доношенных новорожденных Bifidobacterium sp были выделены у 4/29 (13,7%), в отличие от Rubatelli et al . из Италии, который сообщил о высокой распространенности Bifidobacterium sp. (47,6%) у детей, вскармливаемых грудью, и Klessen et al .у 89% детей, вскармливаемых грудью, на 7 -й день жизни, которая увеличилась до 95% к 30 -й день, Lactobacilli были выделены в 12/19 (63%) проб стула на 7 -й день. дня и увеличилась до 80-85% в течение двух месяцев. [19,20] Однако удивительно, что в настоящем исследовании Lactobacilli не были выделены ни в одном образце стула грудных младенцев за период 1 -2 месяца. Также выделение Bifidobacterium sp.число доношенных детей было низким по сравнению с вышеупомянутым исследованием. В связи с нашим открытием, необходимо рассмотреть важный вопрос: лучше ли колонизируются дети, вскармливаемые грудью, анаэробами в нашей стране? Большинство недоношенных детей в отделении интенсивной терапии получали антибиотики широкого спектра действия и частично или полностью кормились сцеженным грудным молоком, что может быть фактором, ограничивающим бактериальную колонизацию в кишечнике. Необходимо изучить меры, которые «нормализуют» микробную экологию кишечника. У здоровых доношенных детей грудное молоко способствует колонизации Bifidobacterium и Lactobacillus sp.[21] Показания к грудному вскармливанию просто на основании того, что они помогают нормальному развитию кишечной флоры, для борьбы с кишечной инфекцией, должны быть пересмотрены. Циркулирующее микробное давление в окружающей среде в развивающихся странах, таких как Индия, может препятствовать колонизации анаэробными неспорообразующими грамположительными бациллами, такими как Bifidobacterium , а также Lactobacillus . В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили умеренную степень колонизации Lactobacilli у более крупных недоношенных детей (> 1500 г), которых кормили пробиотиком Lactobacillus rahmnosus . ГГ .В последние годы несколько исследований, включая наше исследование, показали, что многие препараты Lactobacillus могут колонизировать кишечник недоношенных новорожденных и изменять кишечную флору, но приводит ли такая колонизация к клинически значимому улучшению, еще предстоит изучить [22, 23]

Представленные здесь данные основаны на микробиологической изоляции в обычных аэробных и анаэробных средах. Недавние отчеты предполагают, что молекулярные инструменты, основанные на сходстве последовательностей 16 S рДНК, такие как флуоресцентная гибридизация in-situ (FISH) и денатурирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE), помогли преодолеть ограничения традиционных методов микробиологической культуры при изучении состава фекальной микрофлоры.Эти инструменты успешно применялись для изучения развития детской микрофлоры, изменений микрофлоры человека в процессе старения, воздействия пребиотиков и пробиотиков на состав микрофлоры человека, а также влияния диетических вмешательств на микрофлору кишечника [24]. ]

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мы пришли к выводу, что специфическая микробная экология модели колонизации и отсутствие защитных грамположительных анаэробных бактерий, особенно Bifidobacterium sp. и Lactobacillus sp в незрелом кишечнике могут иметь решающее значение в патогенезе НЭК.Предполагается, что использование пробиотиков (препарат, содержащий Lactobacillus ) может иметь защитную роль у этих младенцев, чтобы предотвратить НЭК и другие желудочно-кишечные осложнения.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

Эта работа была поддержана грантом Fogarty 1 RO3 TW 00601 от NIH, США. Мы хотели бы поблагодарить участвующую команду отделения педиатрии NICU, AIIMS за предоставленные кейсы.

Сноски

Источник поддержки: Fogarty Grant 1RO3 TW 00601 от NIH, США

Конфликт интересов: Не заявлено

ССЫЛКИ

1.Ши Х.Н., Уокер А. Бактериальная колонизация и развитие защиты кишечника. Можно J Гастроэнтерол. 2004. 18: 493–500. [PubMed] [Google Scholar] 2. Старк П.Л., Ли А. Микробная экология толстой кишки у младенцев, вскармливаемых грудью и молочными смесями, в течение первого года жизни. J Med Microbiol. 1982; 15: 189–203. [PubMed] [Google Scholar] 3. Лонг СС, Свенсон Р.М. Развитие анаэробной фекальной флоры у здоровых новорожденных. J.Pediatr. 1977; 91: 289–301. [Google Scholar] 4. Хурре А., Каллиомяки М., Раутава С., Ринне М., Салминен С., Изолаури Э.Воздействие на микробиоту кишечника и гуморальный иммунитет. Неонатология. 2008; 93: 236–40. [PubMed] [Google Scholar] 5. Пендерс Дж., Тиджис С., Винк С., Стельма Ф.Ф., Снидерс Б., Куммелинг И. и др. Факторы, влияющие на состав кишечной микробиоты в раннем возрасте. Педиатрия. 2006; 118: 511–21. [PubMed] [Google Scholar] 6. Томпсон-Чагоян О.К., Мальдонадо Дж., Гил А. Колонизация и влияние болезней и других факторов на микробиоту кишечника. Dig Dis Sci. 2007; 52: 2069–77. [PubMed] [Google Scholar] 8.Lundequist B, Nord CE, Winberg J. Состав фекальной микрофлоры у детей, находящихся на грудном вскармливании и в бутылках, от рождения до восьми недель. Acta Paediatr Scand. 1985; 74: 45–51. [PubMed] [Google Scholar] 10. Исэки К. Развитие кишечной флоры у новорожденных. Хоккайдо Игаку Дзасси. 1987; 62: 895–906. [PubMed] [Google Scholar] 11. Ира Х.Г., Ричард С.С., Вики Л.Т., Трейси С.Х., Пинаки П. Микробная флора стула у младенцев с крайне низкой массой тела при рождении. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999; 80: F167–173. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12.Borderon JC, Lionnet C, Rondeau C, Suc AL, Laugier J, Gold F. Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибактериальной терапии в течение первых 7 дней жизни: энтеробактерии, энтерококки, стафилококки. Патол Биол (Париж) 1996; 44: 416–22. [PubMed] [Google Scholar] 13. Стивенон Д.К., Янк Ц., Кернер Дж. А., младший, Год AS. Кишечная флора на второй неделе жизни у госпитализированных недоношенных детей, которых кормили хранимым замороженным грудным молоком или запатентованной смесью. Clin Pediatr (Phila) 1985; 24: 338–41. [PubMed] [Google Scholar] 16.Westra-Meijer CM, Degener JE, Dzoljic-Danilovic G, Michel MF, Mettau JW. Количественное исследование аэробной и анаэробной фекальной флоры при некротическом энтероколите новорожденных. Arch Dis Child. 1983; 58: 523–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Хой С., Миллар М.Р., Маккей П., Годвин П.Г., Лэнгдейл В., Левен М.И. Количественные изменения фекальной микрофлоры, предшествующие некротическому энтероколиту у недоношенных новорожденных. Arch Dis Child. 1990; 65: 1057–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Холл, Массачусетс, Коул С.Б., Смит С.Л., Фуллер Р., Роллс С.Дж.Фактор, влияющий на наличие фекальных лактобацилл в раннем детстве. Arch Dis Child. 1990; 65: 185–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Rubaltelli FF, Biadaiali R, Pecile P, Nicaletti P. Кишечная флора у грудных детей и грудных детей. J Perinat Med. 1998. 26: 186–91. [PubMed] [Google Scholar] 20. Kleessen B, Bunke H, Tovar K, Noaek J, Sawatzki G. Влияние смесей для двух младенцев и грудного молока на развитие фекальной флоры у новорожденных. Acta Paediatr. 1995; 84: 1347–56.[PubMed] [Google Scholar] 21. Эль Мохандес А.Е., Пикард МБ, Симменс С.Дж., Кейзер Дж.Ф. Использование грудного молока в отделениях интенсивной терапии снижает частоту внутрибольничного сепсиса. J Perinatol. 1997; 17: 130–4. [PubMed] [Google Scholar] 22. Агарвал Р., Шарма Н., Чаудри Р., Деорари А., Пол В. К., Геволб Т. и др. Влияние орального Lactobacillus gg на кишечную микрофлору новорожденных с низкой массой тела. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 2003; 36: 397–402. [PubMed] [Google Scholar] 23. Лангендрис Дж. П., Детри Дж., Ван Хис Дж., Ламборай Дж. М., Даримонт Дж., Мозин М. Дж. И др.Влияние ферментированной детской смеси, содержащей бифидобактерии viale, на состав фекальной флоры и pH здоровых доношенных детей. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 1995; 21: 177–81. [PubMed] [Google Scholar] 24. Танака С., Кобаяси Т., Сонгджинда П., Татэяма А., Цубучи М., Киёхара С. и др. Влияние воздействия антибиотиков в раннем постнатальном периоде на развитие кишечной микробиоты. FEMS Immunol Med Microbiol. 2009; 56: 80–7. [PubMed] [Google Scholar]

Количественное и качественное исследование кишечной флоры новорожденных

J Glob Infect Dis.2012 октябрь-декабрь; 4 (4): 188–192.

Нидхи Шарма

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Рама Чаудхри

Отдел микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

Пинаки Паниграхи

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Департамент микробиологии Всеиндийского института медицинских наук, Нью-Дели, Индия

1 Департамент эпидемиологии и педиатрии, Центр глобального здоровья и развития, Колледж общественного здравоохранения, Медицинский центр Университета Небраски, Омаха, штат Нью-Йорк, США

Авторские права: © Journal of Global Infectious Diseases

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями Creative Commons Attribution-Nonco. mmercial-Share Alike 3.0 Unported, что разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

В неонатальном периоде развивающаяся функция кишечного барьера обеспечивает неоптимальную защиту слизистой оболочки от инфекции. Установление нормальной комменсальной микрофлоры играет жизненно важную роль в этом процессе.

Цели:

Определить аэробные и анаэробные бактерии количественными и качественными методами в образцах фекалий новорожденных.

Условия и дизайн:

Проспективное исследование было проведено в двух группах в больнице третичного уровня: в группе А были недоношенные дети и в группе В — доношенные дети.

Материалы и методы:

В исследование были включены 62 недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и гестационным возрастом <34 недель и 29 доношенных новорожденных в возрасте 4 недель. Количественное определение бактериальной нагрузки проводили с помощью десятикратных серийных разведений на соответствующих средах.

Статистический анализ:

Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04.

Результаты и выводы:

Преобладающей аэробной бактерией была Klebsiella pneumoniae . У недоношенных младенцев аэробные бактерии были колонизированы в среднем 2,1 и анаэробными бактериями 0,1. Количественный анализ показал, что количество бактериальных колоний в фекалиях находится в диапазоне 10 4 -10 13 КОЕ / г. Грамотрицательные и грамположительные бактерии постепенно увеличивались с интервалом от 2 до 3 недель. Среднее значение log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3 по 14 день ( P > 0.05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05). Потенциальные патогенные аэробные бактерии преобладают в кишечной флоре недоношенных детей, находящихся на вскармливании в неонатальном отделении. Необходимо изучить меры по устранению этого дисбаланса в микроэкологии кишечника недоношенных детей.

Ключевые слова: Бактериальная флора, фекалии, кишечник, новорожденные, количественное определение

ВВЕДЕНИЕ

В неонатальный период формирование нормальной комменсальной микрофлоры играет важную роль в развитии защиты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.Сообщалось, что бактериальная флора недоношенных детей в отделении интенсивной терапии новорожденных (ОИТН) отличается от здоровых доношенных детей. [1,2] У здоровых желудочно-кишечный тракт доношенных новорожденных был колонизирован разнообразной микрофлорой. в течение 10 дней жизни, тогда как у недоношенных детей микрофлора не получает возможности для колонизации. У младенцев с низкой массой тела при рождении это важный фактор риска неонатальной смертности и заболеваемости, включая сепсис и желудочно-кишечные расстройства.[3,4] Большинство этих младенцев обычно получают лечение антибиотиками широкого спектра действия в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии вскоре после рождения. Таким образом, бактериальная флора этих младенцев характеризуется отложенной колонизацией желудочно-кишечного тракта ограниченным количеством бактерий. [5] Однако имеется ограниченная литература, касающаяся микробной флоры у недоношенных детей, особенно у детей с низкой массой тела при рождении (<1500 г), которые предрасположены к различным инфекционным и желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК).Таким образом, это исследование было проведено с целью определения фекальной микрофлоры у недоношенных детей, поступивших в отделение интенсивной терапии стационара третичного уровня, чтобы оценить риск развития желудочно-кишечных осложнений у этих детей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проспективное исследование (Фаза-I) было проведено в двух группах во Всеиндийском институте медицинских наук, Нью-Дели, Индия, после того, как оно было одобрено с этической точки зрения. В группу А вошли шестьдесят два недоношенных ребенка с массой тела <1500 г и сроком беременности <34 недель.Из 62 случаев было проведено количественное определение 34 образцов стула и качественный анализ фекальной бактериальной флоры в 28. Образцы были собраны на 3, 7, 14, 21 день (все ± 2 дня) у 34 детей. В группе Б обследовано 29 доношенных новорожденных. Образцы кала были качественно проанализированы.

Один грамм образца стула переносили во флакон со стеклянными шариками (SIGMA Chemicals Co., США), содержащий 1 мл стерильного физиологического раствора, и встряхивали. Готовили десятикратные серийные разведения (10 2 -10 9 ) и 10 мкл каждого разведения культивировали на 5% овечьей крови и агаре МакКонки (Difco Chemicals) для аэробных бактерий.Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 48 часов и исследовали через 24 часа и 48 часов. Бактерии были идентифицированы с помощью обычных биохимических тестов, а также с помощью системы API, то есть теста API 20 E, API staph / strep (bioMerieux Vitek Inc.) для различных грамположительных и отрицательных организмов. Для анаэробного культивирования образцы стула высевали на агар для инфузии сердца Brain (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) с добавлением гемина (Hi-Media Laboratories, Pvt. Ltd. India) и Vit K (Hi-Media Laboratories, Pvt.Ltd. India) и инкубировали в анаэробных условиях при 37 ° C в течение от 48 часов до 72 часов. Анаэробные бактерии были идентифицированы обычными биохимическими методами и системой RapID ANA (Innovative Diagnostic System Inc Norcross, GA).

Общее количество бактерий на грамм стула сообщалось в каждом образце количественного исследования.

Статистика

Подсчет колоний организмов выражали как log 10 подсчет. Для статистических сравнений использовали средний логарифм КОЕ. Данные были проанализированы с помощью EPIINFO-Ver 6.04. Статистический метод для непрерывных переменных использовался с применением t-критерия или критерия Манна-Уитни (где применимо), а для категориальных переменных использовались хи-квадрат или точный критерий Фишера (для сравнения количества колонизированных младенцев). Значимость наблюдалась, если P <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Всего в это исследование был включен 91 ребенок для определения структуры кишечной флоры новорожденных.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Общее количество колоний аэробных бактерий колебалось от 10 4 до 10 13 КОЕ / г.Показатели колонизации наиболее часто выделяемых бактерий приведены в. Характер колонизации изменялся через разные промежутки времени в конце сбора образцов (d21). Количество фекальных бактерий, как грамотрицательных, так и грамположительных, постепенно увеличивалось в течение 2–3 недель. Некоторые образцы нельзя было собрать в определенный промежуток времени, потому что у младенцев не было стула.

Таблица 1

Общее количество бактериальных изолятов у недоношенных детей (Группа A)

Колонизация грамотрицательных организмов увеличивалась с 1 по 21 день во время пребывания в отделении интенсивной терапии.Наблюдалось последовательное увеличение общего числа видов бактерий и значительные изменения в структуре колонизации отдельными видами бактерий с течением времени. К концу первого месяца жизни значительный процент детского стула был заселен Klebsiella pneumoniae ; 17,8% на 3 день, 50% на 7 день, 61% на 14 день, 60% на 21 день ( P <0,05) и E. coli ; 35% на 3-й день, 40% на 7-й день, 38% на 14-й день и 60% на 21-й день. Среднее log КОЕ грамотрицательных бактерий и грамположительных бактерий было статистически незначимым с 3-го по 14-й день ( P > 0). .05). На 21 день наблюдалось значительное изменение колонизации обоих бактериальных sp ( P <0,05) []. Salmonella senftenberg, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum, Klebsiella oxytoca были обнаружены только у младенцев с клиническим анамнезом НЭК.

Таблица 2

Среднее значение log КОЕ у младенцев <1500 г

КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

Колонизированными грамотрицательными и положительными аэробными организмами были Klebsiella pneumoniae 41,3%, Escherichia coli 24.1%, Proteus sp 10,3%, Enterococcus faecium 34,4%, Staphylococcus epidermidis 6,8% и Micrococcus sp 3,4% [] и колонизация анаэробных организмов составила Bifidobacterium sp (13,4%) и Clostridium biferment (3,4%). Наблюдалась статистически значимая разница в росте грамположительных организмов в обеих группах ( P <0,05), которая оказалась низкой у недоношенных детей. Рост защитных организмов (полезных бактерий) был статистически незначимым ( P > 0.05) в обеих группах.

Таблица 3

Общее количество видов бактерий у недоношенных и доношенных детей

ОБСУЖДЕНИЕ

Характер бактериальной колонизации в кишечнике новорожденных зависит от различных факторов; гестационный возраст, способ родоразрешения, тип кормления, бактериальные взаимодействия, антимикробная терапия и другие факторы окружающей среды. Сообщалось, что колонизация микрофлоры у детей, вскармливаемых грудью, отличается от кормления молочными смесями. [4,5] Некоторые авторы обнаружили, что фекальная микрофлора у детей, вскармливаемых грудью и детей, вскармливаемых смесью, по существу одинакова; другие показали, что Bifidobacteria являются преобладающей флорой в фекалиях младенцев, вскармливаемых грудью.[6,7] Эти исследования были сосредоточены на доношенных детях и показали, что желудочно-кишечный тракт здоровых доношенных новорожденных колонизирован различными типами аэробных и анаэробных микробных организмов. [8,9]

Iseki K изучал развитие фекальной флоры, как аэробные, так и анаэробные при введении различных кормовых смесей, и наблюдали, как в кишечнике новорожденных сначала колонизировались представители Enterobacteriaceae в первый день жизни, которое постепенно уменьшается на 6 -й день , за которым следует Bifidobacteria , которое увеличивалось через 2-3 дня после приема пищи. жизнь грудного вскармливания младенцев.Однако количество других бактерий (энтеробактерий) было больше у детей, вскармливаемых из бутылочки, чем у детей, вскармливаемых грудью. Эти результаты свидетельствуют о том, что грудное вскармливание защищает незрелый кишечник от системных инфекций. [10] Ира HG и др. . сообщили, что популяция грамположительных бактерий была выше, чем грамотрицательных бактерий у детей с низкой массой тела при рождении, а характер бактериальной колонизации был аналогичен как у детей, вскармливаемых грудным молоком, так и у детей, вскармливаемых молочной смесью, в условиях США. Они выделили Lactobacillus sp.и Bifidobacterium sp. только у одного младенца, находящегося на грудном вскармливании. [11] В другом исследовании было замечено, что представители Enterobacteriaceae, Enterococcus sp. и Staphylococcus sp. были колонизированы в течение 7 -го -го дня жизни без антибактериальной терапии доношенных новорожденных. В исследовании, проведенном Стивенсом Д.К. и сотрудниками, 20 младенцев, которых кормили молочными смесями из хранимых смесей и патентованными смесями на второй неделе жизни среди госпитализированных недоношенных детей, продемонстрировали картину кишечной флоры, отличную от нормальных доношенных детей, что может привести к внутрибольничному сепсису и увеличению заболеваемости системных и локализованных инфекций.Доказано, что использование замороженного грудного молока для подавления колиформных и других потенциально патогенных организмов неэффективно у этих госпитализированных недоношенных новорожденных, особенно тех, которые лечились антибиотиками широкого спектра действия. [12,13] Настоящее исследование было запланировано для определения различных аэробная и анаэробная фекальная бактериальная флора недоношенных детей (<1500 г) в условиях интенсивной терапии интенсивной терапии. В нашем исследовании большинство младенцев были колонизированы 2-3 видами бактерий в обеих группах, преобладающими видами были Klebsiella pneumoniae и E.coli . Уровень колонизации грамотрицательных бактерий был высоким как у недоношенных, так и у доношенных детей, тогда как количество грамположительных бактерий было меньше у недоношенных. Бактериальная колонизация недоношенного кишечника, вероятно, играет роль в патогенезе и предрасположенности к желудочно-кишечным осложнениям, таким как некротический энтероколит (НЭК). Вестра-Мейер и др. . исследовали аэробную и анаэробную фекальную флору при некротическом энтероколите новорожденных, чтобы установить связь между колонизацией конкретной бактериальной флорой и развитием NEC, и сообщили, что уровень выделения грамположительных кокков (GPC) был выше, чем грамотрицательных бацилл (GNB).Обычно выделяемыми аэробными бактериями были Staphylococcus epidermidis (61%), Enterococcus sp. (56%), Klebsiella sp. (37%) и E.coli (29%), а анаэробными организмами были Clostridium sp (61%) и Bacteroides sp (20%). В их исследовании аэробные и анаэробные виды бактерий колонизировали в среднем 2,1 и 0,8 на грамм стула соответственно. Они предположили, что не было значительной разницы в характере колонизации бактерий между исследуемой и контрольной группами.Важным отличием было то, что колонизация Klebsiella sp была выше у тех детей, у которых в анамнезе был диагностирован НЭК [14], тогда как в текущем исследовании Salmonella senftenberg, E.coli, Salmonella typhi, Salmonella gallinarum и Klebsiella oxytoca выращивали у детей с диагнозом NEC. Было высказано предположение, что патогенная кишечная флора может играть роль в предрасположенности новорожденных к внутрибольничному сепсису и НЭК [15,16] Hoy et al .сообщили, что снижение количества некоторых видов бактерий в фекальной флоре из-за изменения pH после бактериальной ферментации в тонком кишечнике изменяет внутрипросветные условия и предшествует клиническому началу НЭК [17].

Холл и др. . обнаружили дефицит Lactobacilli по сравнению с бактериями формы кишечной палочки у недоношенных детей, которые находились на лечении в отделении интенсивной терапии, и высокое количество Lactobacillus у доношенных детей к 30-дневному возрасту. Это исследование указывает на недостаток полезной флоры у недоношенных детей.[18] Аэробные и анаэробные виды бактерий у недоношенных новорожденных с НЭК или без них были колонизированы в среднем на 2,1 и 0,1 на грамм стула соответственно. В настоящем исследовании Lactobacillus sp. был выделен только в одном образце стула на 7-14 день, тогда как у доношенных новорожденных Bifidobacterium sp были выделены у 4/29 (13,7%), в отличие от Rubatelli et al . из Италии, который сообщил о высокой распространенности Bifidobacterium sp. (47,6%) у детей, вскармливаемых грудью, и Klessen et al .у 89% детей, вскармливаемых грудью, на 7 -й день жизни, которая увеличилась до 95% к 30 -й день, Lactobacilli были выделены в 12/19 (63%) проб стула на 7 -й день. дня и увеличилась до 80-85% в течение двух месяцев. [19,20] Однако удивительно, что в настоящем исследовании Lactobacilli не были выделены ни в одном образце стула грудных младенцев за период 1 -2 месяца. Также выделение Bifidobacterium sp.число доношенных детей было низким по сравнению с вышеупомянутым исследованием. В связи с нашим открытием, необходимо рассмотреть важный вопрос: лучше ли колонизируются дети, вскармливаемые грудью, анаэробами в нашей стране? Большинство недоношенных детей в отделении интенсивной терапии получали антибиотики широкого спектра действия и частично или полностью кормились сцеженным грудным молоком, что может быть фактором, ограничивающим бактериальную колонизацию в кишечнике. Необходимо изучить меры, которые «нормализуют» микробную экологию кишечника. У здоровых доношенных детей грудное молоко способствует колонизации Bifidobacterium и Lactobacillus sp.[21] Показания к грудному вскармливанию просто на основании того, что они помогают нормальному развитию кишечной флоры, для борьбы с кишечной инфекцией, должны быть пересмотрены. Циркулирующее микробное давление в окружающей среде в развивающихся странах, таких как Индия, может препятствовать колонизации анаэробными неспорообразующими грамположительными бациллами, такими как Bifidobacterium , а также Lactobacillus . В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили умеренную степень колонизации Lactobacilli у более крупных недоношенных детей (> 1500 г), которых кормили пробиотиком Lactobacillus rahmnosus . ГГ .В последние годы несколько исследований, включая наше исследование, показали, что многие препараты Lactobacillus могут колонизировать кишечник недоношенных новорожденных и изменять кишечную флору, но приводит ли такая колонизация к клинически значимому улучшению, еще предстоит изучить [22, 23]

Представленные здесь данные основаны на микробиологической изоляции в обычных аэробных и анаэробных средах. Недавние отчеты предполагают, что молекулярные инструменты, основанные на сходстве последовательностей 16 S рДНК, такие как флуоресцентная гибридизация in-situ (FISH) и денатурирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE), помогли преодолеть ограничения традиционных методов микробиологической культуры при изучении состава фекальной микрофлоры.Эти инструменты успешно применялись для изучения развития детской микрофлоры, изменений микрофлоры человека в процессе старения, воздействия пребиотиков и пробиотиков на состав микрофлоры человека, а также влияния диетических вмешательств на микрофлору кишечника [24]. ]

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мы пришли к выводу, что специфическая микробная экология модели колонизации и отсутствие защитных грамположительных анаэробных бактерий, особенно Bifidobacterium sp. и Lactobacillus sp в незрелом кишечнике могут иметь решающее значение в патогенезе НЭК.Предполагается, что использование пробиотиков (препарат, содержащий Lactobacillus ) может иметь защитную роль у этих младенцев, чтобы предотвратить НЭК и другие желудочно-кишечные осложнения.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

Эта работа была поддержана грантом Fogarty 1 RO3 TW 00601 от NIH, США. Мы хотели бы поблагодарить участвующую команду отделения педиатрии NICU, AIIMS за предоставленные кейсы.

Сноски

Источник поддержки: Fogarty Grant 1RO3 TW 00601 от NIH, США

Конфликт интересов: Не заявлено

ССЫЛКИ

1.Ши Х.Н., Уокер А. Бактериальная колонизация и развитие защиты кишечника. Можно J Гастроэнтерол. 2004. 18: 493–500. [PubMed] [Google Scholar] 2. Старк П.Л., Ли А. Микробная экология толстой кишки у младенцев, вскармливаемых грудью и молочными смесями, в течение первого года жизни. J Med Microbiol. 1982; 15: 189–203. [PubMed] [Google Scholar] 3. Лонг СС, Свенсон Р.М. Развитие анаэробной фекальной флоры у здоровых новорожденных. J.Pediatr. 1977; 91: 289–301. [Google Scholar] 4. Хурре А., Каллиомяки М., Раутава С., Ринне М., Салминен С., Изолаури Э.Воздействие на микробиоту кишечника и гуморальный иммунитет. Неонатология. 2008; 93: 236–40. [PubMed] [Google Scholar] 5. Пендерс Дж., Тиджис С., Винк С., Стельма Ф.Ф., Снидерс Б., Куммелинг И. и др. Факторы, влияющие на состав кишечной микробиоты в раннем возрасте. Педиатрия. 2006; 118: 511–21. [PubMed] [Google Scholar] 6. Томпсон-Чагоян О.К., Мальдонадо Дж., Гил А. Колонизация и влияние болезней и других факторов на микробиоту кишечника. Dig Dis Sci. 2007; 52: 2069–77. [PubMed] [Google Scholar] 8.Lundequist B, Nord CE, Winberg J. Состав фекальной микрофлоры у детей, находящихся на грудном вскармливании и в бутылках, от рождения до восьми недель. Acta Paediatr Scand. 1985; 74: 45–51. [PubMed] [Google Scholar] 10. Исэки К. Развитие кишечной флоры у новорожденных. Хоккайдо Игаку Дзасси. 1987; 62: 895–906. [PubMed] [Google Scholar] 11. Ира Х.Г., Ричард С.С., Вики Л.Т., Трейси С.Х., Пинаки П. Микробная флора стула у младенцев с крайне низкой массой тела при рождении. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999; 80: F167–173. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12.Borderon JC, Lionnet C, Rondeau C, Suc AL, Laugier J, Gold F. Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибактериальной терапии в течение первых 7 дней жизни: энтеробактерии, энтерококки, стафилококки. Патол Биол (Париж) 1996; 44: 416–22. [PubMed] [Google Scholar] 13. Стивенон Д.К., Янк Ц., Кернер Дж. А., младший, Год AS. Кишечная флора на второй неделе жизни у госпитализированных недоношенных детей, которых кормили хранимым замороженным грудным молоком или запатентованной смесью. Clin Pediatr (Phila) 1985; 24: 338–41. [PubMed] [Google Scholar] 16.Westra-Meijer CM, Degener JE, Dzoljic-Danilovic G, Michel MF, Mettau JW. Количественное исследование аэробной и анаэробной фекальной флоры при некротическом энтероколите новорожденных. Arch Dis Child. 1983; 58: 523–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Хой С., Миллар М.Р., Маккей П., Годвин П.Г., Лэнгдейл В., Левен М.И. Количественные изменения фекальной микрофлоры, предшествующие некротическому энтероколиту у недоношенных новорожденных. Arch Dis Child. 1990; 65: 1057–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Холл, Массачусетс, Коул С.Б., Смит С.Л., Фуллер Р., Роллс С.Дж.Фактор, влияющий на наличие фекальных лактобацилл в раннем детстве. Arch Dis Child. 1990; 65: 185–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Rubaltelli FF, Biadaiali R, Pecile P, Nicaletti P. Кишечная флора у грудных детей и грудных детей. J Perinat Med. 1998. 26: 186–91. [PubMed] [Google Scholar] 20. Kleessen B, Bunke H, Tovar K, Noaek J, Sawatzki G. Влияние смесей для двух младенцев и грудного молока на развитие фекальной флоры у новорожденных. Acta Paediatr. 1995; 84: 1347–56.[PubMed] [Google Scholar] 21. Эль Мохандес А.Е., Пикард МБ, Симменс С.Дж., Кейзер Дж.Ф. Использование грудного молока в отделениях интенсивной терапии снижает частоту внутрибольничного сепсиса. J Perinatol. 1997; 17: 130–4. [PubMed] [Google Scholar] 22. Агарвал Р., Шарма Н., Чаудри Р., Деорари А., Пол В. К., Геволб Т. и др. Влияние орального Lactobacillus gg на кишечную микрофлору новорожденных с низкой массой тела. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 2003; 36: 397–402. [PubMed] [Google Scholar] 23. Лангендрис Дж. П., Детри Дж., Ван Хис Дж., Ламборай Дж. М., Даримонт Дж., Мозин М. Дж. И др.Влияние ферментированной детской смеси, содержащей бифидобактерии viale, на состав фекальной флоры и pH здоровых доношенных детей. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 1995; 21: 177–81. [PubMed] [Google Scholar] 24. Танака С., Кобаяси Т., Сонгджинда П., Татэяма А., Цубучи М., Киёхара С. и др. Влияние воздействия антибиотиков в раннем постнатальном периоде на развитие кишечной микробиоты. FEMS Immunol Med Microbiol. 2009; 56: 80–7. [PubMed] [Google Scholar]

Нозокомиальная колонизация недоношенных детей Klebsiella oxytoca: вероятная роль процедуры энтерального питания в передаче и борьбе со вспышкой с использованием перчаток

Задача: Изучить устойчивость колонизации недоношенных детей Klebsiella oxytoca, уделяя особое внимание способу передачи бактерии и оценке стандартных мер предосторожности для остановки эпидемии.

Дизайн: Ретроспективный анализ случаев и проспективное исследование систематических бактериологических образцов (стул и глотка) от младенцев, медицинских работников (МР) и окружающей среды с генотипированием штаммов с помощью произвольно запрограммированной полимеразной цепной реакции.

Параметр: Отделение недоношенных детей (PBU) и отделение интенсивной терапии новорожденных в университетской больнице Сент-Этьен, Франция.

Результаты: Вспышка K oxytoca подозревалась в двух педиатрических палатах после возникновения фатальной бактериемии у новорожденного, госпитализированного в PBU, и колонизации других младенцев через 2 месяца. Ретроспективный анализ показал, что у 24 детей пищеварительный тракт колонизирован. Резервуаров окружающей среды ни в отделениях, ни при энтеральном питании не наблюдалось. K окситока не была выделена из проб МО.Генотипирование подтвердило наличие эпидемических штаммов, хотя независимые клоны были ответственны за инфекции или колонизации в каждой из двух единиц. Хронология и место колонизации младенцев (выделение K oxytoca в стуле перед глоткой) были определены в ходе проспективного исследования и позволили предположить, что процедуры энтерального питания могут быть источником заражения. Поэтому медработники рекомендовали использовать перчатки во время этой практики и после корректировки стандартных мер предосторожности остановили вспышку.

Вывод: Чтобы предотвратить перекрестное заражение среди младенцев из группы высокого риска, необходимо уделять особое внимание стандартным мерам предосторожности. Бактериологический надзор за пищеварительным трактом новорожденных может помочь проверить соблюдение этих рекомендаций.

Klebsiella — обзор | Темы ScienceDirect

Клинические проявления

Klebsiella spp . являются важными условно-патогенными микроорганизмами у детей, вызывающими широкий спектр инфекций, включая ИБС, связанные со здоровьем и населением; инфекции центральной нервной системы (ЦНС), дыхательных путей, мочевыводящих путей, опорно-двигательного аппарата и брюшной полости; глубокие абсцессы и послеоперационные, травматические и ожоговые инфекции. Примерно 75% BSI связаны со здравоохранением. 16–24 Вспышки в неонатальных отделениях вызывают серьезную озабоченность. 25 Инфекции новорожденных включают BSI, менингит, абсцесс мозга, конъюнктивит, абсцесс печени, эндокардит, пневмонию, некротический фасциит, артрит, остеомиелит, инфекцию мочевыводящих путей (UTI) и некротический энтероколит (NEC). 26–32 Клинические проявления инфекции не отличаются от таковых у других грамотрицательных бацилл. Хотя Escherichia coli является наиболее частой причиной ИМП, Klebsiella и Proteus spp . также являются распространенными микроорганизмами Enterobacteriaceae, связанными с ИМП. 33

Грамотрицательные микроорганизмы составляют более 50% ИМТ у детей. Во время 6-летнего проспективного исследования грамотрицательных BSI в педиатрическом медицинском центре третичного уровня в Израиле, K.pneumoniae был наиболее часто идентифицируемым патогеном и составлял 26% (109 из 419) изолятов. 19 В обзоре 57 случаев ИМТ у детей, вызванного K. pneumoniae , 67% были моложе 12 месяцев, и у большинства было по крайней мере одно основное заболевание, включая аномалии желудочно-кишечного тракта в 56%, центральный венозный катетер. у 35%, нейтропения у 25% и патология мочевыводящих путей у 16%. 34

Проект по надзору и контролю за патогенами эпидемиологической важности, основанный в Университете Содружества Вирджинии в Ричмонде, предоставил важные данные для выявления преобладающих патогенов, ответственных за связанные со здравоохранением ИБТ у детей. 35 Хотя грамположительные организмы, особенно коагулазонегативные виды Staphylococcus spp., Составляли более 50% изолятов, Candida spp . На приходилось 9,3%, а на Klebsiella spp . На , Enterobacter spp. И Escherichia coli приходилось 5,8%, 5% и 5% изолятов соответственно.

Другие состояния, связанные с Klebsiella spp. BSI в детстве включает недоношенность, предшествующее воздействие антибиотиков, предшествующий ротавирусный гастроэнтерит, процедуру Касаи при атрезии желчных путей, злокачественные новообразования, послеоперационный статус, ожоги, множественные травмы, синдром приобретенного иммунодефицита, гранулоцитарные нарушения, гомозиготную серповидно-клеточную анемию, трансплантацию твердых органов, послеоперационный период после спленэктомии, системной красной волчанки и дефицита β1 цепи рецептора интерлейкина-12. 19,35–41 Загрязненные растворы для внутривенного введения также были идентифицированы как источник Klebsiella spp. BSI. 42

Общий уровень смертности для Klebsiella spp. BSI составляет примерно 11%, а уровень смертности от BSI, связанного со здравоохранением, составляет 14,5%. 19,35 Повышенный уровень смертности в значительной степени связан с острым лейкозом, нейтропенией, инфекциями, связанными со здоровьем (HAI), и предшествующей терапией кортикостероидами.

Цитотоксин-продуцирующие штаммы K.oxytoca были причастны к антибиотико-ассоциированному геморрагическому колиту. 14,43,44 Клиническим проявлениям боли в животе и кровавой диареи обычно предшествует лечение антибиотиками с β-лактамным агентом. Колит обычно сегментарный и локализуется преимущественно в правой ободочной кишке. Прекращение приема противомикробного агента и поддерживающая терапия обычно приводят к клиническому разрешению. Энтеротоксигенные и энтероагрегантные штаммы K. pneumoniae также были вовлечены в качестве причин детского гастроэнтерита. 45

Raoultella spp. о них непостоянно сообщалось как о колонизирующих бактериях желудочно-кишечного тракта госпитализированных новорожденных и как возбудителях ИБС и пневмонии у взрослых. 46,47 R. planticola был выделен из мочи взрослых; раны, включая внутрибрюшной абсцесс, связанный с панкреатитом; и зараженные смеси для младенцев. 48–50 R. ornithinolytica был выделен из крови новорожденного с висцеральной гетеротаксией, функциональной аспленией и сложным врожденным пороком сердца, у которого была НЭК; от одного взрослого с гигантской кистой почек; а от другого — с синдромом, похожим на кишечную лихорадку. 51–53

R. ornithinolytica и R. planticola , по-видимому, вызывают отравление скомброидных (гистаминовых) рыб. 8 Это состояние возникает после приема внутрь неправильно хранимой (> 20 ° C) скумброидной рыбы (например, тунца, махи-махи, скумбрии, скумбрии, сардины) и возникает в результате расщепления высоких концентраций гистидина на гистамин под действием бактериальных гистидиндекарбоксилаза.

alexxlab

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.