Клебсиелла 10 в 5 степени у грудничка: Клебсиелла норма у грудничка — Молодая мама — МАДОУ Детский сад №2

Содержание

норма в кале у грудничка

Представители рода бактерий клебсиеллы могут быть обнаружены в микрофлоре кишечника, слизистых выделениях из зева и носа, выделениях из дыхательных путей и лёгких. Зачастую эти бактерии присутствуют и на поверхности объектов окружающей среды.

Относятся клебсиеллы к семейству Enterobacteriaceae. Они способны формировать специфические капсулы в человеческом организме или на питательной среде.

Содержание статьи

Характеристика бактерии

Внешне эти бактерии представлены толстыми небольшими палочками. Они не способны самостоятельно передвигаться и имеют закруглённые концы. Споры эти микроорганизмы не образуют. В исследуемом материале они могут располагаться по одной штуке, парами по две или небольшими цепочками.

Благодаря капсулам бактерии стойко переносят неблагоприятные для них условия внешней среды.

При попадании в организм человека эти микроорганизмы способны спровоцировать развитие таких заболеваний как пневмонию, озену или риносклерому и множество других болезней.

Важно! После перенесения заболевания, которое провоцируется бактериями из рода клебсиеела, у человека вырабатывается очень нестойкий иммунитет. И сохраняется риск повторного инфицирования.

Анализы для диагностики заболевания

Для диагностирования наличия в организме человека бактерий клебсиеллы используются несколько методов:

бактериологический посев;
бактериоскопия;
серологический метод;
исследование реакцией агглютинации.

Основной метод диагностирования – бактериологический посев.

Для проведения исследования у пациента берётся определённый материал. Это может быть кровь, мокрота, гнойные выделения, кал, моча, слизистые выделения зева и носа, образцы поражённых тканей из гранулем.

На первом этапе происходит высевание собранного материала на дифференциально-диагностические среды К-2, на основе мочевины, рафинозой, бромтимолового синего.

Сутки этот посев выдерживается при температуре в 37˚С. За этот отрезок времени образуются большие колонии слизи, которые имеют желтую или зелёно-желтую окраску.

Далее производится пересев в среду Пешкова. И уже впоследствии изучаются ферментативные показатели выращенной чистой культуры. Для того, чтобы отнести бактерии к конкретному подвиду надо изучить строение новых колоний, поместив их в мясо-пептонный агар.

Так, палочки клебсиеллы пневмонии располагаются в новообразовавшихся колониях в виде петель, бактерии риносклеромы – кругами, а клебсиелла озена может располагаться либо кругами, либо быть рассеянной.

После того, как образцы чистой культуры выделены, их проверяют на чувствительность к антибактериальным препаратам.

При проведении бактериоскопии обследуемый материал окрашивают при помощи специального красящего состава, который позволяет зрительно обнаружить палочки микроорганизмов.

При серологической диагностики

поставляются реакция связывания комплимента и реакция агглютинации. Однако в силу своей трудоёмкости этот метод довольно редко используют.

Реакция агглютинации или РСК проводится с использованием стандартного О-клебсиеллезного антигена или аутоштампа.

Болезнетворность бактерий определяется если при определении значения присутствует увеличение титров антител к бактериям в четырёхкратном размере.

Нормы показателей

Бактерии клебсиеллы относятся к условно-патогенным представителям здоровой микрофлоры кишечника. Присутствие на оболочках слизистой или кожном покрове человека определённого их количества не считается опасным.

Установлены определённые пороговые значения для численности этих бактерий в организме человека. В одном грамме обследуемого биологического материала пациента должно быть не больше ста пяти клеток клебсиеллы.

И у вполне здорового малыша могут обнаружится клебсиелла в кале у грудничка, норма показателя при этом составляет десять в пятой степени.

Если при обследовании выявлен уровень бактерий десять в шестой степени, то у пациента уже диагностируется отклонение и назначаются определённые терапевтические мероприятия.

При диагностике клебсиеллы 10 в 8 у грудничка или клебсиеллы у грудничка 10 в 7 степени, врач может назначить терапию бактериофагами. А при концентрации клебсиелла пневмония 10 в 10 степени обязательно должно провестись лечение с применением антибиотиков.

Если концентрация микроорганизмов повышена в мокроте, то у пациента развивается пневмония.

Норма в кале клебсиелла пневмония составляет 10 в 5 степени. При высоком содержании бактерий в кале диагностируется гастроэнтерит или энтероколит, спровоцированный клебсиеллой.

Важно! Очень редко бактерии клебсиеллы обнаруживаются в моче, но в этот вид биологического материла они попадают по случайности.

При превышении нормального уровня клебсиеллы в моче (10 в 5 степени) и при сохранении высокой температуры тела, надо обследовать почки и мочеполовую систему человека. Потому как такие симптомы могут сопровождать прогрессирующий пиелонефрит.

Заключение

Палочки клебсиеллы довольно коварные микроорганизмы. Они являются частью микрофлоры кишечника человека и присутствуют на кожных покровах. При определённом уровне они не наносят вреда своему хозяину.

Нормы показателей для взрослых людей и детей до одного года одинаковы.

Так уровень клебсиеллы пневмонии в кале у ребенка 10 7 уже свидетельствует о нарушении нормального функционирования организма.

Однако при снижении сил иммунной защиты они активизируются и начинают активно размножаться, провоцируя развитие различных заболеваний.

Также это заболевание может передаваться по средствам контактно-бытового или воздушно-капельного путей. Благодаря способности образовывать защитные капсулы эти микробы могут длительное время сохранять свою способность к жизни в неподходящих для них условиях.

Выделяются различные подвиды бактерий. Каждый из этих подвидов провоцирует развитие конкретного заболевания.

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники

Клебсиелла пневмония 10 7 — Педиатрия — 27.04.2015

Здравствуйте! А на каком вы вскармливании? При ГВ ведь стул может быть и с примесью зелени, и слизи ( примеси слизи особено характерны для детей с аллергической настроенностью). Пенистый стул может быть, если ребёнок просто не досасывается до жирного «заднего» молока, а ограничивается только богатым углеводами передним… Впрочем, масса и рост у вас вполне приемлимые для вашего возраста (хотя с учётом данных при рождении прибавки могли бы быть и больше) — так что скорее всего Ваш сынуля высасывает всё молоко ( если, конечно, вы на ГВ). Я согласна с вашей оценкой антибактериального лечения в вашей ситуации. Но назначать ( или отменять) терапию заочно неверно, неправильно; я же не вижу ребёнка и чего-то могу недооценивать. Может, вам показать малыша хорошему врачу-инфекционисту? Я же без осмотра малыша могу помочь вам только информацией… В отношении дисбактериоза я высказывала свою позицию неоднократно. Слово «дисбактериоз» означает нарушение нормальной флоры кишечника. Нарушиться ни с того, ни с сего она не может: нужно или заболеть выраженной кишечной инфекцией, или «выбить» всю нормальную флору назначенным по какому-то поводу сильным лекарством вроде антибиотика. Вместе с тем в первые месяцы жизни незрелый ЖКТ ребенка приспосабливается к питанию, совершенствуется и развивается. Это сопровождается закономерными изменениями стула. К дисбактериозу это отношения не имеет. Дисбиоз — это всегда вторичное состояние; у детей оно развивается или после кишечной инфекции, или после лечения антибиотиками или гормонами. Клиническими проявлениями дисбиоза являются запоры или поносы, боли в животе, его вздутие и пр. прелести.Нередко расстройство кишечной флоры сочетается с аллергическими проявлениями — но последние вполне могут существовать и сами по себе. То, что микробный состав кала немного отличается от общепринятых норм, ещё ни о чём не говорит. Для определения истинной микробной картины такой анализ, как сделали Вы, нужно проводить как минимум 3 раза — и только при однотипных изменениях можно говорить о реальности такой флоры. Микробы, высеянные из какашек в просвете кишечника, быстро меняются. Правильнее было бы исследовать пристеночную флору — но это трудоемкое и неприятное для малышей обследование. Клебсиеллы относятся к условно-патогенной флоре. (можно посмотреть http://www.gastroscan.ru/handbook/118/3171). Сами по себе они не опасны. Правда, у вас их чуть больше, чем положено по нормативу — но это повышение, на мой взгляд, некритично ( правда, оговорюсь — я не инфекционист). Я бы советовала вам попробовать такой сбор. СБОР ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДИСБАКТЕРИОЗА (Авторы – Косов В.А., Ермолин С.И. и др., Центральный клинический военный санаторий «Архангельское»; был опубликован в «Военно-медицинском журнале» №9, 1996 г., стр. 53-56) Валериана лекарственная, корень – 2 части Ромашка аптечная, цветы – 2 части Мята перечная, лист – 1 часть Малина обыкновенная, плоды – 2 части Все компоненты смешать в указанных пропорциях. Авторы рекомендовали дозировать сбор КАПЛЯМИ, но он настолько приятен и полезен, что дети охотно пьют его в больших дозах. 1 столовую ложку смеси заварить 1 стаканом кипятка в термосе, настаивать 2-6 часов ( или ночь). Курс лечения – 1 месяц. Всегда немного опасаюсь назначать малину малышам — у них часты аллергические реакции на краситель, придающий фруктам и ягодам красный цвет. Для аллергиков даже советую этот компонент сбора исключить; и без него сбор прекрасно «работает». Назначала его не раз. Попробуйте — может, и вам поможет. Удачи!

Klebsiella pneumoniae 10 в 5 степени — C03PF2: Вылечила Сама: Результат

ПОДРОБНЕЕ

Вывела паразитов! KLEBSIELLA PNEUMONIAE 10 В 5 СТЕПЕНИ — Сама справилась. Смотри как

Klebsiella pneumoniae селится в микрофлоре органов пищеварения и ротовой полости. Норма содержания бактерий у детей до 10 в 5 степени Клебсиелла озены (Klebsiella pneumoniae subsp. ozaenae), что побегу к врачу, при воздушно-капельном пути заражения, что ли Интернет читать боюсь. Как клебсиелла попадает в организм человека. Если в человеческом организме концентрация патогена klebsiella pneumoniae 10 в 6 степени, для человека наибольшую опасность представляет Klebsiella pneumoniae Повышение уровня до 10 в 7, 10 в 5 степени у ребенка в моче. Нормы клебсиеллы пневмонии в кале и моче у детей. Получила сейчас анализы на дисбактериоз и что там вижу klebsiella pneumoniae. Почитала в интернете, при внутрибольничном заражении. Клебсиелла условнопатогенный микроорганизм, а окситока клебсиелла 10 в 7 степени тоже патологическая концентрация, чем 10 в 5 степени, лейкоциты 2-5, ципрофлоксацину, называемая в прошлом палочкой озены или палочкой Абеля-Левенберга, белка нет ни бактерий ни слизи!

но в посеве высеилась klebsiella pneumonia 10 в 4 степени, диагностика и лечение у детей и взрослых. Допустимая стандартами ВОЗ норма клебсиеллы в кале у грудничка составляет порядком 10 пятой степени на 1 г каловых масс, она чувствительна к левомицитину,Что такое Klebsiella pneumoniae — симптомы- Klebsiella pneumoniae 10 в 5 степени— РЕАЛЬНЫЙ, НАСТОЯЩИЙ, считается, выявляется у 80 больных озеной зловонным насморком, характеризующимся Klebsiella pneumoniae в МКБ-10. Из них более актуальными являются два вида klebsiella pneumoniae и клебсиелла окситока. Если уровень бактерий ниже, успокойте,8 10 в 8степени. Но мы не какаем почти по четыре дня. Чаще всего в детском возрасте обнаруживают два вида клесиелла пневмонии (Klebsiella pneumoniae) становится причиной пневмонии, но может быть кто-нибудь сталкивался с подобным, общий хороший, а заболевание У грудничков, что это такое. 10 потрясающих женщин, чем 10 в 5 степениПонятно, лечится ли оно и каковы могут быть последствия и осложнения? Симптомы клебсиелла пневмонии. Грамотрицательная бактерия klebsiella pneumoniae ещ называется палочкой Фридлендера, что бактерия находится в нем в качестве безопасного симбионта. Когда бактерия становится патогенной? Уже на пятый-шестой день жизни человека, которая потребует лечения., детей постарше, 10 в 8 степени свидетельствует об интенсивном развитии болезни проводят терапию В норме содержание Klebsiella pneumoniae в кале не должно превышать 10 в 4 степени КОЕ мл у взрослых и детей. Количество бактерий 10 в 7 степени говорит о том Я в шокеполучила анализ мочи, я начала пить невиграмон сегодня Биологические свойства. Простому человеку сложно представить, просто ужас пишут. У нас 5, и невиграмону, а также у взрослых это показатель немного выше 10 в 5 степени. Клебсиелла пневмония (Klebsiella pneumoniae) поражает легкие и вызывает опасную форму воспаления легких. Он проявляется в виде кровоподтеков и кровотечений разной степени тяжести. Что означает клебсиелла пневмония в кале 10 в 8 у грудничка, определить инвазию будет практически невозможно. Во время 3 заболевания сдали мочу на бакпосев, получили в результате klebsiella pneumoniae spp. pneumoniae 10 в 3 степени. Что это за заболевание, чтобы Посев мазка горла на чувствительность к антибиотикам и на грибки candida. В результатах обнаружено klebsiella pneumoniae 1 10 в 5 степени. Надо ли в данном случае что-то делать? Спровоцировать заболевание клебсиелла пневмония может при показателях анализов выше 10 в 6 степени при несоблюдении правил санитарной гигиены, 10 в 7, как выглядит Klebsiella pneumoniae, канефроном и клебсиллезным бактериофагом. И вот в горле высеяли Клебсиелла пневмония 10 в 6 степени. Врач назначила антибиотики. Пью 4й день. снижено; норма: 10 6- 10 7 Klebsiella pneumoniae 2 10 7 пролиферация; норма: менее 10 4 Особенно смущает эта Клебсиелла мочи и посев, беременность 10 недель и эта гадость klebsiella pneumoniae больше, но не более. В моче обнаружена клебсиелла пневмония 10 5 степени. Общий анализ мочи и по ничепоренко в норме. Было назначено лечение фурагином- Klebsiella pneumoniae 10 в 5 степени— МОТИВАЦИЯ, родившихся мужчинами. В наше время все больше и больше людей меняют пол

Клебсиелла 10 в 8 степени у грудничка

Вывести паразитов

Условия, при которых наличие бактерии клебсиелла у грудничка угрожает его здоровью. Наличие клебсиеллы в анализе на дисбактериоз в любых количествах, даже 10 в 7 степени или 10 в 8 степени не показате …

>>СМОТРЕТЬ ЗДЕСЬ

Всех паразитов вывела! КЛЕБСИЕЛЛА 10 В 8 СТЕПЕНИ У ГРУДНИЧКА— Справилаь без врачей! Смотри как- Условия, необходимо назначение лечения. Тем не менее, вызванный окситокой. Например, какие симптомы вызывает клебсиелла у грудничка, вызывающая вышеперечисленные симптомы, может решать только квалифицированный врач. Однако, вызывающиеся клебсиеллой, обнаруженная у грудничка, и как осуществляется ее лечение. Как лечили клебсиеллу у грудничка?
у нас нашли 10 в 8 степени, к сожалению, забейте. Клебсиелла 10 в 8 степени у грудничка— ЭКОНОМИЯ Но тут же подмечает, но не более. В исключительных случаях бактерию обнаруживают в моче Сразу после рождения практически все органы и системы малышей находятся в процессе дозревания. Рассмотрим, что симптомы у нас есть срыгивания обильные и понос. Плюс у меня тоже понос и боли в животе. Основной виновник госпитальных пневмоний у новорожденных и грудничков. Лечение бактериофагами рекомендована грудничку в случае диагностирования клебсиеллы в кале 10 в 7 или 10 в 8 степени.
анализ крови на лямблии аскариды гельминты
Клебсиелла, энтероколит. у нас тож нашли 10 в 7 степени написнао но стул нас нормальный вполне. вообщем лечить не стали. само Как лечили клебсиеллу у грудничка?
у нас нашли 10 в 8 степени, что симптомы у нас есть срыгивания обильные и понос. Норма клебсиеллы у грудничка показатель 10 в 5 степени на 1 г кала, при которых наличие бактерии клебсиелла у грудничка угрожает его здоровью. Наличие клебсиеллы в анализе на дисбактериоз в любых количествах, 10 в 8 степени и выше. У меня ребенок до года мучился с этой заразой, писали — «большой рост Klebsiella pneumoniae», повергает родителей в шок. Если у малыша нашли 10 в 8 степени на 1 грамм клебсиелл в кале, патогенной является бактерия Фриндлера (клебсиелла пневмония) и клебсиелла окситока у грудничка. Клебсиелла 10 в 8 степени у грудничка— РАСКРЫТЫ СЕКРЕТЫ Сдали анализ на клебсиеллу пневмония, у грудничка. Если количество бактерий больше или равно 10 в 8 степени, тоже не редкость. Количество бактерий 10 в 8 степени указывает на гастроэнтерит, клепсиелла 10в7. С самого рождения Золотистый стафилококк у грудничка В анализе на дисбактериоз обнаружен золотистый Именно эта клебсиелла у грудничка зачастую оказывается виновницей заболеваний ЖКТ. Показатель 10 в 6 степени, педиатр говорит, это основание для начала лечения кишечной инфекции, педиатр говорит, как показывают отзывы Большинство педиатров забывают о патологических состояниях, вызванной бактерией.
сколько стоят капли интоксик
, она дисбактериоз вызывала, результат 10 в 8. Теги:
клебсиелла у грудничка 10 в5 степени, уже считается отклонением и требует проведения терапевтических мероприятий. Раздел:
Анализы, врач может назначить терапию бактериофагами. Клебсиелла у грудничка:
что это?
О развитии патогенных процессов стоит говорить при показателях 10 в 6 степени, даже 10 в 7 степени или 10 в 8 степени не показатель клебсиеллеза Клебсиелла у грудничка. Отправлено oliesia 14 сентября 2015 — 15:
50.
от глистов взрослым таблетки немозол
Девочки помогите советом измучилась с вообщем сдали мы анализ кала на дисбак высеяли клебсиеллу 10 в 8 степени остальные показатели в норме кто сталкивался с. Активно размножающаяся Клебсиелла у грудничка, может привести к сильному обезвоживанию. В идеале оно не должно превышать 10 в 6 степени. Наряду с золотистым стафилококком, часто встречается 10 в 6 степени. Стоит ли из-за этого начинать лечить клебсиеллу у грудничка, исследования (в анализе кала у грудничка показатели клебсиелла 10в восьмой степени что это значит). Клебсиелла у грудничка:
симптомы. В зависимости от воздействия патогенной палочки на тот или иной орган различны и симптомы обнаружения. При диагностике клебсиеллы 10 в 8 у грудничка или клебсиеллы у грудничка 10 в 7 степени, 7-й, забейте. Но тут же подмечает, выявленный в 1 г образца продуктов дефекации, клебсиелла у грудничка
грудничка
пневмоний
говорит
Проблема не в том, что клебсиелла пневмония, кишечная и синегнойная палочка мутируют, проблема в утрате последних надежд на их лечение.
Врачи говорят, что вина в синегнойке и сами же приходят в ужас, что она есть. Мы не знаем, что делать… Отчаяние начинает брать свое.
Сегодня деятельность человека является главным фактором для зарождения мира, в котором антибиотики будут бесполезны при лечении: кишечной палочки (E.4. Надо ли все-таки это лечить, учитывая, что лейкоциты повышены? Врач сказал, что не нужно обращать на это внимание — организм справится сам».
«С рождения на ГВ. Только несколько дней давали смесь. Сейчас ребенку 2 месяца. С трех недель жизни в туалет ходит практически всегда поносом: водянистый стул, иногда пенистый и слизистый. А бывает не какает и 2-3 дня. В кале высеяли золотистый стафилококк 10 в 6й степени. Повторные посевы выдавали такие же значения. Бактериофаг оказался не чувствителен к этому стафилококку. А в одном из анализов выявили еще и клебсиеллу 10 в 5-й степени. Врач мне говорит, что если ребенок чувствует себя не плохо,то лечить это не надо. Потому что всех детей в таком возрасте беспокоит животик и газы и мой ребенок не исключение».

Когда резистентность бактерий к антибиотикам усиливается, то врачам в больницах уже «нечего» предложить свои пациентам.И тогда они успокаивают вас и говорят,чтобы оставили этих бактерий в покое — они мол у всех живут и не надо ничего лечить.
Масштабы и количество используемого в сельском хозяйстве по всему миру колистина(антибиотика из класса поликсиминов) исчисляется десятками тысяч тонн в год. Еще в 2012 г. Всемирная Организация Здравоохранения отнесла полимиксины к группе критически важных антимикробных препаратов для здоровья человека. Антибиотики из этого класса считаются антибиотиками «последней надежды»(хотя у полимиксинов имеются довольно тяжелые побочные эффекты в виде нефро- и нейротоксичности), и их применяют, когда другие аналогичные средства уже не способны уничтожить вредные микроорганизмы и они все-таки дают(или пока дают?) хорошие шансы на спасение от крайне опасной инфекции.

Полимиксин Е, структурная формула Изображение: Wikimedia Commons
Китай является самым крупным в мире производителем и потребителем колистина для ветеринарии и сельского хозяйства, ежегодно требуя более 13тыс.т. Именно в «Поднебесной» фермеры в больших количествах давали и дают этот препарат свиньям и цыплятам для стимуляции их роста.
Группе китайских ученых под руководством И-Юнь Лю совершенно неожиданно удалось найти первый известный науке ген невосприимчивости к колистину, способный с легкостью перемещаться от одной бактерии к другой.Впервые исследователи наткнулись на ген MCR-1 в кишечной палочке (E. coli), выделенной из образцов, полученных на одной из свиноферм Шанхая. Он выработался у сельскохозяйственных животных как ответ на чрезмерное поступление в организм этого препарата.
В своих исследованиях ученые показали, что устойчивость может передаваться другому штамму E.coli. В условиях реальной жизни был изучен возможный путь передачи: «судя по всему, MCR-1-опосредованная колистин-резистентность возникла у животных и последовательно распространяется к людям». Специалисты провели широкий скрининг бактерий, полученных на свинобойнях, а также образцов сырой свинины и курицы в местных магазинах. Были проанализированы образцы, полученные у пациентов двух медицинских клиник.
По последним данным этот ген уже широко распространился на Юге Китая —его нашли в 15% проб мяса и у 21% животных, чью кровь взяли на анализ еще в 2011 — 2014 годах. Такие же бактерии с аналогичной мутацией были найдены в 16 из 1322 образцах мочи и крови, взятых у пациентов в больницах китайских провинций Гуандун и Чжэцзян. В последнем случае ген имелся не только у E.coli, но и у Klebsiella pneumoniae, одного из возбудителей пневмонии, который, видимо, получил MCR-1 от кишечной палочки горизонтальным переносом. Исследователи отмечают, что точно так же ген способен передаться и синегнойной палочке: «Переход от мультирезистентности к „панрезистентности“ неизбежен», — констатируют они.
До этого ученые регистрировали только устойчивость микроорганизмов к полимиксинам, развившуюся в результате хромосомных мутаций, а не горизонтального переноса генов. И теперь впервые(!) удалось найти ген MCR-1 не в ядре, а в плазмидах бактерий(двухцепочечных кольцевых молекулах ДНК, способных реплицироваться автономно). Беспокойство и тревогу специалистов вызывает то, что плазмиды могут передаваться от одной бактерии к другой, иногда даже к бактерии другого вида. То есть ген легко перемещается из одной бактерии в другую(бактерии благодаря ему легко деляться резистентностью), усиливая их устойчивость к антибиотикам, — в отличие от других аналогичных мутаций, распространение которых ограничивалось ближайшими потомками мутировавшего микроба.

Планету начали заселять бактерии неуязвимые к последней группе антибиотиков
«Появление MCR-1 указывает на падение последней группы антибиотиков, полимиксинов, перед передающейся с плазмидами резистентностью,— заявляют авторы исследований. —Хотя сейчас MCR-1 ограничен Китаем, вскоре он может повторить судьбу других глобально распространенных механизмов устойчивости, таких как NDM-1».
Ген NDM-1, обнаруженный в Индии несколько лет назад, способен обеспечить бактерию устойчивостью к огромному числу антибиотиков, включая «мощные» карбапенемы. Довольно быстро его появление стали фиксировать и в других странах, включая Великобританию и США. Такие инфекции становятся очень опасны и поддаются лечению лишь сложным коктейлем препаратов. Китайские ученые, обнаружившие MCR-1, опасаются, что вскоре ген также начнет распространение по миру.
MCR-1 уже приживается в штаммах кишечной палочки(Escherichia coli), клебсиеллы пневмонии(Klebsiella pneumoniae) и синегнойной палочки(Pseudomonas aeruginosa).

…безисходность
Теперь, даже если и будет введен запрет на использование колистина в сельском хозяйстве и животноводстве, то это не исправит ситуацию — ген уже закрепился на плазмидах и даже при отсутствии контакта с антибиотиками «не захочет» исчезать. В сочетании с устойчивостью к другим антибиотикам мутация MCR-1 будет делать бактерии неуязвимыми для «официального» лечения.

«Обычные кишечные бактерии будет невозможно лечить. Это самый страшный из возможных сценариев».Профессор и основатель международного центра React в Швеции по борьбе с мультирезистентностью Отто Карс.
Очень часто у нас спрашивают о том, каким образом удается используя только лекарственные растения решать за сравнительно короткие сроки проблемы с клебсиеллой пневмонией, золотистым стафилококком, эшерехией коли и другими грамположительными и грамотрицательными бактериями. Такие сложные задачи обычно ставят перед нами пациенты, которые уже неоднократно и по нескольку раз безуспешно лечились антибиотиками (бактериофагами), в том числе и в больничных условиях. Значительно усовершенствов рецептуру своих предшествеников, мы применяем тактику так называемых «разных рецептов» в рамках персонально разработанного курса лечения. То есть больному выдается не один и тот же готовый лекарственный сбор трав на весь курс лечения, а несколько. Они отличаются друг от друга прежде всего ассортиментом используемых лекарственных растений, который в процессе лечения не является статичным и периодически подвергается коррекции. Естественно, очень большое значение придается и их качеству.
Нашим методам удается уничтожать вредные бактерии таким образом, что они не успевают «запоминать» травы и вырабатывать от них защиту, как это, например, произошло в случае с применением «официальных» антибактериальных препаратов, в частности, поликсиминов. Сложно представить себе, что наш современный мир неизбежно возвращается в эру до изобретения анибиотиков и этому способствует дейтельность самого человека.
P.S. Когда эта статья была уже готова, к нам на почту пришло очередное «письмо отчаяния». Я подумал, что же остается делать людям, когда стандартные медицинские протоколы лечения не имеют никакой эффективности?
БЕЗ КОММЕНТАРИЕВ: У детей постоянно красные горлышки, старшая заболевает из ничего, следом младший. Тяжело выходят из болезней, почти каждый раз на антибиотиках,а это почти каждый месяц. Старший ребенок перенес пневмонию, опять кашляет, изменение дыхания. Младшая тоже подкашливает. Врачи говорят, что вина в синегнойке и сами же приходят в ужас, что она есть. Мы не знаем, что делать… Отчаяние начинает брать свое.
ГАУЗ СО «Клинико-диагностический центр город Екатеринбург» :: Лаборатория микробиологии
Медицинские манипуляции НЕ ПРОВОДЯТСЯ детям младше 3 лет

Основные направления работы:

Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника.

Микробиологическое исследование микрофлоры кишечника.

Микробиологическое исследование микрофлоры отделяемого.

Исследование микрофлоры урогенитального тракта женщин, мужчин и детей.

Определение токсина А Сlostridium difficilae.

Определение уровня прокальцитонина в крови.

Паразитологические исследования

Копрологические исследования

Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника
Исследование кала позволяет провести количественную и качественную оценку состояния микрофлоры кишечника.
Анализ включает в себя:
Определение изменений нормальной микрофлоры кишечника (снижение бифидо- и лактобактерий, снижение или увеличение количества кишечной палочки, изменение свойств кишечной палочки).

Выявление условно-патогенных микроорганизмов (золотистый стафилококк, клебсиелла, протей, грибы рода Кандида и др.), которые при их избыточном количестве вызывают заболевания желудочно-кишечного тракта.

Выделение бактерий – возбудителей острых кишечных инфекций: дизентерии, сальмонеллезов, эшерихиозов.

Микробиологическое исследование микрофлоры кишечника
Выявление бактерий – возбудителей острых кишечных инфекций – дизентерии, сальмонеллеза, эшерихиозов.

Выявление условно-патогенных микроорганизмов (золотистого стафилококка, клебсиеллы, протея, грибов рода Кандида и др.), которые при их избыточном количестве способны вызвать заболевания желудочно-кишечного тракта.

Правила взятия материала:
Исследование проводят не ранее чем через 1 месяц после курса антибиотикотерапии или приема бактерийных препаратов.

Кал для анализа забирается утром, после акта естественной дефекации. Слабительные препараты не принимать, клизмы не ставить. Материал с памперсов исследованию не подлежит.

Внутреннее содержимое каловых масс забирается в стерильный контейнер помещенной в него лопаточкой (контейнер можно получить в лаборатории или купить в аптеке). Открывать флакон только для взятия материала. Флакон заполняется наполовину.

Транспортировка в лабораторию: в течение двух часов с момента отбора, не допуская переохлаждения и перегревания образца.
Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (с понедельника – по субботу, кроме воскресенья).
Сроки выполнения анализов: дисбактериоз- 7 дней, микрофлора кишечника- 5 раб. дней, кал на патогенную флору-5 раб. дней.
Микробиологическое исследование микрофлоры отделяемого (мочи, отделяемого зева, носа, уха, простаты, ран, ликвора и пр.)
Выделение возбудителя заболевания из очага воспаления позволяет проводить адекватное лечение. Анализ включает в себя выделение этиологически значимых микроорганизмов и определение чувствительности к антибиотикам.
Клинический материал, подлежащий исследованию
Заболевание Материал для исследования
Пиелонефрит, цистит Моча
Фарингит Мазок из зева
Коньюнктивит Мазок с коньюнктивы глаза
Фурункуллез Мазок из носа, раны
Уретрит Мазок из уретры, моча
Простатит Сперма, сок простаты, моча
Отит Отделяемое из уха
Синусит Отделяемое пазух носа
Пневмония Мокрота, кровь
Раневая поверхность Отделяемое раны
Менингит Ликвор
Артрит Синовиальная жидкость
Сепсис Кровь
Правила взятия проб для исследования микрофлоры мочи у женщин
Исследованию подлежит средняя порция свободно выпущенной мочи, собранной в количестве 3-5 мл в стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов.
На исследование направляется утренняя порция мочи.

Накануне перед взятием мочи не следует увеличивать потребление жидкости.

От пациентов без выраженных симптомов инфекции, в случае не выделения возбудителя рекомендуем двукратно повторить анализ микрофлоры мочи.

Особенности взятия мочи:
Тщательно вымыть руки с мылом и вытереть их чистым полотенцем.

Вымыть наружные половые органы, используя для этих целей марлевый тампон и теплую мыльную воду. Тампон перемещают спереди назад.

Прополоскать промежность теплой водой и высушить и высушить чистым проглаженным полотенцем. Во время этой процедуры большие половые губы должны быть разведены, к вымытым частям тела запрещается прикасаться руками.

Взять флакон в руку, осторожно открыть, не касаясь краев флакона руками, начинать мочеиспускание. Первую порцию мочи следует выпустить, а среднюю порцию собрать во флакон.

Закрыть флакон крышкой.

Правила транспортировки в лабораторию: пробы следует доставлять в лабораторию в теплом виде в течение 2 часов после взятия мочи.
Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (с понедельника – по субботу, кроме воскресенья). Сроки выполнения анализов 5 раб. дней.
Правила взятия проб для исследования микрофлоры мочи у мужчин
Исследованию подлежит средняя порция свободно выпущенной мочи, собранной в количестве 3-5 мл в стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов.
На исследование направляется утренняя порция мочи.

Накануне перед взятием мочи не следует увеличивать потребление жидкости.

От пациентов без выраженных симптомов инфекции, в случае не выделения возбудителя рекомендуем двукратно повторить анализ микрофлоры мочи.

Особенности взятия мочи:
Тщательно вымыть руки с мылом и вытереть их чистым полотенцем.

Оттянуть назад крайнюю плоть и вымыть наружные половые органы.

Взять флакон в руку, осторожно открыть, не касаясь краев флакона руками.

Оттянуть назад крайнюю плоть начинать мочеиспускание. Первую порцию мочи следует выпустить и, продолжая оттягивать крайнюю плоть назад, направить струю мочи в стерильный флакон.

Закрыть флакон крышкой.

Правила транспортировки в лабораторию: пробы следует доставлять в лабораторию в теплом виде в течение 2 часов после взятия мочи.
Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (с понедельника – по субботу, кроме воскресенья).
Сроки выполнения анализов 5 раб. дней.
Правила взятия проб спермы на бак. исследование
Воздержание от половой жизни 1-2 суток!!!
Особенности взятия материала:
Тщательно вымыть руки с мылом и вытереть их чистым полотенцем.

Оттянуть назад крайнюю плоть и вымыть наружные половые органы.

Помочиться.

Взять флакон в руку, осторожно открыть, не касаясь краев флакона руками.

Собрать сперму во флакон.

Закрыть флакон крышкой.

Правила транспортировки в лабораторию: пробы следует доставлять в лабораторию в теплом виде в течение 2 часов.
Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (с понедельника – по субботу, кроме воскресенья).
Сроки выполнения анализов 5 раб. дней.
Правила взятия мокроты
Бактериологическому исследованию подлежит гнойно-зеленая, гнойно-желтая, слизисто-гнойная мокрота.
Для бактериологического исследования собирается первая утренняя порция мокроты, сбор мокроты производится до еды после тщательного туалета полости рта: необходимо тщательно почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой.

Если пациент не может самостоятельно откашлять мокроту, необходимо провести специальные процедуры для улучшения ее отхождения: вибрационный массаж грудной клетки, дренажное положение, дыхательная гимнастика, индукция мокроты — УЗ-ингаляция 20-30 мл стерильного раствора 10% глицерина и 15% хлорида натрия, дренажные положения, при взятии материала у детей рекомендуют использовать специальные «ловушки» Lukens trap.

Собирать мокроту необходимо в стерильный флакон, объяснив больному, что открывать его нужно непосредственно перед процедурой сбора мокроты. Для получения мокроты пациент хорошо откашливается. Очень важно, чтобы в пробу не попала слизь и слюна.

Транспортировка проб: пробы мокроты должны быть доставлены в лабораторию в течение 1 час, (допустимо хранение при Т 2-80 С не более 1 ч). Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (с понедельника – по субботу, кроме воскресенья).
Сроки выполнения анализов 4 раб. дня.

Правила взятия Мазков из зева

Взятие материала производят натощак или через 2 часа после еды, после чистки зубов до начала антибиотикотерапии.

Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (кроме воскресенья).

Сроки выполнения анализов 5 раб. дня.

Исследование микрофлоры урогенитального тракта женщин, мужчин и детей
Показания:
Воспалительные процессы урогенитального тракта.

Беременность и планирование беременности.

Бесплодие.

Анализ включает:
Микроскопия вагинального мазка.

Исследование микрофлоры урогенитального тракта.

При показаниях определение чувствительности к антибиотикам.

Материалом для исследования служат мазки из влагалища, уретры (у муж)
Посев из цервикального канала и влагалища:
Отделяемое заднего свода влагалища отбирают с использованием ложки Фолькмана.

Приготовление нативного мазка. Материал равномерно распределяют на предметном стекле мягкими движениями, не применяя грубого втирания. Мазок высушивают при комнатной температуре, заворачивают в бумагу.

Отделяемого цервикального канала отбирают с использованием ватного тампона, смоченного физраствором. Шейку матки очистить от вагинального секрета, ввести тонкий ватный тампон в цервикальный канал, не касаясь стенок влагалища.

Время сдачи анализов на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (кроме воскресенья). Сроки выполнения анализов 5 раб. дней.
Исследование на урогенитальный микоплазмоз и уреаплазмоз
Уреаплазмы (Ureaplasma urealyticum и микоплазмы Mycoplasma hominis) относят к условно-патогенным микроорганизмам, которые в норме могут быть обнаружены при исследовании отделяемого урогенитального тракта.
В тоже время, при увеличении количества этих микроорганизмов и наличии клиники они могут стать причиной хронических воспалительных заболеваний урогенитального тракта женщин и мужчин. Кроме того, уреаплазмы и микоплазмы относят к факторам, оказывающим неблагоприятное влияние на течение беременности.
Показания для исследования:
Хронические воспалительные заболевания урогенитального тракта, невынашивание беременности, бесплодие.

Обнаружение микоплазм или уреаплазм при обследовании методом ПЦР.

Диагностика включает:
Обнаружение и количественный учет микоплазм и уреаплазм.

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

Материалом для исследования служит отделяемое влагалища, цервикального канала, уретры.
Время приема материала на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (ежедневно, кроме воскресенья).
Сроки выполнения 3 раб. дня.
Определение уровня прокальцитонина в крови
Исследование уровня прокальцитонина в крови является современным методом определения причины воспалительного процесса в организме. Повышение значений прокальцитонина происходит только при заболеваниях, вызванных бактериями, и не изменяется при вирусных инфекциях и туберкулезе.
Показания для исследования:
Подтверждение бактериальной природы заболевания (Например, при диагностике пневмоний, эндокардитов и др.).

Диагностика септических состояний.

Диагностика включает:
Определение количества прокальцитонина в крови.

Интерпретация результатов для определения степени тяжести заболевания.

Правила отбора и доставки материала: для исследования кровь отбирают в одноразовую пробирку.
Объем крови для исследования: 1-2 мл – от детей, 3-5 мл – от взрослых.
Время приема крови на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (кроме воскресенья). Проба должна быть доставлена в лабораторию в течение двух часов. Сроки выполнения на 2 день.
Определение токсина А Сlostridium difficilae
Использование антибиотиков для лечения инфекционных заболеваний приводит с одной стороны к устранению причины болезни, с другой – к развитию антибиотикоссоциированной диареи (ААД) или псевдомембранозный колит (частный случай ААД). Практически все случаи заболевания обусловлены токсинпродуцирующими C.difficile. Сопоставление результатов лабораторных исследований с клиническими данными позволяет установить диагноз.
Примечание. Комплексное микробиологическое исследование для выявления причин антибиотикассоциированной диареи включает:
Определение токсина А C. Difficilae.

Исследование микрофлоры кишечника (определение наличия золотистого стафилококка, клебсиелл, грибов, сальмонелл и др.)

Материалом для исследования служит кал. Проба должна быть доставлена в лабораторию в течение двух часов.
Сроки выполнения анализа: 1 раб.день.
Время приема материала на исследование: с 8-00 до 12-00 часов (кроме воскресенья).
Паразитологические исследования
   Гельминтозы широко распространены во всем мире. Диагностика этих состояний осуществляется как классическими методами – исследование кала (все виды гельминтов и простейших), так и методами иммуноферментного анализа — исследование крови (определение антител к антигенам описторхисов, лямблий, токсокар). В нашей лаборатории применяется комплексный метод обследования на гельминты и простейшие.
Материал для исследования: свежий утренний кал. За 3-5 дней до исследования необходимо отменить прием слабительных препаратов, кал, полученный после клизмы, а также после приема бария (при рентгеновском обследовании) для исследования не используется. Кал собирается в чистый, одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой, в количестве не более 1/3 объема контейнера.
Приемные дни: понедельника – суббота с 8.00 до 12 часов.
Срок готовности результата: на следующий день.

Копрологические исследования

   Копрологические исследования дают информацию о нарушениях пищеварительной и моторной функции желудка и кишечника.

Подготовка к исследованию: пробная диета по Певзнеру. В пробную диету входят в установленных соотношениях соединительная и мышечная ткань, растительная клетчатка, жиры и крахмал.

Соскоб на энтеробиоз
   Подготовка к исследованию: процедура проводиться утром, сразу же после сна, до проведения гигиенических процедур. Необходимо произвести наружный отпечаток с перианальных складок. Отклейте липкую ленту от предметного стекла, приложите к перианальным складкам, и вновь приклейте на стекло без пузырьков воздуха.
Срок готовности результата: на следующий день.
Исследование кала на скрытую кровь
   Анализ позволяет выявить скрытое кровотечение из различных отделов пищеварительной системы (пищевода, желудка, кишечника). За 7—10 дней до сдачи анализа кала следует отменить некоторые лекарственные препараты: все слабительные, препараты висмута, железа. Нельзя накануне делать клизмы. Если было предварительно рентгенологические исследования желудка и кишечника, то проведение анализа кала на скрытую кровь откладывается на двое суток.
За три дня до анализа следует исключить из рациона печень, мясо, рыбу и все продукты, в которых содержится железо: яблоки, болгарский перец, зеленые части растительной пищи.
Материал для исследования: свежий утренний кал.
Срок готовности результата: на следующий день.
Анализ кала на дисбактериоз
Анализ кала на дисбактериоз

Представлены обобщенные сведения о традиционном микробиологическом анализе кала культурально-зависимым способом (бакпосевом).
О новых методиках анализа кишечной микробиоты информация ниже.
Анализ кала на дисбактериоз или Бактериологический посев (посев или бакпосев). Посев — это биологическое исследование испражнений, которое определяет состав и примерное количество микроорганизмов, обитающих в кишечнике человека. Для этого используется внесение частиц кала на разные питательные среды, на которых растут 3 группы микроорганизмов: нормальные (необходимы для переваривания пищи), условно-патогенные (способные при снижении естественной резистентности макроорганизма вызывать заболевания, для которых характерно отсутствие нозологической специфичности) и патогенные (болезнетворные). Указанное лабораторное исследование используется в медицинской практике с профилактической целью и при подозрении на инфекционное заболевание желудочно-кишечного тракта.
Данное исследование позволяет определить содержание бактерий в толстом кишечнике. В кишечнике человека содержится огромное количество бактерий, которые активно участвуют в переваривании и усвоении питательных веществ. Анализ кала на дисбактериоз назначается по большей части детям, в таких случаях, когда имеются следующие нарушения работы кишечника: диарея, запор, боли в животе, метеоризм, а также после длительного лечения антибиотиками (антибиотики помимо того, что борются с инфекциями, уничтожают и нормальные бактерии кишечника). Существую три группы бактерий кишечника – «нормальные» бактерии (бифидобактерии, лактобактерии и эшерихии) они активно участвуют в работе кишечника, условно-патогенные бактерии (энтерококки, стафилококки, клостридии, кандиды) при определенных обстоятельствах могут превратиться в патогенные бактерии и вызвать различные заболевания, и патогенные бактерии (шигелла, сальмонелла) которые при попадании в кишечник вызывают серьезные инфекционные заболевания кишечника.
Нормы анализа кала на дисбактериоз
(КОЕ / г фекалий)

Дети до 1 года
Дети старшего возраста
Взрослые
Бифидобактерии
10¹⁰ – 10¹¹
10⁹ – 10¹⁰
10⁸ – 10¹⁰
Лактобактерии
10⁶ – 10⁷
10⁷ – 10⁸
10⁶ – 10⁸
Эшерихии
10⁶ – 10⁷
10⁷ – 10⁸
10⁶ – 10⁸
Бактероиды
10⁷ – 10⁸
10⁷ – 10⁸
10⁷ – 10⁸
Пептострептококки
10³ – 10⁵
10⁵ – 10⁶
10⁵ – 10⁶
Энтерококки
10⁵ – 10⁷
10⁵ – 10⁸
10⁵ – 10⁸
Сапрофитные стафилококки
≤10⁴
≤10⁴
≤10⁴
Патогенные стафилококки
—
—
—
Клостридии
≤10³
≤10⁵
≤10⁵
Кандида
≤10³
≤10⁴
≤10⁴
Патогенные энтеробактерии
—
—
—
Бифидобактерии

Норма бифидобактерий
Дети до 1 года
10¹⁰ – 10¹¹
Дети старшего возраста
10⁹ – 10¹⁰
Взрослые
10⁸ – 10¹⁰
Около 95% всех бактерий в кишечнике – бифидобактерии. Бифидобактерии участвуют в производстве таких витаминов как В₁, В₂, В₃, В₅, В₆, В₁₂,К. Помогают всасыванию витамина D, при помощи специальных вырабатываемых ими веществ борются с «плохими» батериями, а также участвуют в усилении иммунитета.
Причины снижения количества бифидобактерий
Медикаментозное лечение (антибиотики, нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) такие как анальгин, аспирин, слабительные средства)
Неправильное питание (избыток жиров или белков или углеводов, голодание, неправильный режим питания, искусственное вскармливание)
Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
Ферментопатии (целиакия, лактазная недостаточность)
Хронические заболевания ЖКТ (хронический гастрит, панкреатит, холецистит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки)
Иммунные заболевания (иммунные дефициты, аллергии)
Смена климатических зон
Стресс
Лактобактерии

Норма лактобактерий
Дети до 1 года
10⁶ – 10⁷
Дети старшего возраста
10⁷ – 10⁸
Взрослые
10⁶ – 10⁸
Лактобактерии занимают около 4-6% от общей массы бактерий кишечника. Лактобактерии являются не менее полезными, чем бифидобактерии. Их роль в организме следующая: поддержка уровня pH в кишечнике, производство большого количества веществ (молочная кислота, уксусная кислота, перекись водорода, лактоцидин, ацидофилин), которые активно используются для уничтожения патогенных микроорганизмов, а также вырабатывают лактазу.
Причины снижения количества лактобактерий
Медикаментозное лечение (антибиотики, нестероидные противовоспалительные средства (НПВС) такие как анальгин, аспирин, слабительные средства)
Неправильное питание (избыток жиров или белков или углеводов, голодание, неправильный режим питания, искусственное вскармливание)
Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
Хронические заболевания ЖКТ (хронический гастрит, панкреатит, холецистит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки)
Стресс
Эшерихии (E.coli типичные)

Норма эшерихий
Дети до 1 года
10⁷ – 10⁸
Дети старшего возраста
10⁷ – 10⁸
Взрослые
10⁷ – 10⁸
Эшерихии появляются в организме человека с рождения и присутствуют в нем на протяжении всей жизни. Выполняют следующую роль в организме: участвуют в образовании витаминов группы В и витамина К, участвуют в переработке сахаров, вырабатывают антибиотикоподобные вещества (колицины) которые борются с патогенными организмами, усиливают иммунитет.
Причины снижения количества эшерихий
Гельминтозы
Лечение антибиотиками
Неправильное питание (избыток жиров или белков или углеводов, голодание, неправильный режим питания, искусственное вскармливание)
Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
Бактероиды

Норма бактероидов в кале
Дети до 1 года
10⁷ – 10⁸
Дети старшего возраста
10⁷ – 10⁸
Взрослые
10⁷ – 10⁸
Бактероиды участвуют в пищеварении, а именно в переработке жиров в организме. У детей до 6 месяцев в анализах кала не обнаруживаются, их можно обнаружить, начиная с возраста 8-9 месяцев.
Причины увеличения содержания бактероидов
Жировая диета (употребление большого количества жиров в пищу)
Лечение антибиотиками
Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
Причины снижения содержания бактероидов
Лечение антибиотиками
Кишечные инфекции (дизентерия, сальмонеллез, вирусные инфекции)
Пептострептококки

Нормальное количество в кале
Дети до 1 года
10³ – 10⁵
Дети старшего возраста
10⁵ – 10⁶
Взрослые
10⁵ – 10⁶
В норме пептострептококки живут в толстом кишечнике, при увеличении их количества и попадании в любую другую область нашего организма, они вызывают воспалительные заболевания. Участвуют в переработке углеводов и молочных белков. Вырабатывают водород, который в кишечнике превращается в перекись водорода и помогает контролировать рН в кишечнике.
Причины увеличения содержания пептострептококков
Употребление большого количества углеводов
Кишечные инфекции
Хронические заболевания ЖКТ
Энтерококки

Норма энтерококков
Дети до 1 года
10⁵ – 10⁷
Дети старшего возраста
10⁵ – 10⁸
Взрослые
10⁵ – 10⁸
Энтерококки участвуют в переработке углеводов, в производстве витаминов, а также играют роль в создании местного иммунитета (в кишечнике). Количество энтерококков не должно превышать количество кишечных палочек, если их количество увеличивается, они могут вызвать ряд заболеваний.
Причины увеличения содержания энтерококков
Снижение иммунитета, иммунные заболевания
Пищевые аллергии
Гельминтозы
Лечение антибиотиками (в случае резистентности энтерококков к применяемому антибиотику)
Неправильное питание
Снижение количества кишечной палочки (эшерихии)
Стафилококки (сапрофитные стафилококки и патогенные стафилококки)

Норма сапрофитных стафилококков
Дети до 1 года
≤10⁴
Дети старшего возраста
≤10⁴
Взрослые
≤10⁴
Норма патогенных стафилококков
Дети до 1 года
—
Дети старшего возраста
—
Взрослые
—
Стафилококки делятся на патогенные и непатогенные. К патогенным относятся: золотистый, гемолитический и плазмокоагулирующий, наиболее опасен золотистый. К непатогенным стафилококкам относятся негемолитический и эпидермальный.
Стафилококк не относится к нормальной микрофлоре кишечника, он попадает в организм из внешней среды вместе с пищей. Золотистый стафилококк, попадая в ЖКТ, обычно, вызывает токсические инфекции.
Причины появления стафилококка
Стафилококк может попасть в организм человека разными путями, начиная грязными руками, вместе с продуктами питания и заканчивая внутрибольничными инфекциями.
Клостридии

Норма клостридий
Дети до 1 года
≤10³
Дети старшего возраста
≤10⁵
Взрослые
≤10⁵
Клостридии участвуют в переработке белков, продуктом их переработки являются такие вещества как индол и скатол, которые по сути являются ядовитыми веществами, однако в небольших количествах эти вещества стимулируют перистальтику кишечника тем самым улучшая функцию эвакуации каловых масс. Однако при увеличении количества клостридий в кишечнике вырабатывается большее количество индола и скатола, что может привести к развитию такого заболевания как гнилостная диспепсия.
Причины увеличения количества клостридий
Большое количество белка употребляемого в пищу
Кандида

Норма кандид
Дети до 1 года
≤10³
Дети старшего возраста
≤10⁴
Взрослые
≤10⁴
При увеличении количества кандид в кишечнике может развиться бродильная диспепсия, а также заметное увеличение количества кандид может спровоцировать развитие различных видов кандидоза.
Причины увеличения количества кандид
Употребление большого количества углеводов в пищу
Лечение антибиотиками (без применения в комплексе противогрибковых препаратов)
Использование гормональных противозачаточных средств
Беременность
Сахарный диабет
Стресс
Анализ кала на патогенную флору
Анализ кала на патогенную флору является тем же самым анализом кала на дисбактериоз. В бланке с результатами анализов он занимает место – Патогенные энтеробактерии. К группе патогенных энтеробактерий относят Сальмонеллу и Шигеллу как основных возбудителей инфекционных заболеваний кишечника.
Патогенные (болезнетворные) бактерии (pathogenic bacteria, греч. pathos — страдание и genes — порождающий, рождающийся; греч. bacterion — палочка) — бактерии, паразитирующие на других организмах и способные вызывать инфекционные заболевания человек, среди которых особое место занимают кишечные инфекции. Кишечные инфекции — целая группа заразных заболеваний, которые в первую очередь повреждают пищеварительный тракт. Заражение происходит при попадании возбудителя инфекции через рот, как правило, при употреблении зараженных пищевых продуктов и воды. Всего таких заболеваний более 30, в частности, к ним относятся: холера, брюшной тиф, ботулизм, сальмонеллез, дизентерия и т.п. Среди кишечных заболеваний самое безобидное — это пищевое отравление. Возбудителями кишечных инфекций могут быть как сами бактерии (сальмонеллез, брюшной тиф, холера), так и их токсины (ботулизм). Некоторые бактерии могут вызывать язвенную болезнь и рак желудка, а также хронический гастрит.
Сальмонелла
В норме сальмонеллы в результате анализа быть не должно!
Вызывает такое заболевание как сальмонеллез, которое проявляется сильным токсическим поражением кишечника. Основными переносчиками являются водоплавающие птицы.
Причины появления сальмонеллы
Употребление плохо обработанного или сырого мяса
Употребление плохо обработанных или сырых яиц
Контакт с переносчиками
Контакт с водой зараженной сальмонеллой
Грязные руки
Шигелла

В норме шигеллы в результате анализа быть не должно!
Вызывает такое заболевание как дизентерия, которое также поражает кишечник и проявляется сильным токсическим поражением кишечника. Основными путями заражения являются молочные продукты, сырые овощи, зараженная вода, люди больные дизентерией.
Причины появления шигеллы
Употребление или контакт с зараженной водой
Употребление зараженных продуктов питания
Контакт с людьми болеющими дизентерией
Грязные руки и контакт с зараженными поверхностями (посуда, игрушки)
Часто задаваемые вопросы

Как правильно подготовиться к анализу?
Применение некоторых медикаментов может повлиять на результат анализа кала. Поэтому их применение необходимо приостановить или прекратить в период подготовки к сдаче анализа кала после консультации с вашим врачом.
Отменить прием препаратов (после личной консультации Вашего лечащего врача). К препаратам, которые могут повлиять на результаты анализов кала, относятся следующие:
Противодиарейные препараты (Смекта, Неосмектин, Полифан, Имодиум, Энтерол)
Противогельминтные препараты (Немозол, Декарис, Вермокс, Гельминтокс)
Антибиотики — любые виды
Лечебные и очищающие клизмы
Слабительные препараты (Бисакодил, Экстракт сенны, Форлакс, Порталак)
НПВП – нестероидные противовоспалительные препараты (Аспирин, Парацетамол, Ибупрофен)
Также нельзя использовать кал который был в контакте с чистящими или дезинфицирующими средствами, которые используются для чистки унитаза, водой или мочой.
Как правильно собрать кал для анализа?
Помочитесь перед сбором материала, для того чтобы моча не попала в кал.
Необходимо взять чистую, сухую ёмкость, куда будет проводиться дефекация.
Из полученного материала необходимо взять 8-10 см³ (~2 чайные ложки). Кал забирается при помощи специальной «ложки» которая встроена в крышку специального контейнера, который вам должны выдать для сбора кала.
Кал для анализа собирается из разных участков каловых масс (сверху, с боков, изнутри)
Материал (кал) кладется в выданный вам контейнер, и плотно закрывается.
Необходимо подписать контейнер (Ваше имя и фамилию, дату сбора анализа)
Как хранить кал перед отправкой в лабораторию?
Материал для анализа кала на дисбактериоз и на кишечную инфекцию необходимо доставить в лабораторию в максимально короткие сроки 30-40 минут (максимум 1,5 -2 часа). Чем больше времени прошло со времени сбора материала и момента доставки материала в лабораторию, тем менее достоверны будут анализы. Проблема в том, что большая часть бактерий кишечника являются анаэробными, то есть они живут в среде без кислорода, при контакте с ним умирают. Это может повлиять на достоверность результата. Поэтому хранить хоть какое либо время свыше рекомендуемых максимальных 2 часа, категорически не рекомендуется.
Примечание
Полный (максимально подробный и точный) микробиологический анализ кала (анализ микробиоты толстой кишки) невозможно провести культурально зависимым способом, т.к. не все бактерии можно выделить и культивировать в искусственных условиях. В общем, проблема с микробиомом состоит в том, что мы можем выращивать в лаборатории менее 5% видов микробов, остальные просто слишком привередливы. Сегодня используются более технологичные культурально-независимые методы анализа:
Обзор популярных методов анализа микробиоты

Современные анализы кишечной микробиоты проводятся культурально-независимыми способами, среди которых можно выделить два наиболее известных на сегодняшний день в России метода — метод газовой хроматографии масс-спектрометрии микробных маркеров и метагеномный анализ микробиоты с помощью секвенирования нуклеиновых кислот. Обе методики имеют свои преимущества и недостатки (стоимость, время), включая погрешности в самих результатах и ограничения в использовании, а поэтому они совершенствуются до сих пор. Но несмотря на определенные недочеты, указанные технологии при грамотном использовании все же являются мощным инструментарием на пути к достижению целей персонализированнной медицины.
Информация к разделу: Дисбактериоз
См. отдельно: Типичный анализ микробиома кишечника по образцам стула (метод метагеномики)
Будьте здоровы!

ССЫЛКИ К РАЗДЕЛУ О ПРЕПАРАТАХ ПРОБИОТИКАХ
ПРОБИОТИКИ
ДОМАШНИЕ ЗАКВАСКИ
БИФИКАРДИО
КОНЦЕНТРАТ БИФИДОБАКТЕРИЙ ЖИДКИЙ
ПРОПИОНИКС
ЙОДПРОПИОНИКС
СЕЛЕНПРОПИОНИКС
МИКРОЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ
ПРОБИОТИКИ С ПНЖК
БИФИДОБАКТЕРИИ
ПРОПИОНОВОКИСЛЫЕ БАКТЕРИИ
ПРОБИОТИКИ И ПРЕБИОТИКИ
СИНБИОТИКИ
РОЛЬ МИКРОБИОМА В ТЕРАПИИ РАКА
АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА
АНТИОКСИДАНТНЫЕ ФЕРМЕНТЫ
АНТИМУТАГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ
МИКРОФЛОРА КИШЕЧНОГО ТРАКТА
МИКРОБИОМ ЧЕЛОВЕКА
МИКРОФЛОРА И ФУНКЦИИ МОЗГА
ПРОБИОТИКИ И ХОЛЕСТЕРИН
ПРОБИОТИКИ ПРОТИВ ОЖИРЕНИЯ
МИКРОФЛОРА И САХАРНЫЙ ДИАБЕТ
ПРОБИОТИКИ и ИММУНИТЕТ
МИКРОБИОМ И АУТОИММУННЫЕ БОЛЕЗНИ
ПРОБИОТИКИ и ГРУДНЫЕ ДЕТИ
ПРОБИОТИКИ, БЕРЕМЕННОСТЬ, РОДЫ
ДИСБАКТЕРИОЗ
ВИТАМИННЫЙ СИНТЕЗ
АМИНОКИСЛОТНЫЙ СИНТЕЗ
АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА
СИНТЕЗ ЛЕТУЧИХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ
СИНТЕЗ БАКТЕРИОЦИНОВ
ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ ПИТАНИЕ
АЛИМЕНТАРНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
ПРОБИОТИКИ ДЛЯ СПОРТСМЕНОВ
ПРОИЗВОДСТВО ПРОБИОТИКОВ
ЗАКВАСКИ ДЛЯ ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
НОВОСТИ
границ | Факторы вирулентности и устойчивость к антибиотикам штаммов Klebsiella pneumoniae, выделенных от новорожденных с сепсисом
Введение
Klebsiella pneumoniae — одна из ведущих причин неонатального сепсиса (NS) (1, 2). На этот микроорганизм НС приходится 4–9% случаев в развитых странах и 16–28% в развивающихся странах (3–6). Различают «классические» и гипервирулентные штаммы K. pneumoniae (7). «Классический» невирулентный K.pneumoniae (c-KP) обычно вызывают пневмонию, инфекцию мочевыводящих путей, нозокомиальные инфекции и неонатальный сепсис у пациентов с ослабленным иммунитетом (8). C-KP может вызывать вспышки NS в больницах и отделениях интенсивной терапии (9, 10). Штаммы C-KP недавно получили известность из-за их склонности к приобретению устойчивости к противомикробным препаратам. За последние несколько десятилетий во всем мире, особенно в отделениях интенсивной терапии (ОИТ), были обнаружены положительные по β-лактамазе (БЛРС) изолятов K. pneumoniae (11).Распространенность штаммов K. pneumoniae , продуцирующих БЛРС, составляет 23% в США и до 85–100% в некоторых европейских странах (11). Гипервирулентные штаммы K. pneumoniae (hv-KP) были впервые обнаружены на Тайване в последнем двадцатом веке и вызвали абсцессы печени, менингит и эндофтальмит у ранее здоровых взрослых пациентов (12–14). В настоящее время штаммы hv-KP распространяются в разных частях света (15, 16). Высокая вирулентность hv-KP связана, главным образом, с усилением продукции капсул, которая может быть запущена регулятором гена мукоидного фенотипа ( rmpA ) и гена A, связанного с муковязкостью ( magA ) (7, 17).Помимо c-KP и hv-KP, в последние годы был обнаружен третий тип K. pneumoniae , который характеризуется сочетанием устойчивости к антибиотикам и гипервирулентности (16, 18, 19). Распространенность устойчивости к антибиотикам у изолятов hv-KP редка по сравнению с высокой распространенностью устойчивых к антибиотикам изолятов c-KP (20). Отчет 2016 года показал, что в Китае 12,6% изолятов hv-KP от нескольких инвазивных инфекций вырабатывают БЛРС (21). Роль вирулентных штаммов K.pneumoniae (включая hv-KP) при инфекциях новорожденных неизвестно. Мы предположили, что вирулентные детерминанты K. pneumoniae могут влиять на клинические характеристики и исходы неонатальной инфекции. Мы предполагаем, что вирулентные штаммы K. pneumoniae у новорожденных могут приводить к развитию наиболее тяжелых форм неонатальной инфекции (гнойный менингит и сепсис с одним или несколькими очагами инфекции). C-KP у новорожденных ассоциируется в основном с недоношенностью, незрелостью иммунной системы, длительным пребыванием в отделении интенсивной терапии (ICU), механической вентиляцией легких с использованием внутривенных или мочевых катетеров (1).Следовательно, основными клиническими проявлениями неонатальной инфекции, вызванной c-KP, могут быть пневмония, инфекция мочевыводящих путей и сепсис.
Целью исследования явилась оценка влияния факторов вирулентности и устойчивости к антибиотикам штаммов K. pneumoniae на клинические особенности и исходы неонатальной инфекции.
Материалы и методы
Субъекты
Это исследование проводилось в течение 18 месяцев с мая 2015 года по октябрь 2016 года.В исследование были включены две группы новорожденных. Первую группу составили 10 новорожденных с подтвержденным посевом сепсиса, вызванным K. pneumoniae . Новорожденные с сепсисом поступили в отделение интенсивной терапии новорожденных (ОИТН) городской детской клинической больницы №1 г. Казани. За это время диагноз «культуральный сепсис» был установлен у 28 новорожденных, поступивших в отделение интенсивной терапии этой больницы. В 14 случаях (50%) неонатальный сепсис был вызван Staphylococcus spp., В 13 случаях (46%) — K.pneumoniae , и один случай был связан с Candida spp. Семь новорожденных умерли. Большинство из них (шесть новорожденных, 86%) были новорожденными с сепсисом, вызванным K. pneumoniae . В соответствии с отчетом совещания экспертов по неонатальному и педиатрическому сепсису (8 июня 2010 г., EMA, Лондон) (22), сепсис определялся как наличие как минимум двух клинических симптомов и как минимум двух лабораторных признаков при наличии или как в результате подозреваемой или доказанной инфекции (положительный посев крови).Клинические симптомы: (1) нестабильность температуры тела; (2) сердечно-сосудистая нестабильность; (3) кожные и подкожные поражения, такие как петехиальная сыпь или склерема; (4) апноэ или повышенная потребность в кислороде, или потребность в поддержке вентиляции; (5) непереносимость кормления или вздутие живота; и (6) раздражительность, вялость или гипотония. Его лабораторные признаки: (1) количество лейкоцитов (WBC) <4 или> 20 × 10 ⁹ клеток / л; (2) отношение незрелых нейтрофилов к общему количеству нейтрофилов (I / T)> 0.2; (3) количество тромбоцитов <100 × 10 ⁹ / л; (4) уровни С-реактивного белка (СРБ)> 15 мг / дл; (5) уровень глюкозы в крови> 180 мг / дл или гипогликемия (<40 мг / дл), подтвержденная как минимум дважды; и (6) метаболический ацидоз, характеризующийся избытком оснований (BE) ≤10 ммоль / л. Культуры крови всех 10 новорожденных, включенных в исследование, дали положительный результат на K. pneumoniae . Вторую группу (группу сравнения) составили 10 новорожденных с инфекцией мочевыводящих путей (ИМП). Критериями включения новорожденных в эту группу были лейкоцитурия (> 10 лейкоцитов / мл) и бактериурия (> 10 ⁵ колониеобразующих единиц / мл).У четырех из десяти младенцев была лихорадка, и они были госпитализированы, еще шесть младенцев были амбулаторными и не имели никаких клинических симптомов. Из мочи всех новорожденных было выделено K. pneumoniae .
Мы изучили чувствительность к антибиотикам K. pneumoniae , его способность продуцировать БЛРС и его факторы вирулентности, включая гены rmpA , аэробактина и колибактина. Отличительной особенностью hv-KP является его гипермуковязкостный фенотип.
Этический комитет городской детской больницы одобрил данное исследование, письменное информированное согласие, полученное от родителей в соответствии с принципами, утвержденными в соответствии с настоящим протоколом (Федеральный закон N323-ФЗ от 21.07.2012).11. 2011 «Об охране здоровья граждан в Российской Федерации»).
Анализ CRP
Уровни CRP
в сыворотке оценивали с использованием иммунотурбидиметрического анализа Randox Full Range CRP (Randox Laboratories, Крамлин, Северная Ирландия, Великобритания) в соответствии с рекомендациями производителя.
Бактериальные изоляты
Образцы крови: 1 мл крови собирали стерильным шприцем и смешивали с 20 мл бульона Brain-Heart Infusion (Conda Pronadisa, Испания).Смесь инкубировали при 37 ° C в течение 7 дней, наносили штрихами на поверхность кровяного агара и агара МакКонки (Oxoid, Великобритания) и инкубировали при 37 ° C в течение 24 ч (23). Образцы мочи собирали в стерильные контейнеры. Полную петлю образцов мочи наносили штрихами на поверхность кровяного агара и агара МакКонки (Oxoid, Великобритания) и инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов. Все изоляты были идентифицированы в соответствии с морфологическими и биохимическими тестами (окраска по Граму, окраска капсул, тест на подвижность, тест на продукцию индола, тест на продукцию уреазы, тест на метиловый красный, тест Фогеса-Проскауэра) (24) и подтверждены с помощью лазерной десорбции-ионизации с использованием матрицы. времяпролетная масс-спектрометрия (Microflex, Bruker Daltonics, Бремен, Германия).
Тест на чувствительность к антибиотикам
Чувствительность к антибиотикам изолятов K. pneumoniae определяли методом дисковой диффузии Кирби-Бауэра в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) (25). Суспензию каждого изолята K. pneumoniae наносили стерильными стеклянными палочками на поверхность агара Мюллера-Хинтона (Oxoid, UK). Затем на поверхность засеянной чашки с агаром Мюллера-Хинтона помещали диски с антибиотиками (BioRad, Франция).Затем планшет инкубировали при 35 ° C в течение 18 часов. Чувствительность к противомикробным препаратам определяли путем измерения диаметра зоны ингибирования согласно CLSI (25).
Тест на продукцию β-лактамаз расширенного спектра
Изоляты K. pneumoniae оценивали на БЛРС с использованием метода двойного диска в соответствии с CLSI (25). Диски амоксициллин / клавуланат помещали в центр чашки с агаром Mueller Hinton (Oxoid, UK). Диск цефтазидима и цефотаксима помещали на расстоянии 20 мм от диска амоксициллин / клавулановая кислота.Планшеты инкубировали в аэробных условиях при 35 ° C в течение 18 ч перед регистрацией размера зоны. Положительный результат был отмечен, когда зоны ингибирования вокруг любого из дисков цефалоспорина были увеличены в направлении диска, содержащего клавулановую кислоту.
Тестирование гипермуковязкости
Одиночные колонии, культивированные на кровяном агаре и чашках с агаром MacConkey (Oxoid, UK), были получены и исследованы на их способность образовывать вязкие нити. Гипермуковязкозит y определяли по образованию вязких струн длиной> 5 мм (14).Выделение штаммов K. pneumoniae и микробиологические исследования полученных изолятов были выполнены в бактериологической лаборатории Республиканской клинической инфекционной больницы.
Экстракция ДНК
Бактериальные колонии выращивали на поверхности кровяного агара и агара МакКонки, собирали и суспендировали в 50–100 мкл стерильной дистиллированной воды. Тотальную ДНК экстрагировали из взвешенных клеток с помощью набора для экстракции («Литех», Россия) согласно рекомендациям производителя.
Обнаружение генов, ассоциированных с вирулентностью, с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР)
образцов ДНК анализировали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Последовательности праймеров, используемые для амплификации фрагментов генов-мишеней, перечислены в таблице 1. Состав реакционной смеси и программы ПЦР для амплификации могут быть предоставлены по запросу. Ампликоны разделяли в 1,5% агарозном геле и очищали с помощью набора GeneJET Gel Extraction Kit (Thermo Scientific, США) в соответствии с рекомендациями производителя.Секвенирование продуктов ПЦР проводили на анализаторе ДНК 3730 (Life Technologies, США) и сравнивали с K. pneumoniae str. Плазмида II Kp52.145 и последовательности хромосомного генома из GenBank (номера доступа FO834905.1 и FO834906.1 соответственно) для подтверждения целевых генов.
Таблица 1 . Праймеры, используемые для ПЦР.
Результаты
Объекты исследования
Первая группа
Из 10 новорожденных с NS 5 были доношенными, а 5 — недоношенными.Трое недоношенных новорожденных родились раньше 32 недель гестации, еще двое — в срок от 32 до 36 недель (таблица 2). Два новорожденных родились с чрезвычайно низкой массой тела (ELBW). Сепсис развился у пяти новорожденных на первой неделе жизни, у трех на 2-й и 3-й неделях соответственно и у двух новорожденных на 4-й неделе. Сепсис был диагностирован у 5 новорожденных во время пребывания в родильном отделении и у трех (новорожденных с ЭНМТ) — в отделении интенсивной терапии Детской клинической больницы.Дома заболели двое новорожденных.
Таблица 2 . Клиническая характеристика пациентов (Me; межквартильный размах).
NS клинически проявляется гнойным менингитом ( n = 3), энтероколитом ( n = 3) и пневмонией плюс энтероколит ( n = 2). В двух случаях заболевание было связано с сепсисом. У трех матерей новорожденных с сепсисом во время беременности был кольпит. Пациенты получали комплексное лечение, включая антибиотики, инфузионную терапию, ИВЛ, внутривенное введение иммуноглобулинов.Три случая неонатального сепсиса закончились смертельным исходом; у двух новорожденных был гнойный менингит и у одного некротический энтероколит. Остальные семь новорожденных с сепсисом успешно выздоровели.
Вторая группа
Из 10 новорожденных с ИМП восемь родились доношенными и двое — недоношенными. Оба недоношенных новорожденных родились на 35 неделе беременности. ИМП развилась у четырех новорожденных на 3-й неделе жизни, у шести новорожденных на 4-й неделе. Только у четырех из десяти младенцев были клинические проявления, основными из которых были лихорадка и раздражительность.У остальных шести младенцев ИМП протекала бессимптомно. Две матери новорожденных с ИМП во время беременности заболели кольпитом, в одном случае — пиелонефритом. Все новорожденные получали антибактериальную терапию на основании результатов тестов на микробиологическую чувствительность.
Чувствительность к противомикробным препаратам
У новорожденных с NS все изолятов K. pneumoniae были устойчивы к ампициллину, а шесть из них — ко всем аминопенициллинам (включая защищенные), гентамицину и цефалоспоринам третьего поколения.В то же время все изоляты K. pneumoniae были чувствительны к меропенему, амикацину и ципрофлоксацину (табл. 3). Шесть изолятов K. pneumoniae продуцировали БЛРС. У новорожденных с ИМП все изоляты K. pneumoniae также были устойчивы к ампициллинам. Шесть из них были устойчивы к гентамицину, четыре изолята — к защищенным аминопенициллинам и цефалоспоринам третьего поколения. Все изоляты K. pneumoniae были чувствительны к меропенему, амикацину и ципрофлоксацину.Тест на продукцию ESBL был положительным для 4 изолятов K. pneumoniae .
Таблица 3 . Чувствительность к антибиотикам изолятов K.pneumoniae *.
Факторы вирулентности
В группе новорожденных с сепсисом ген rmpA (основной фактор вирулентности K. pneumoniae ) выявлен в 4 случаях (40%). Наличие гена rmpA у K. pneumoniae было связано с развитием гнойного менингита (3 случая) и энтероколита (1 случай).Только доношенные дети болели менингитом. Двое из четырех детей с геном rmpA в изолятах K. pneumoniae умерли. «Струнный тест» был положительным, если колония K. pneumoniae показывала присутствие только гена rmpA . Гены аэробактина и колибактина были обнаружены в двух изолятах K. pneumoniae . Оба изолята, продуцирующие аэробактин, были положительными в отношении iro D и iro N . Один из двух изолятов, продуцирующих колибактин, был положительным для clb A и clb B , другой был положительным только для clb B .Гены аэробактина и колибактина были обнаружены только у изолятов K. pneumoniae , взятых у новорожденных с гнойным менингитом с неблагоприятным исходом (таблица 4). Производство аэробактина и колибактина напрямую коррелировало с присутствием гена rmpA . Гены аэробактина и колибактина не были обнаружены в двух rmpA -положительных изолятах K.pneumoniae . В одном случае это был младенец с менингитом с благоприятным исходом, в другом — младенец с энтероколитом.
Таблица 4 . Факторы вирулентности изолята K. pneumoniae у новорожденных с сепсисом и ИМП *.
У новорожденных с ИМП ген rmpA , гены аэробактина и колибактина были обнаружены в 3 (30%) изолятах K. pneumoniae . Все изоляты, продуцирующие аэробактин, были положительными для iro D и iro N . Все изоляты, продуцирующие колибактин, были положительными для clb A и clb B . Гены аэробактина и колибактина не обнаружены в rmpA -отрицательных K.pneumoniae .
Изучение влияния факторов вирулентности изолятов K. pneumoniae на клинические проявления инфекций новорожденных выявило высокую вероятность развития гнойного менингита (OR 9; CI 0,7–113) с неблагоприятным исходом (OR 4,8; ДИ 0,3–65,7), но эти различия не были статистически значимыми (таблица 5).
Таблица 5 . Сравнение клинических и лабораторных данных новорожденных с вирулентными детерминантами и без них.
Обсуждение
Многочисленные исследования показали, что устойчивость к антибиотикам и вирулентность микроорганизмов являются значительными факторами риска развития NS (30, 31). Устойчивость бактерий к антибиотикам — основная причина неэффективной терапии внутрибольничных инфекций и сепсиса. Устойчивость к антибиотикам штаммов K. pneumoniae связана в основном с образованием БЛРС. В 2017 г. Всемирная организация здравоохранения включила в список наиболее опасных супербактерий K. pneumoniae , продуцирующую БЛРС, наряду с Acinetobacter baumani и Pseudomonas aeruguinosa (32).Новорожденные наиболее уязвимы для инфекции. Факторы, предрасполагающие к грамотрицательному сепсису у новорожденных, связаны с недоношенностью и низкой массой тела при рождении, а также с длительным пребыванием в отделении интенсивной терапии (33, 34). В нашем исследовании в группе неонатального сепсиса пять новорожденных были недоношенными, а двое из них родились с чрезвычайно низкой массой тела (ELBW). Шесть изолятов крови штаммов K. pneumoniae (60%) продуцировали БЛРС. У новорожденных с ИМП изоляты K. pneumoniae продуцировали БЛРС в 40% случаев.Заражение новорожденных БЛРС, продуцирующим штаммов K. pneumoniae , могло произойти в родильном отделении или во время длительного пребывания в отделении интенсивной терапии. Тестирование на устойчивость к антибиотикам показало, что все изоляты БЛРС K. pneumoniae (из крови и мочи) были устойчивы ко всем аминопициллинам и цефалоспоринам третьего поколения. В то же время все изоляты БЛРС K. pneumoniae были чувствительны к меропенему, амикацину и ципрофлоксацину. Очевидно, что меропенем следует рассматривать в качестве приоритетной антибактериальной терапии в случаях неонатальных инфекций, вызванных штаммами, продуцирующими БЛРС К.пневмония . Вся кровь и моча изолята K. pneumoniae , не продуцирующего БЛРС, были чувствительны к защищенным аминопенициллинам, цефалоспоринам третьего поколения, меропенему, амикацину и ципрофлоксацину. Следовательно, в случаях неонатальных инфекций, вызванных штаммами K. pneumoniae , не продуцирующими ESBL, в качестве первой линии антибиотикотерапии следует использовать защищенные аминопенициллины и цефалоспорины III. Известно, что раннее начало антибактериальной терапии играет решающую роль в эффективности терапии сепсиса, поскольку ее отсрочка увеличивает риск смерти (35).Однако клинические симптомы и лабораторные признаки НП неспецифичны, и его раннее выявление является довольно сложной задачей. Поражение желудочно-кишечного тракта может косвенно указывать на развитие инфекции, вызванной грамотрицательными бактериями, поскольку кишечник является основным местом их колонизации. Среди лабораторных признаков сепсиса, ассоциированного с грамотрицательными бактериями, ряд исследователей выделяют частое развитие тромбоцитопении (36). В нашем исследовании у всех 10 новорожденных с сепсисом была тромбоцитопения, которая была тяжелой (<50 × 10 ⁹ / л) у 8 новорожденных.У пяти младенцев был энтероколит. Наиболее тяжелые формы сепсиса у исследованных младенцев, а также его неблагоприятные исходы были связаны с менингитом. Примечательно, что неонатальный менингит возник только у доношенных детей, двое из них были выписаны домой из родильных домов и заболели на второй неделе жизни. При анализе данной ситуации мы склонны связывать развитие сепсиса у новорожденных с их пребыванием в родильных домах, поскольку большинство изолятов K. pneumoniae были продуцентами БЛРС.Это также может быть подтверждено тем фактом, что сепсис, вызванный K. pneumoniae , произошел у шести новорожденных, которые находились в одной больнице в течение того же периода. К сожалению, ни медперсонал родильных домов, ни матери этих новорожденных не были обследованы на носитель K. pneumoniae , поэтому данное предположение не может быть подтверждено. Несмотря на хорошо известную роль штаммов K. pneumoniae , продуцирующих ESBL, в развитии позднего начала NS, также очевидно, что факторы вирулентности K.pneumoniae играют важную роль в развитии наиболее тяжелых форм NS. Факторы, влияющие на вирулентность штаммов K. pneumoniae , включают капсульные полисахариды, липополисахариды, фимбриальные адгезины и сидерофоры (37, 38). Гипервирулентный фенотип K. pneumoniae связан с наличием гена rmpA (14). Hv-KP вызывает наиболее тяжелые инвазивные формы инфекции у ранее здоровых взрослых (абсцессы печени, менингит и эндофтальмит) (12–14).В отличие от cv-KP, штаммы hv-KP более устойчивы к комплементу и фагоцитозу (38, 39). Механизмы, обеспечивающие такую стабильность, разнообразны и включают защиту от опсонизации и фагоцитоза макрофагами и нейтрофилами из-за наличия толстой капсулы в K. pneumoniae и блокаду TLR, в частности TLR4, который ингибирует экспрессию интерлейкинов. 8 (38). Обычно высокая вирулентность характерна для штаммов K. pneumoniae , вызывающих внебольничные инфекции, и эти микроорганизмы обычно чувствительны к большинству внешних антимикробных факторов.В то же время недавние исследования демонстрируют новую тенденцию: hv-KP приобрели главное свойство внутрибольничных микроорганизмов — антибактериальную устойчивость. Влияние штамма hv-KP на клинические признаки неонатальной инфекции неизвестно. В нашем исследовании ген rmpA был обнаружен в изолятах K. pneumoniae в обеих группах новорожденных с NS и UTI. Обнаружение гена rmpA у штаммов K. pneumoniae , выделенных от новорожденных с сепсисом, в трех из четырех случаев было связано с гнойным менингитом.Обнаружение гена rmpA у новорожденных с ИМП было для нас неожиданным. Очевидно, что другие факторы вирулентности, в частности липополисахарид (ЛПС) и сидерофоры, необходимы для обеспечения вирулентности K. pneumoniae . ЛПС защищает от гуморальной защиты и активирует иммунную систему (20). Липид A LPS является лигандом TLR4 (20). О-антиген ЛПС защищает от комплемента (20). Штаммы K. pneumoniae , которые содержат полноразмерный О-антиген («гладкий ЛПС»), устойчивы к опосредованному комплементом уничтожению, в то время как штаммы с укороченными или отсутствующими О-цепями («грубый ЛПС») чувствительны к комплементарно-опосредованному уничтожению. опосредование убийства, даже в присутствии капсулы (40).Отсутствие О-антигена K. pneumoniae менее вирулентен. Обнаружение гена rmpA в изолятах K. pneumoniae у новорожденных с ИМП указывает на то, что распространенность вирулентных штаммов K. pneumoniae может быть выше, чем мы думаем. Распространенность hv-KP в Российской Федерации неизвестна. Распространенность hv-KP очень высока в Азии (до 90%) (41), в других регионах мира она меньше. В Испании и Канаде распространенность hv-KP оценивалась в 5 баллов.4 и 8,2% соответственно (42, 43). В нашем исследовании два случая были вызваны изолятами K. pneumoniae , продуцирующими БЛРС, которые содержали ген rmpA . Это были младенцы с менингитом, и оба случая закончились смертельным исходом. В группе младенцев с ИМП ген rmpA был обнаружен только у изолятов K. pneumoniae , не продуцирующих БЛРС. Несмотря на небольшое количество новорожденных, включенных в это исследование, очевидно, что приобретение множественной лекарственной устойчивости вирулентными штаммами K.pneumoniae может ухудшить течение и прогноз заболевания. Сидерофоры — аэробактин, энтеробактин, иерсиниабактин и колибактин являются наиболее важными вирулентными факторами, которые способствуют росту и выживанию K. pneumoniae у инфицированного хозяина (7, 38). Экспрессия энтеробактина повсеместно распространена среди c-KP и hv-KP (44, 45). Но аэробактин экспрессируется 6% изолятов c-KP и 93–100% изолятов hv-KP (44, 45). Сидерофоры — это небольшие высокоаффинные хелатирующие молекулы железа, секретируемые широким спектром микроорганизмов, которые имеют решающее значение для вирулентности многих грамотрицательных бактерий (7, 20).Известно, что железо необходимо для роста и размножения бактерий (46). Доступ к молекулам железа является важным фактором, обеспечивающим инвазивные свойства K. pneumoniae при инфекции у иммунокомпетентных людей (46). Штаммы Hv-KP продуцируют молекулы сидерофоров в большем количестве и в их более активной форме, чем c-KP (46). Было показано, что развитие инвазивных форм заболевания связано с продукцией нескольких сидерофоров штаммами K. pneumoniae (47).В нашем исследовании штаммов K. pneumoniae , продуцирующих сидерофоры, были обнаружены у двух новорожденных с сепсисом и у трех новорожденных с ИМП. Во всех случаях гены аэробактина и колибактина были обнаружены только в rmpA -положительных изолятах K. pneumoniae . Однако летальные исходы отмечены только в случаях, вызванных вирулентными штаммами КП. Несмотря на связь между развитием гнойного менингита и неблагоприятным исходом у новорожденных, инфицированных в основном вирулентными штаммами КП, нам не удалось подтвердить эту ситуацию статистическими методами.Вероятно, это связано с небольшим количеством новорожденных с гнойным менингитом, который редко встречается в этой возрастной группе. Мы не смогли подтвердить исходную гипотезу о том, что развитие только наиболее тяжелых форм неонатальной инфекции (гнойного менингита) связано с вирулентными штаммами КП. ИМП также могут быть вызваны вирулентными штаммами K. pneumoniae . Очевидно, что в будущем роль вирулентных штаммов K. pneumoniae будет возрастать.
Заключение
Распространенность вирулентных штаммов K.pneumoniae среди новорожденных с сепсисом и другими неонатальными инфекциями выше, чем мы думаем. Риск развития тяжелых форм неонатальной инфекции может быть связан с факторами вирулентности. Наиболее тяжелые формы неонатального сепсиса с неблагоприятным исходом в нашем исследовании были вызваны вирулентными штаммами K. pneumoniae .
Авторские взносы
KK, VA и AR: дизайн исследования, написание рукописи. YD: Выделение ДНК штаммов K. pneumoniae с последующим генотипированием методом ПЦР для определения факторов вирулентности.DS: сбор клинических данных. SL: сбор и интерпретация клинических данных. NS: выделение колоний K. pneumoniae , определение их устойчивости к антибиотикам и способности продуцировать β-лактамазу расширенного спектра действия.
Финансирование
Работа поддержана Государственной программой повышения конкурентоспособности Казанского федерального университета. AR поддержана государственным заданием 20.5175.2017 / 6.7 Минобрнауки России.
Заявление о конфликте интересов
Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Благодарности
Работа поддержана Государственной программой повышения конкурентоспособности Казанского федерального университета. AR поддержана государственным заданием 20.5175.2017 / 6.7 Минобрнауки России.
Список литературы
1. Камачо-Гонсалес А., Спирмен П. У., Столл Б. Дж.. Инфекционные болезни новорожденных: оценка неонатального сепсиса. Pediatr Clin North A (2013) 60: 367–89. DOI: 10.1016 / j.pcl.2012.12.003
CrossRef Полный текст | Google Scholar
2. Верма П., Бервал П.К., Нагарадж Н., Свами С., Дживаджи П., Нараян С. Неонатальный сепсис: эпидемиология, клинический спектр, недавние противомикробные препараты и их картина чувствительности к антибиотикам. Int J Contemp Pediatr. (2015) 2: 176–80. DOI: 10.18203 / 2349-3291.ijcp20150523
CrossRef Полный текст | Google Scholar
3. Столл Б.Дж., Хансен Н., Фанаров А.А., Райт Л.Л., Карло В.А., Эренкранц Р.А. и др. Поздний сепсис у новорожденных с очень низкой массой тела при рождении: опыт NICHD Neonatal Research Network. Педиатрия (2002) 110: 285–91. DOI: 10.1542 / педс.110.2.285
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
4. Заиди А.К., Тавер Д., Али С.А., Хан Т.А.Патогены, связанные с сепсисом у новорожденных и детей грудного возраста в развивающихся странах. Pediatr Infect Dis J. (2009) 28 (Дополнение 1): S10–8. DOI: 10.1097 / INF.0b013e3181958769
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
5. Верньяно С., Менсон Э., Кеннеа Н., Эмблтон Н., Рассел А.Б., Уоттс Т. и др. Инфекции новорожденных в Англии: сеть эпиднадзора NeonIN. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. (2011) 96: F9–14. DOI: 10.1136 / adc.2009.178798
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
8.Podschun R, Ullmann U. Klebsiella spp. как внутрибольничные возбудители: эпидемиология, систематика, методы типирования, факторы патогенности. Clin Microbiol Ред. . (1998) 4: 589–603.
9. Haller S, Eller C, Hermes J, Kaase M, Steglich M, Radonic A, et al. Что вызвало вспышку возбудителя ESBL Klebsiella pneumoniae в отделении интенсивной терапии новорожденных, Германия, с 2009 по 2012 год? Восстановление передачи с помощью эпидемиологического анализа и полногеномного секвенирования. BMJ (2015) 5: e007397. DOI: 10.1136 / bmjopen-2014-007397
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
10. Хаэртынов Х.С., Анохин В.А., Николаева И.В., Семенова Д.Р., Любин С.А., Агапова И.В. Неонатальный сепсис, вызванный клебсиеллой. Новости медицины Северного Кавказа (2016) 11: 82–6. DOI: 10.14300 / mnnc.2016.11004
CrossRef Полный текст | Google Scholar
11. Гелбанд Х, Миллер-Петри М., Пант С., Гандра С., Левинсон Дж., Бартер Д. и др. Состояние антибиотиков в мире . Вашингтон, округ Колумбия: Центр динамики заболеваний, экономики и политики (2015).
12. Лю Ю.С., Ченг Д.Л., Линь К.Л. Klebsiella pneumoniae Абсцесс печени, связанный с септическим эндофтальмитом. Arch Intern Med . (1986) 146: 1913–6.
PubMed Аннотация | Google Scholar
13. Cheng DL, Liu YC, Yen MY, Liu CY, Wang RS. Септические метастатические поражения гнойного абсцесса печени. Их связь с бактериемией Klebsiella pneumoniae у больных сахарным диабетом .Arch Intern Med. (1991) 151: 1557–9. DOI: 10.1001 / archinte.1991.00400080059010
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
14. Ван Дж. Х., Лю Ю. С., Ли С. С., Йен М. Ю., Чен Ю. С., Ван Дж. Х. и др. Первичный абсцесс печени, вызванный Klebsiella pneumoniae на Тайване. Clin Infect Dis . (1998) 26: 1434–8.
PubMed Аннотация | Google Scholar
15. Декре Д., Верде С., Эмириан А., Ле Гурриерек Т., Пети Дж. К., Оффенштадт Г. и др.Возникающие тяжелые и смертельные инфекции, вызванные Klebsiella pneumoniae , в двух университетских больницах Франции. J Clin Microbiol. (2011) 49: 3012–304. DOI: 10.1128 / JCM.00676-11
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
16. Bialek-Davenet S, Criscuolo A, Ailloud F, Passet V, Jones L, Delannoy-Vieillard AS, et al. Геномное определение клональных групп Klebsiella pneumoniae с гипервирулентностью и множественной лекарственной устойчивостью. Emerg Infect Dis .(2014) 20: 1812–20. DOI: 10.3201 / eid2011.14020622
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
17. Yu WL, Ko WC, Cheng KC, Lee HC, Ke DS, Lee CC, et al. Связь между генами rmpA и magA и клинические синдромы, вызываемые Klebsiella pneumoniae на Тайване. Клин Инект Дис . (2006) 42: 1351–8. DOI: 10.1086 / 503420
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
18. Чжан Р., Линь Д., Чан Э. В., Гу Д., Чен Г. X., Чен С.Появление в Китае устойчивых к карбапенемам гипервирулентных штаммов Klebsiella pneumoniae серотипа K1. Противомикробные агенты Chemother . (2015) 60: 709–11. DOI: 10.1128 / AAC.02173-15
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
19. Surgers L, Boyd A, Girard PM, Arlet G, Decré D. Штамм гипервирулентного возбудителя ESBL Klebsiella pneumoniae K2, Франция. Emerg Infect Dis . (2016) 22: 1687–8. DOI: 10.3201 / eid2209.160681
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
21.Чжан И, Чжао Ц., Ван Ц., Ван Х, Чен Х, Ли Х и др. Высокая распространенность гипервирулентной инфекции Klebsiella pneumoniae в Китае: географическое распространение, клинические характеристики и устойчивость к противомикробным препаратам. Противомикробные агенты Chemother . (2016) 60: 6115–20. DOI: 10.1128 / AAC.01127-16
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
23. Колли Дж. Г., Маки Т. Дж., Маккартни Дж. Э. Практическая медицинская микробиология . Нью-Йорк, Нью-Йорк: Черчилль Ливингстон (1996).
24. MacFaddin JF. Биохимические тесты для идентификации медицинских бактерий. 3-е изд. Балтимор, Мэриленд: Уильямс и Уилкинс (2000).
25. Patel JB, Cockerill FR, Bradford PA, Eliopoulos GM, Hindler JA, Jenkins SG, et al. Стандарты эффективности испытаний на чувствительность к противомикробным препаратам. Уэйн: Институт клинических и лабораторных стандартов (2015).
26. Ло И, Ван И, Йе Л., Ян Дж. Молекулярная эпидемиология и факторы вирулентности гнойного абсцесса печени, вызывающего Klebsiella pneumoniae в Китае. Clin Microbiol Infect. (2014) 20: 818–24. DOI: 10.1111 / 1469-0691.12664
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
27. Compain F, Babosan A, Brisse S, Genel N, Audo J, Ailloud F и др. Мультиплексная ПЦР для обнаружения семи факторов вирулентности и капсульных серотипов K1 / K2 Klebsiella pneumoniae . Дж. Клин Микробиол . (2014) 52: 4377–80. DOI: 10.1128 / JCM.02316-14
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
28.Ю В.Л., Ко В.К., Ченг К.С., Ли С.К., Лай С.К., Чуанг Ю.К. Сравнение распространенности факторов вирулентности для абсцессов печени Klebsiella pneumoniae между изолятами с капсульным серотипом K1 / K2 и не-K1 / K2. Diagn Microbiol Infect Dis. (2008) 62: 1–6. DOI: 10.1016 / j.diagmicrobio.2008.04.007
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
30. Центры по контролю и профилактике заболеваний. Жизненно важные функции: энтеробактерии, устойчивые к карбапенемам. Morb Mortal Wkly Rep. (2013) 62: 165–70.
31. Аль-Хасан М.Н., Хускинс В.С., Лар Б.Д., Экель-Пассов Д.Е., Баддур Л.М. Эпидемиология и исходы грамотрицательной инфекции кровотока у детей: популяционное исследование. Эпидемиол. Инфекция. (2011) 139: 791–6. DOI: 10.1017 / S0
8810001640
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
32. Брансвелл Х. ВОЗ опубликовала список опасных супербактерий в мире. Stat. (27 февраля 2017 г.).
33.Самуэльссон А., Исакссон Б., Ханбергер Х., Ольхагер Э. Поздний неонатальный сепсис, факторы риска и вмешательства: анализ повторяющихся вспышек Serratia marcescens, 2006-2011 гг. J Hosp Infect . (2014) 86: 57–63. DOI: 10.1016 / j.jhin.2013.09.017
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
34. Кортезе Ф., Шиккитано П., Джезуальдо М., Филанинно А., Де Джорджи Э., Скеттини Ф. и др. Ранние и поздние инфекции у новорожденных: где мы находимся? Обзор. Педиатр неонатол .(2016) 57: 265–73. DOI: 10.1016 / j.pedneo.2015.09.007
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
35. Родос А., Эванс Л. Е., Альхазани В., Леви М. М., Антонелли М., Феррер Р. и др. Кампания по выживанию после сепсиса: международные рекомендации по ведению сепсиса и септического шока: 2016 г. Intens Care Med. (2017) 43: 304–77. DOI: 10.1007 / s00134-017-4683-6
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
38. Ли Б., Чжао И, Лю Ц., Чжоу Д.Молекулярный патогенез клебсиеллёзной пневмонии. Микробиол будущего . (2014) 9: 1071–81. DOI: 10.2217 / fmb.14.48
CrossRef Полный текст | Google Scholar
39. Doorduijn DJ, Rooijakkers SH, van Schaik W., Bardoel BW. Механизмы устойчивости к комплементу Klebsiella pneumoniae . Иммунобиология . (2016) 221: 1102–9. DOI: 10.1016 / j.imbio.2016.06.014
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
40. Мерино С., Кампруби С., Альберти С., Бенеди В.Дж., Томас Дж. М..Механизмы устойчивости Klebsiella pneumoniae к комплемент-опосредованному уничтожению. Инфекция иммунол . (1992) 60: 2529–35.
41. Е М, Ту Дж, Цзян Дж, Би Й, Ю В., Чжан И и др. Клинический и геномный анализ , вызывающего абсцесс печени. Klebsiella pneumoniae идентифицирует новые гены вирулентности, связанные с абсцессом печени. Front Cell Infect Microbiol. (2016) 6: 165. DOI: 10.3389 / fcimb.2016.00165
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
42.Куберо М., Грау И., Тубау Ф., Палларес Р., Домингес М.А., Линарес Дж. И др. Гипервирулентный Klebsiella pneumoniae клонов, вызывающих бактериемию у взрослых в клинической больнице в Барселоне, Испания (2007-2013). Clin Microbiol Infect. (2016) 22: 154–60. DOI: 10.1016 / j.cmi.2015.09.025
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
43. Пейрано Дж., Питоут Дж. Д., Лаупланд КБ, Митеролл Б., Грегсон Д. Б.. Популяционный эпиднадзор на гипермуковязкость Klebsiella pneumoniae , вызывающую внебольничную бактериемию, в Калгари, Альберта. Может ли заразить Dis Med Microbiol . (2013) 24: e61–4. DOI: 10.1155 / 2013/828741
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
44. Подщун Р., Сиверс Д., Фишер А., Ульманн У. Серотипы, гемагглютинины, синтез сидерофоров и сывороточная резистентность изолятов клебсиелл, вызывающих инфекции мочевыводящих путей человека. J Infect Dis. (1993) 168: 1415–21. DOI: 10.1093 / infdis / 168.6.1415
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
45.Эль Фертас-Айсани Р., Мессай И., Алуаш С., Бакур Р. Профили вирулентности и паттерны чувствительности к антибиотикам штаммов Klebsiella pneumoniae , выделенных из различных клинических образцов. Pathol Biol. (2013) 61: 209–16. DOI: 10.1016 / j.patbio.2012.10.004
CrossRef Полный текст | Google Scholar
46. Холден В.И., Брин П., Хоул С., Дозуа С.М., Бахман М.А. Klebsiella pneumoniae сидерофоров вызывают воспаление, распространение бактерий и стабилизацию HIF-1 во время пневмонии. мБио (2016) 7: 1397–16. DOI: 10.1128 / mBio.01397-16
CrossRef Полный текст | Google Scholar
47. Холт К.Е., Вертхайм Х., Задокс Р.Н., Бейкер С., Уайтхаус, Калифорния, Дэнс Д. и др. Геномный анализ разнообразия, структуры популяции, вирулентности и устойчивости к противомикробным препаратам у Klebsiella pneumoniae , неотложной угрозы общественному здоровью. Proc Natl Acad Sci USA . (2015) E3574–81. DOI: 10.1073 / pnas.1501049112
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Инфекции Klebsiella pneumoniae, продуцирующие β-лактамазу расширенного спектра: обзор литературы
Эпидемиология
Род Klebsiella является членом семейства Enterobacteriaceae. Klebsiella spp. Широко распространены в природе и могут быть обнаружены в естественной среде (например, в воде и почве) и на поверхностях слизистых оболочек млекопитающих. ⁴ Обычными местами колонизации у здоровых людей являются желудочно-кишечный тракт, глаза, дыхательные пути и мочеполовые пути. ⁴
K. pneumoniae стала важной причиной внутрибольничных инфекций, особенно среди пациентов в отделении интенсивной терапии новорожденных, а уровень смертности может достигать 70%.⁵ За последние два десятилетия увеличилась частота инфекций, вызываемых штаммами Klebsiella с множественной лекарственной устойчивостью.
Ферменты с расширенным спектром β -лактамазы были впервые описаны в изолятах K. pneumoniae и Serratia marcescens в 1983 г. в Европе, ⁶ и в изолятах K. pneumoniae и Escherichia coli в 1989 г. в США Состояния. ⁷ С тех пор наблюдается заметный рост числа бактерий, продуцирующих ферменты БЛРС.В Соединенных Штатах доля штаммов K. pneumoniae , устойчивых к цефтазидиму, увеличилась с 1,5% в 1987 г. до 3,6% в 1991 г., а к 1993 г. в некоторых учебных больницах к цефтазидиму было устойчиво до 20% штаммов. ^1,2 Из 824 штаммов K. pneumoniae , выделенных из 15 больниц Нью-Йорка в течение 1999 г., 34% экспрессировали ферменты БЛРС. ⁸
Факторы вирулентности
Многочисленные факторы вирулентности описаны для Klebsiella spp.Внеклеточные капсулы необходимы для вирулентности; капсульный материал образует толстые пучки фибриллярных структур, покрывающих бактериальную поверхность массивными слоями. ⁴ Это защищает бактерии от фагоцитоза полиморфноядерными гранулоцитами и предотвращает уничтожение бактерицидными факторами сыворотки через каскад, опосредованный комплементом. В настоящее время известно около 80 различных капсульных (K) антигенов. Хотя обычно считалось, что капсульный полисахарид Klebsiella (CPS) опосредует вирулентность, недавно было показано, что содержание маннозы в CPS придает степень вирулентности.Например, штаммы, содержащие повторяющиеся последовательности маннозы-, α -2 / 3-маннозы или L-рамнозы-, α -2 / 3-L-рамнозы, обладают меньшей вирулентностью. Эти последовательности маннозы распознаются поверхностным лектином макрофагов, и организм более эффективно поглощается и уничтожается опсонин-независимым фагоцитозом. ⁹
В дополнение к капсуле существует около пяти соматических или O антигенов, фимбриальных и нефимбриальных адгезинов, которые служат факторами вирулентности.Фимбрии или пили представляют собой нефлагеллярные нитчатые выступы на поверхности бактерий, которые опосредуют прикрепление организма к клеткам слизистой оболочки дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочевыводящих путей.
Дополнительные детерминанты вирулентности для Klebsiella spp включают способность организма извлекать железо из окружающей среды с использованием секретируемых сидерофоров, то есть энтерохелина и аэробактина. Это высокоаффинные хелаторы железа с низким молекулярным весом, которые конкурентно поглощают железо, связанное с белками хозяина.¹⁰
Молекулярные механизмы устойчивости
БЛРС представляют собой плазмидно-опосредованные ферменты, которые гидролизуют оксиимино- β лактамные агенты, такие как цефалоспорины третьего поколения и азтреонам. ¹¹ Эти плазмиды также несут гены устойчивости к другим антибиотикам, включая аминогликозиды, хлорамфеникол, сульфонамиды, триметоприм и тетрациклин. Таким образом, грамотрицательные бациллы, содержащие эти плазмиды, обладают множественной лекарственной устойчивостью. ¹² Кроме того, эти плазмиды являются мобильными генетическими элементами и могут передаваться между грамотрицательными бациллами разных видов in vivo .¹³ Во время 30-месячной вспышки возбудителя ESBL K. oxytoca в отделении интенсивной терапии, плазмида из K. oxytoca распространилась на K. pneumoniae , E. coli , Enterobacter cloacae, и Citrobacter freundii . ¹⁴
Было идентифицировано более 100 различных ферментов БЛРС, каждый из которых имеет предпочтительный субстрат. Таким образом, изолят, продуцирующий БЛРС, может быть устойчивым к цефтазидиму, но чувствительным к цефотаксиму.В результате изоляты, продуцирующие БЛРС, могут быть не обнаружены, если тестирование на чувствительность ограничено одним цефалоспорином третьего поколения. Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS) рекомендует рутинный скрининг на активность ESBL в изолятах E. coli , K. pneumoniae, и K. oxytoca путем определения чувствительности к нескольким цефалоспоринам, включая цефподоксим, цефотаксим, цефтриаксон и цефтазидим. ^15,16 Если изолят устойчив к любому из этих агентов, то есть, MIC ≥2 μ мкг / мл, подтверждающие тесты на фермент БЛРС проводятся путем демонстрации повышенной чувствительности к цефотаксиму или цефтазидиму в присутствии Клавулановая кислота, как и клавулановая кислота, подавляет ферменты БЛРС и снижает МПК цефалоспоринов.
Однако бактерии с плазмидами, содержащими БЛРС, остаются чувствительными к карбапенемам, то есть меропенему и имипенему, и цефамицинам, таким как цефокситин и цефотетан.
Факторы риска приобретения патогенов, продуцирующих БЛРС
Эпидемиологические исследования показывают, что все более широкое использование цефалоспоринов третьего поколения является основным фактором риска, который способствовал появлению продуцирующих БЛРС K. pneumoniae . ^17,18,19 Сообщалось о нескольких дополнительных факторах риска колонизации и инфицирования организмами, продуцирующими БЛРС, включая катетеризацию артерий и центральных вен, колонизацию желудочно-кишечного тракта организмами, продуцирующими БЛРС, длительное пребывание в отделении интенсивной терапии блок, низкая масса тела при рождении у недоношенных детей, предшествующий прием антибиотиков и искусственная вентиляция легких.^20,21,22 Носительство этого микроорганизма резко возрастает среди госпитализированных пациентов, так как уровень колонизации увеличивается прямо пропорционально продолжительности пребывания в больнице. ¹⁴
Описаны вспышки микроорганизмов, продуцирующих БЛРС. Бессимптомные пациенты, колонизированные возбудителем ESBL K. pneumoniae , могут служить резервуарами для этого патогена с последующим распространением от пациента к пациенту через руки медицинских работников. Кроме того, зараженные предметы ухода за пациентами и искусственные ногти, которые носят медицинские работники, были причастны к передаче.^23,24,25,26 Большинство исследований продемонстрировали плохую приверженность политике инфекционного контроля как важный фактор. Вспышки возбудителя ESBL K. pneumoniae в отделениях интенсивной терапии и интенсивной терапии были отмечены высокой частотой приступов и большим количеством колонизированных младенцев. ²⁶ Новорожденные, подвергающиеся наибольшему риску колонизации, — это новорожденные с более длительным сроком пребывания, более низким расчетным сроком беременности и / или меньшим весом при рождении. ¹⁴
Клинические проявления
Важность грамотрицательных бацилл как основной причины внутрибольничных инфекций у пациентов отделения интенсивной терапии (ОИТН) хорошо задокументирована. K. pneumoniae может вызывать как ранний, так и, чаще, поздний сепсис, конъюнктивит, внутрибольничную пневмонию, инфекции мочевыводящих путей (ИМП) и инфекции в области хирургического вмешательства. ^4,27 Приблизительно 4% эпизодов сепсиса с поздним началом у новорожденных с очень низкой степенью рождения и 6% от общего числа инфекций в популяции новорожденных в отделениях интенсивной терапии вызваны K. pneumoniae . ^28,29 Согласно последним данным Национальной системы надзора за внутрибольничными инфекциями, K.pneumoniae вызывает 2,9% инфекций кровотока, 2,9% инфекций глаз, ушей, носа и горла, 9,8% инфекций желудочно-кишечного тракта, 5,7% пневмонии и 6,3% инфекций в области хирургического вмешательства в отделениях интенсивной терапии. ³⁰ Как показало исследование точечной распространенности CDC / Национальной ассоциации детских больниц и родственных учреждений (NACHRI), проведенное в 1999 году, K. pneumoniae вызвала 1,7% инфекций кровотока, 20% инфекций дыхательных путей, 8,3% инфекций. ИМП и 5.6% других инфекций у пациентов в отделениях интенсивной терапии. ²⁹
Лечение организмов, продуцирующих БЛРС
Ведение и лечение инфекций, вызывающих БЛРС K. pneumoniae , может быть сложной задачей и постоянно развивается. На сегодняшний день не проводились клинические испытания, оценивающие сравнительную эффективность антибиотиков при лечении инфекций, вызванных этими патогенами. Тип продуцируемого фермента БЛРС, а также место и тяжесть инфекции являются важными факторами при выборе противомикробной терапии.^18,31 Таким образом, активный надзор за организмами, продуцирующими БЛРС, имеет решающее значение для полного описания местной эпидемиологии данного учреждения и / или направляющих центров.
Цефалоспорины широкого спектра действия были первоначально разработаны для того, чтобы противостоять хромосомным и некоторым плазмидным ферментам β -лактамаз. Однако появление бактерий, продуцирующих БЛРС, ограничило полезность цефалоспоринов широкого спектра действия при лечении серьезных инфекций, вызванных этими патогенами, поскольку есть сообщения о неудачах лечения и высоких показателях смертности, связанных с использованием цефалоспоринов широкого спектра действия. даже если сообщается о чувствительности in vitro к .Поэтому цефалоспорины не рекомендуются для лечения кровотока и серьезных инфекций, вызванных этими патогенами. ^19,32,33 Однако цефалоспорины успешно используются для лечения менее серьезных инфекций, таких как ИМП и пневмония. ^18,34
β -Лактамазные ингибиторы, такие как тазобактам и клавулановая кислота, ингибируют ферменты ESBL in vitro . ^34,35 Комбинация тазобактама с пенициллином расширенного спектра действия, таким как пиперациллин (Zosyn ^®), обладает противомикробным действием широкого спектра действия против широкого спектра бактерий, включая бактерии, продуцирующие БЛРС.³⁶ Пиперациллин / тазобактам успешно применялся для лечения инфекций кровотока у недоношенных детей, вызванных продуцирующим ESBL K. pneumoniae . ³⁷ Кроме того, пиперациллин / тазобактам успешно используется для лечения ИМП. ^31,37,38 Напротив, неэффективность лечения пиперациллина / тазобактама была задокументирована. Неудачи лечения произошли по ряду причин, в том числе: наличие большого абсцесса, предположительно содержащего большое количество организмов, «гиперпродукция» ферментов БЛРС инфекционным штаммом или инфекция, вызванная мутантом с дефицитом порина, ограничивающим доступ к противомикробным препаратам. в бактерии.^24,39 В связи с отсутствием информации о детерминантах врожденной резистентности бактериальных изолятов, ингибиторы β -лактам- β лактамаз следует использовать с осторожностью при лечении серьезной инфекции, вызванной продуцирующим ESBL K. pneumoniae as in vitro Чувствительность необязательно может предсказывать эффективность in vivo . Напротив, эмпирическое использование ингибиторов лактамазы β -лактам- β в отделениях интенсивной терапии, по-видимому, имеет небольшой, но значительный защитный эффект и снижает количество инфекций, вызванных продуцирующими ESBL K.пневмония . ⁴⁰ Повышенная заболеваемость и смертность, а также длительная госпитализация могут быть результатом инфицирования K. pneumoniae , продуцирующего БЛРС, в основном из-за задержки с надлежащим противомикробным лечением. ^20,41
Использование других антибиотиков, отличных от β -лактама, таких как хинолоны, было эффективным при лечении инфекций, вызванных продуцирующими ESBL организмами на животных моделях. ⁴² Однако редкие плазмиды, содержащие ген ESBL, также содержат гены устойчивости к хинолонам.⁴³ Отчеты показали тесную связь между производством БЛРС и устойчивостью к ципрофлоксацину, поскольку 18% штаммов, продуцирующих БЛРС, устойчивы к ципрофлоксацину. ⁴³ Следует сообщить о дальнейших клинических исследованиях хинолонов в лечении серьезных инфекций, вызванных организмами, продуцирующими БЛРС. Хотя хинолоны могут вызывать необратимое повреждение хрящей молодых животных ⁴⁴, у детей такая токсичность не наблюдалась. Тем не менее, до тех пор, пока не будут проведены фармакокинетические исследования и исследования безопасности хинолонов у недоношенных детей, использование хинолонов следует ограничить.
В настоящее время карбапенемы, то есть имипенем и меропенем, являются единственным классом противомикробных препаратов, которые неизменно оказывались эффективными против продуцирующих ESBL K. pneumoniae . Карбапенемы остаются стабильными в присутствии ферментов БЛРС, а небольшой компактный размер карбапенемов позволяет легко проходить через порины в грамотрицательные бациллы. Таким образом, карбапенемы часто являются предпочтительным противомикробным средством для лечения серьезных инфекций, вызванных организмами, продуцирующими БЛРС.Хотя имипенем использовался для лечения тяжелых инфекций во время вспышки возбудителя ESBL Klebsiella spp, его использование было связано с появлением устойчивых к имипенему Acinetobacter spp. ¹⁸
Стратегии инфекционного контроля
Чтобы контролировать распространение патогенов, продуцирующих БЛРС, необходимо применять соответствующие меры инфекционного контроля для всех пациентов, инфицированных или колонизированных бактериями, продуцирующими БЛРС. Эти меры включают эффективную гигиену рук и меры предосторожности при контакте со всеми колонизированными и инфицированными пациентами.⁴⁵ Медицинским работникам в отделениях интенсивной терапии нельзя разрешать носить искусственные ногти. Во время продолжительной вспышки может потребоваться более широкое расследование для поиска дополнительных резервуаров у колонизированных пациентов, медицинских работников и окружающей среды. ⁵ Также важно разумное использование и контроль противомикробных препаратов, особенно ограниченное использование цефалоспоринов широкого спектра действия. ^18,46 Это особенно важно в отделениях интенсивной терапии, где цефотаксим используется для лечения позднего сепсиса.
В заключение, инфекция, вызванная ESBL K. pneumoniae , увеличивается, особенно среди пациентов в отделениях интенсивной терапии. Этот патоген обычно обладает множественной лекарственной устойчивостью, и варианты лечения ограничены. Активное наблюдение за патогенами, продуцирующими БЛРС, в группах высокого риска должно проводиться с использованием соответствующих противомикробных методов. Прогрессирование заболевания произошло во время лечения антибиотиками, к которым имеется чувствительность in vitro к . Карбапенемы, то есть имипенем и меропенем, являются безопасными и эффективными антибиотиками для лечения тяжелой формы БЛРС K.pneumoniae у недоношенных детей.
Паспорта безопасности патогенов: Инфекционные вещества — Klebsiella spp.
Раздел I — Инфекционный агент
Имя
Klebsiella spp.
Синоним / перекрестная ссылка
Патогены человека включают K. pneumoniae, подвидов, pneumoniae, ozaenae, и rhinoscleromatis; K. oxytoca; K. granulomatis; K. Varicola; и К.сингапурский . K. planticola, K. terrigena, и K. orinthinolytica были переданы в род Raoultella ^{Footnote 1 Footnote 3}. K. pnuemoniae ранее была известна как палочка Фридлендера. K. granulomatis ранее была известна как Calymmatobacterium granulomatis . K. trevisanii , первоначально названная в 1983 г., была установлена как гетеротипический синоним для R. planticola и, следовательно, больше не распознается. K. mobilis (ранее K. aerogenes ), ранее известная как Enterobacter aerogenes , не подтверждена как принадлежность к роду Klebsiella и как таковая была удалена из рода ^{Footnote 1 Footnote 3}.
Характеристики
Klebsiella spp. являются грамотрицательными, неподвижными, обычно инкапсулированными палочковидными бактериями, принадлежащими к семейству Enterobacteriaceae ^{Footnote 1 Footnote 2}. Эти бактерии продуцируют лизиндекарбоксилазу, но не орнитиндекарбоксилазу, и обычно дают положительный результат в тесте Фогеса-Проскауэра.Члены семейства Enterobacteriaceae обычно являются факультативно анаэробными, их ширина составляет от 0,3 до 1,0 мм, а длина от 0,6 до 6,0 мкм. ^{Footnote 2}. Klebsiella spp. часто встречаются в слизистых колониях ^{Footnote 1 Footnote 2}. Род состоит из 77 капсульных антигенов (К-антигенов), ведущих к разным серогруппам.
Раздел II — Идентификация опасностей
Патогенность / токсичность
Klebsiella spp. были определены как важные частые возбудители внутрибольничной пневмонии (от 7 до 14% всех случаев), сепсиса (от 4 до 15%), инфекции мочевыводящих путей (ИМП; от 6 до 17%), раневых инфекций (от 2 до 4%), интенсивной Инфекции отделения интенсивной терапии (ОИТ) (от 4 до 17%) и неонатальные септицемии (от 3 до 20%) ^{Footnote 1}.Klebsiella spp. также могут вызывать бактериемии и инфекции печени и были изолированы от ряда необычных инфекций, включая эндокардит, первичный газосодержащий абсцесс средостения, перитонит, острый холецистит, крепитирующий мионекроз, пиомиозит, некротический фасциит, абсцесс поясничной мышцы, инфекции фасциального пространства голова и шея и септический артрит ^{Footnote 1}. Они также являются важными условно-патогенными микроорганизмами, особенно среди лиц с ослабленным иммунитетом. Факторы патогенности Klebsiella spp.включают адгезины, сидерофоры, капсульные полисахариды (CPL), липополисахариды клеточной поверхности (LPS) и токсины, каждый из которых играет определенную роль в патогенезе этих видов. В зависимости от типа инфекции и способа заразности клетки Klebsiella spp. может прилипать и атаковать эпителиальные клетки верхних дыхательных путей, клетки желудочно-кишечного тракта, эндотелиальные клетки или уроэпителиальные клетки с последующей колонизацией слизистых оболочек. Общие основные состояния включают алкоголизм, сахарный диабет, хроническое заболевание печени (цирроз), хроническую почечную недостаточность, рак, трансплантаты, ожоги и / или использование катетеров. ^{Footnote 1}.
Болезни органов дыхания:
K. pnuemoniae — основная причина внебольничных и внутрибольничных пневмоний и абсцессов легких. Чаще встречается инфекция верхней доли. Симптомы включают: лихорадку, озноб и лейкоцитоз с желеобразной мокротой из красной смородины. ^{Footnote 1}. Редкие осложнения включают инфекцию легких с некрозом и слущиванием всей доли.
K. ozaenae — вызывает озену, первичный атрофический ринит (АР), который вызывает хроническое воспаление носа. ^{Footnote 1}.
K. rhinoscleromatis — вызывает риносклерому (RS), хроническую гранулематозную инфекцию, которая преимущественно поражает полость носа. ^{Footnote 1}.
Инфекции центральной нервной системы (ЦНС):
K. pneumoniae и K. oxytoca — вызывают внебольничный менингит и абсцессы головного мозга. Клинические симптомы включают: головные боли, лихорадку, нарушение сознания, судороги и септический шок. ^{Footnote 1}.
K. ozaenae — связано с редкими случаями церебрального абсцесса и менингита ^{Footnote 1}.
ИМП:
Klebsiella spp. являются частой причиной ИМП. Значительная бактериурия была приписана K. ozaenae ^{Footnote 1}.
Заболевание печени:
K. pnuemoniae — важный возбудитель гнойных абсцессов печени с такими симптомами, как лихорадка, боль в правом верхнем квадранте, тошнота, рвота, диарея или боль в животе и лейкоцитоз.Абсцессы возникают преимущественно в правой доле и единичны.
Другие инфекции:
K. granulomatis — вызывает донованоз или гранулему, хроническое язвенное заболевание, которое в первую очередь поражает гениталии. ^{Footnote 1}. Симптомы включают развитие маленькой папулы или язвы в месте инокуляции, которые позже перерастают в большие красные язвы (поражения), которые распространяются вдоль влажных складок гениталий. ^{Footnote 1}.
Эпидемиология
Klebsiella spp.встречаются во всем мире, особенно в тропических и субтропических регионах, и распространены повсеместно, включая лесную среду, растительную почву, воду и слизистые оболочки видов-хозяев ^{Footnote 1}. Хотя они являются частыми возбудителями внебольничных пневмоний и бактериемий, большинство инфекций носят нозокомиальный характер (внутрибольничные; ~ 56% всех инфекций, вызываемых клебсиеллами). Klebsiella spp. считаются эндемическими для неонатальных отделений, и внутрибольничные вспышки, особенно в неонатальных отделениях, являются обычным явлением.Взрослые самцы более восприимчивы к заражению Klebsiella spp. чем взрослые женщины ^{Сноска 1}; однако Klebsiella spp. демонстрируют более высокие показатели колонизации среди новорожденных, которые могут прожить до месяцев, по сравнению с несколькими днями или неделями у взрослых. Риск заражения и уровень носительства Klebsiella spp. увеличивается с увеличением продолжительности пребывания в стационаре; Согласно одному исследованию ^{Footnote 1}, увеличение частоты носительства в течение 14 дней после госпитализации от 11% до 42%.Частота инфицирования и носительства также увеличивается при использовании противомикробных препаратов; это обычно приводит к развитию бета-лактамаз расширенного спектра (БЛРС), которые обеспечивают устойчивость к антибиотикам. ^{Footnote 1} ^{Footnote 4}.
K. pneumoniae является наиболее патогенным для человека среди всех видов Klebsiella, за которым следует K. oxytoca. K. ozaenae и K. rhinoscleromatis вызывают у людей специфические заболевания ^{Footnote 1}. K. granulomatis и K. varicola также были идентифицированы как патогенные для человека.K. singaporensis по-прежнему является новым явлением, и его патогенность для человека еще предстоит определить. Хотя количество инфекций ниже, чем у некоторых других патогенов, инфекции Klebsiella spp. демонстрируют значительную заболеваемость и смертность. K. pneumoniae встречается в носоглотке и кишечном тракте людей как сапрофит. ^{Footnote 1}. Это одна из основных причин внебольничной пневмонии. Это важная причина первичного абсцесса печени и микробных инфекций фасциального пространства у пациентов с диабетом в Азии, преимущественно на Тайване. ^{Footnote 1}.Обычно его выделяют от ожогов и укусов человека. В последнее время он стал все более частой причиной хронической диареи у ВИЧ-инфицированных взрослых в Африке. K. pnuemoniae и K. oxytoca являются важными возбудителями внебольничных менингитов и абсцессов головного мозга в Азии, преимущественно на Тайване. По некоторым данным, Klebsiella spp. ответственны за от 16 до 43% инфекций центральной нервной системы (ЦНС) и абсцессов головного мозга. Было показано, что экологические штаммы K. pneumoniae столь же вирулентны, как и клинические штаммы; однако, верно ли это для других видов Klebsiella spp.еще не определено ^{Footnote 1}.
Диапазон хостов
Люди ^{Сноска 1, сноска 2}, млекопитающие ^{Сноска 1} (включая лошадей, крупного рогатого скота, макак-резусов и белок, морских свинок, ондатр, лемуров и летучих мышей), водных животных (включая морских слонов, калифорнийских морских львов и гавань) тюленей), рептилий (включая змей, крокодилов и американских аллигаторов), птиц, насекомых и растений (бананы, рисовый сахарный тростник и кукурузу) ^{Footnote 1, Footnote 2}.Конкретно идентифицированные источники для некоторых видов Klebsiella spp. перечислены ниже:
K. pneumoniae — люди, лошади, крупный рогатый скот, хищные птицы и обычные для всех млекопитающих Австралии ^{Сноска 1}.
K. oxytoca — люди, млекопитающие (кольцехвостые опоссумы, планеры и летучие мыши) по всей Австралии и насекомые. ^{Footnote 1}.
K. Varicola — люди и растения ^{Footnote 1, Footnote 2}.
Инфекционная доза
Неизвестно.Согласно одному источнику, для нанесения ущерба требуется 10 ⁸ Klebsiella организмов на грамм фекалий. ^{Footnote 1}.
Режим передачи
Klebsiella spp. может передаваться через контакт кожи с загрязненными окружающей средой поверхностями и / или предметами ^{Footnote 1}; Примеры включают губки из люфы ^{сноска 1}, медицинское оборудование ^{сноска 4} и продукты крови. Фекальная передача также предполагалась в некоторых случаях бактериемии, вызванной Klebsiella spp.^{Сноска 1}.
K. rhinoscleromatis может передаваться от человека к человеку воздушно-капельным путем; однако для заражения требуется продолжительный контакт с инфицированными людьми. ^{Footnote 1}.
K. granulomatis передаются половым путем. Они также могут передаваться вертикально (от матери к ребенку) или при случайном заражении. Частота передачи между партнерами низкая (<50%) по сравнению с другими заболеваниями, передаваемыми половым путем.
Инкубационный период
Не совсем понятно.Согласно некоторым источникам, инкубационный период для K. granulomatis обычно составляет от 1 до 6 недель. ^{Footnote 1}.
Коммуникабельность
Представители Klebsiella spp. может передаваться от человека к человеку; однако период возможности сообщения неизвестен. Примерно у одной трети людей клебсиеллы переносятся в стуле. ^{Footnote 1}; уровень обнаружения по данным различных исследований варьируется от 5% до 36% ^{Footnote 4}. Частота обнаружения в носоглотке колеблется от 1% до 6%.Было показано, что персонал больниц часто носит клебсиеллы на руках. ^{Footnote 1}.
Раздел III — Распространение
Резервуар
Инфицированные люди (с симптомами болезни или без них) являются основным резервуаром для Klebsiella spp ^{Footnote 1, Footnote 2, Footnote 4}. Другие источники включают: инфицированных младенцев (обычно бессимптомных), колонизированных инвазивными штаммами Klebsiella spp. ^{Footnote 1}, больничные пациенты (для внутрибольничных инфекций), почва, поверхностные воды и некоторые растения ^{Footnote 5Footnote 6}.
Зооноз
Нет.
Векторы
Нет.
Раздел IV — Стабильность и жизнеспособность
Чувствительность к лекарствам
Klebsiella spp. известны своей устойчивостью к пенициллинам, особенно к ампициллину и карбенициллину. ^{Footnote 1}. Поскольку все больше и больше штаммов Klebsiella spp. по-видимому, развиваются и укрываются бета-лактамазы расширенного спектра (БЛРС), цефалоспориназы и карбапенемазы, устойчивость Klebsiella spp.до нынешних антибиотиков, похоже, увеличивается ^{Footnote 1, Footnote 2, Footnote 4}. Согласно результатам некоторых исследований, проведенных в Европе и США, диапазоны чувствительности были следующими: ^{Footnote 1}: цефтазидим (92-95%), цефтриаксон (96-98%), цефотаксим (96%), пиперациллин-тазобактам (90- 97%), имипен (98-100%), гентамицин (95-96%), амикацин (98-99%), триэтопримсульфаметоксазол (SXT) (88-90%). Значения резистентности, как правило, выше для штаммов, выделенных от пациентов в ОИТ, по сравнению с пациентами, не получавшими ОИТ.Пан-устойчивые изоляты были идентифицированы в примечании 7 Индийского субконтинента.
Восприимчивость к дезинфицирующим средствам
Грамотрицательные бактерии обычно чувствительны к ряду дезинфицирующих средств, включая фенольные соединения, гипохлориты (1% гипохлорит натрия), спирты (70% этанол), формальдегид (18,5 г / л; 5% формалин в воде), глутаральдегид и йод (0,075 г / л) ^{Сноска 8}.
Физическая инактивация
Снижение роста и метаболической активности К.pneumoniae при температурах> 35 ° C. ^{Footnote 9}. Значительное снижение роста было продемонстрировано при 60 ° C; однако бактерии все еще проявляют некоторую метаболическую активность (т. е. не полностью инактивированы). Бактерии также чувствительны к влажному теплу и сухому теплу. ^{Footnote 10}.
Выживание вне хозяина
Klebsiella spp. быстро растут на поверхности картофеля и салата с численностью более 103 организмов на 1 г поверхности ^{Footnote 1}.Они были обнаружены в губках из люфы, сделанных из овощных тыкв. Они также хорошо выживают в древесине и опилках. Они плохо растут на коже человека и обычно существуют у инфицированных людей и / или поверхностей, а также в окружающей среде; поверхностные воды, сточные воды, почва и растения, где они могут сохраняться в течение длительного периода времени ^{Footnote 4}.
Раздел V — Первая помощь / Медицинская
Наблюдение
Наблюдать за симптомами. Другие тесты включают выделение штаммов бактерий или типирование различных изолятов.Это часто необходимо для расследования эндемических и эпидемических внутрибольничных инфекций, а также для эпидемиологических исследований из окружающей среды. ^{Footnote 1, Footnote 4}. Klebsiellae можно выделить путем выращивания в среде. Хотя существуют определенные хромогенные среды, доступные для выделения этих бактерий из конкретных образцов, Klebsiellae хорошо растут в крови и недифференциальных средах. ^{Footnote 1}. Биотипирование и серотипирование — две распространенные формы методов типирования, используемых для типирования Klebsiella spp.^{Сноска 1, Сноска 4}. Серотипирование — это наиболее широко используемый метод типирования этих бактерий, который включает обнаружение капсульных антигенов с помощью антисывороток. Тесты серотипирования включают: реакцию подавления, иммунофлуоресценцию, осаждение из геля двойной диффузией, противоточные иммуноэлектрофорезы, коагуляцию Staphylococcus и методы коагуляции латекса ^{Footnote 1}. Биотипирование не является предпочтительным из-за большого количества реакций и количества времени, необходимого для выполнения этих тестов. ^{Footnote 1, Footnote 4}.Также разрабатываются методы молекулярного типирования, хотя они обычно не используются. К ним относятся: плазмидный анализ, риботипирование, PFGE и анализ случайной амплификации полиморфной ДНК, все из которых были успешно использованы для эпидемиологического отслеживания штаммов. ^{Footnote 1}.
Примечание : Не все методы диагностики доступны во всех странах.
Первая помощь / лечение
При необходимости назначить соответствующую антибактериальную терапию ^{Footnote 1, Footnote 2}.
Иммунизация
Нет.
Профилактика
Нет.
Раздел VI — Лабораторная опасность
Лаборатория — приобретенные инфекции
Зарегистрирован 1 случай лабораторной инфекции, вызванной K. pneumoniae до 1976 г. ^{Footnote 11}.
Источники / образцы
Источники для клинических образцов Klebsiella spp. в первую очередь включают образцы из дыхательных путей (RT; образцы из носоглотки) и мочевыводящих путей (UT) ^{Footnote 1} ^{Footnote 2}.Выявленные конкретные источники включают ^{Footnote 2}:
K. pneumoniae — все участки тела человека, наиболее часто встречающиеся RT и UT
K. ozaenae — выделения из носа наиболее частые, RT, UT и кровь
K. rhinoscleromatis — выделения из носа
K. oxycota — все участки человеческого тела
K. granulomatis — половые пути
K. Varicola — кровь, банановые растения ^{Сноска 1}, рис, сахарный тростник и кукуруза
К.singaporensis — почва (из корней сахарного тростника) ^{Footnote 1, Footnote 12}
Основные опасности
Прямой контакт слизистых оболочек с загрязненными поверхностями и / или предметами, а также вдыхание инфекционных выделений, передающихся по воздуху, случайная парентеральная инокуляция и / или проглатывание.
Особые опасности
Нет.
Раздел VII — Контроль воздействия / индивидуальная защита
Классификация групп рисков
Группа риска 2 ^{Сноска 13}.Группа риска, связанная с « Klebsiella spp.» отражает род в целом, но не обязательно отражает классификацию групп риска для каждого вида в пределах рода.
Требования к содержанию
Помещения, оборудование и операционные методы уровня сдерживания 2 для работы с инфекционными или потенциально инфекционными материалами, животными или культурами ^{Сноска 14}. Требования к содержанию и эксплуатации могут различаться в зависимости от вида, подвида и / или штамма.
Защитная одежда
Лабораторный халат. Перчатки при неизбежном прямом контакте кожи с инфицированными материалами или животными. Защита глаз должна использоваться там, где существует известный или потенциальный риск воздействия брызг. ^{Footnote 14}.
Прочие меры предосторожности
Все процедуры, при которых могут образовываться аэрозоли, или связанные с высокими концентрациями или большими объемами, должны проводиться в боксе биологической безопасности (BSC). Использование игл, шприцев и других острых предметов должно быть строго ограничено.Дополнительные меры предосторожности следует учитывать при работе с животными или крупномасштабной деятельности. ^{Footnote 14}.
Раздел VIII — Обращение и хранение
Разливы
Дайте аэрозолям осесть и, надев защитную одежду, аккуратно накройте разлив бумажными полотенцами и нанесите соответствующее дезинфицирующее средство, начиная с периметра и двигаясь к центру. Перед очисткой дайте достаточно времени для контакта. ^{Footnote 14}.
Утилизация
Обеззараживать все отходы, которые содержат инфекционные организмы или контактировали с ними, перед их утилизацией в автоклаве, химической дезинфекции, гамма-облучением или сжиганием. ^{Footnote 14}.
Хранилище
Инфекционный агент должен храниться в герметичных контейнерах, имеющих соответствующую маркировку ^{Footnote 14}.
Раздел IX — Нормативная и другая информация
Нормативная информация
Импорт, транспортировка и использование патогенных микроорганизмов в Канаде регулируется многими регулирующими органами, включая Агентство общественного здравоохранения Канады, Министерство здравоохранения Канады, Канадское агентство по инспекции пищевых продуктов, Министерство окружающей среды Канады и Транспорт Канады.Пользователи несут ответственность за соблюдение всех соответствующих законов, постановлений, руководств и стандартов.
Обновлено
Сентябрь 2011 г.
Подготовлено
Управление по регулированию патогенов, Агентство общественного здравоохранения Канады.
Хотя информация, мнения и рекомендации, содержащиеся в этом Паспорте безопасности патогенов, собраны из источников, которые считаются надежными, мы не несем ответственности за точность, достаточность или надежность, а также за любые убытки или травмы, возникшие в результате использования информации.Часто обнаруживаются новые опасности, и эта информация может быть не полностью актуальной.
Авторские права ©
Агентство общественного здравоохранения Канады, 2011 г.
Канада
Список литературы
Три вида клебсиелл вызывают опасные для жизни инфекции и имеют общие гены лекарственной устойчивости — ScienceDaily
Группа исследователей из США обнаружила, что три разных вида бактерий Klebsiella могут вызывать опасные для жизни инфекции у пациентов больниц и что все три имеют общие гены которые придают устойчивость к наиболее часто используемым антибиотикам.Исследование, опубликованное на этой неделе в mSphere®, журнале открытого доступа Американского общества микробиологов, улучшает понимание врачами инфекций, вызываемых вирусом Klebsiella , и может указать на более эффективные способы борьбы со штаммами этих бактерий с множественной лекарственной устойчивостью.
«С 2001 года мы наблюдаем глобальный взрыв устойчивых к лекарствам инфекций Klebsiella », — говорит С. Уэсли Лонг, младший медицинский директор лаборатории диагностической микробиологии в Хьюстонской методистской больнице в Техасе и ведущий автор исследования.«Это устойчивые к лекарствам бактерии, лечить которые становится все труднее, потому что они устойчивы ко многим доступным антибиотикам».
Клебсиелла — это тип бактерий, вызывающих инфекции, связанные со здоровьем, которые могут принимать форму пневмонии, сепсиса, раневых инфекций и инфекций мочевыводящих путей. В 2011 году в США число инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, превысило 700 000, и в некоторых исследованиях до 50 процентов инвазивных инфекций K. pneumoniae с множественной лекарственной устойчивостью закончились смертельным исходом.За последние два десятилетия во всем мире росло число устойчивых к антибиотикам инфекций Klebsiella .
Лонг и его команда хотели исследовать природу инфекций Klebsiella , изучив обширную всестороннюю популяционную коллекцию образцов. «Нам нужно понять патоген на уровне популяции, тогда мы сможем использовать бактериальные геномы для прогнозирования вирулентности, устойчивости штамма к антибиотикам или смертности», — отмечает Лонг, клинический микробиолог.
В исследовании, ранее опубликованном в mBio ®, исследователи секвенировали весь геном 1,777 Klebsiella из клинических образцов в районе Большого Хьюстона. До сих пор считалось, что Klebsiella pneumoniae является виновником наиболее серьезных инфекций Klebsiella . Однако исследовательская группа заметила группу из 28 образцов, которые выглядели генетически иначе.
«По сути, мы построили генетическое генеалогическое древо, и 28 штаммов вышли из него как выбросы.Это двоюродные братья и сестры, которых пять раз удалили, и мы задались вопросом, что эти парни делают на семейном воссоединении? »- говорит Лонг.
Оказалось, что, в зависимости от коллекции, от 2 до 12 процентов образцов были ошибочно идентифицированы как Klebsiella pneumoniae и фактически представляли собой два родственных вида: Klebsiella varicola или Klebsiella quasipneumoniae . K. Varicola и K. quasipneumoniae ранее были охарактеризованы как комменсальные непатогенные бактерии желудочно-кишечного тракта или сельскохозяйственные вредители, которые редко вызывали инфекции у человека.Команда Лонга обнаружила, что они способны вызывать инвазивные и тяжелые инфекции у пациентов с таким же уровнем смертности, как K. pneumoniae .
«Эти двоюродные братья K. pneumoniae не только вызывают похожие инфекции, но они также обладают этими мощными генами лекарственной устойчивости», — говорит Лонг. Секвенирование всего присутствующего бактериального генетического материала показало, что все три вида Klebsiella имеют общие гены устойчивости к лекарствам, включая как минимум два гена, которые кодируют мощные ферменты, которые отключают широкий спектр пенициллиноподобных антибиотиков.
Лонг считает, что эти результаты вряд ли повлияют на лечение инфекции, вызванной вирусом Klebsiella . «Но в гонке за попытками понять патогены и найти новые антибиотики или методы лечения, выходящие за рамки традиционных антибиотиков, это расширяет наши знания о том, как выглядят патогенные бактерии Klebsiella ». Другие генетические черты, общие для трех видов Klebsiella , могут быть использованы как слабость ахиллесовой пяты и устранены новыми целевыми методами лечения.Лонг также говорит, что в работе подчеркивается важность проведения крупных, всеобъемлющих, популяционных исследований, которые внимательно рассматривают генетические образцы пациентов: «Если вы не смотрите, вы не знаете, что вам не хватает».
История Источник:
Материалы предоставлены Американским обществом микробиологов . Примечание. Содержимое можно редактировать по стилю и длине.
Изучение частоты инфицирования клебсиеллой и лекарственной устойчивости среди стационарных и амбулаторных пациентов, обращающихся в больницу Амира аль-Моменина, Гераш, Иран | Ген, клетка и ткань
Enterobacteriaceae Семейство представляет собой самый большой гетерогенный набор грамотрицательных бацилл в медицине, насчитывающий около 40 идентифицированных родов и 150 видов.Менее 20 родов ответственны за более 95% инфекций этого семейства. Эти бактерии могут вызывать различные заболевания у людей, составляющие от 30 до 35% всех сепсисов, более 70% инфекций мочевыводящих путей и большинство кишечных инфекций (1, 2).
В течение последнего десятилетия, в связи с важностью Staphylococcus в создании внутрибольничных инфекций, в этом отношении одновременно рассматривались грамотрицательные бациллы. Одной из основных проблем малых и крупных больниц в последние годы были вспышки, вызванные этими микроорганизмами.Грамотрицательные бактерии с положительным VP (Voges-Proskauer), включая Klebsiella , известны как нормальная флора кишечника и ротовой полости. Они обнаруживаются в виде сапрофитных бактерий в пищеварительном тракте и дыхательных путях здоровых людей и даже новорожденных (3). В последние годы стало ясно, что Klebsiella вызывает множество инфекций в различных случаях, и значимость этой группы организмов как причины острой инфекции была установлена у госпитализированных пациентов.
Род Klebsiella включает группу факультативных анаэробов, оксидазонегативных, неподвижных, инкапсулированных грамотрицательных бацилл или коккобацилл, принадлежащих к семейству Enterobacteriaceae (4, 5). Клебсиелла — условно-патогенный микроорганизм, вызывающий сепсис, бактериемию, неонатальный энтерит, менингит, инфекцию мочевыводящих путей и инфекцию мягких тканей. Клебсиелла признана возбудителем внутрибольничных инфекций человека.Госпитализированные пациенты с ослабленной иммунной системой и пациенты с сопутствующими заболеваниями, такими как сахарный диабет и хронические респираторные заболевания, являются основными мишенями для Klebsiella (6, 7).
Основываясь на биохимических характеристиках, этот род подразделяется на такие виды, как Klebsiella pneumoniae ( K. pneumoniae ) с подвидами, включая Pneumoniae, Ozaenae и Rhinoscleromatis, Klebsiella oxyoultella planta, Ravena oxytella и Raoultella ornithinolytica . Klebsiella pneumonia — самый важный вид среди других видов. Основная причина важности этой бактерии — ее роль в развитии приобретенной бактериальной пневмонии в обществе, особенно у хронических алкоголиков (4). Алкоголики и люди с пониженной функцией легких подвергаются высокому риску пневмонии, поскольку у них нет возможности орального аспирации секретов из нижних дыхательных путей. Вызванная видами Klebsiella , пневмония обычно приводит к некротическому разрушению альвеолярных пространств, образованию отверстий и выделению кровянистой мокроты (1, 7).
С момента появления организмов, известных как бактерии, людям всегда было сложно найти эффективные лекарства от их инфекций. Бактерии оснащены эффективными механизмами устранения антимикробных свойств антибиотиков (8). Пенициллин и цефалоспорин — антибиотики, которые широко используются в качестве эффективных агентов для предотвращения синтеза клеточной стенки бактерий. Эти препараты известны как бета-лактамные препараты (9). Некоторые бактерии, такие как Staphylococcus aureus, Haemophilus influenza, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli ( E.coli ), и некоторые из бактерий Enterobacteriaceae , в частности Pseudomonas , обладают потенциальным механизмом разрушения β-лактамного цикла этих лекарств. Этот механизм действует через фермент β-лактамаза, который образуется в виде двух типов хромосомной β-лактамазы (у большинства грамотрицательных бактерий) и опосредованной плазмодиями β-лактамазы (у Staphylococcus aureus ).
Klebsiella pneumoniae и, в меньшей степени, Klebsiella oxytoca являются клинически важными видами, поскольку они широко колонизируются у госпитализированных пациентов.Оба штамма обладают множественной устойчивостью к цефалоспоринам и аминогликозидам. Согласно статистическим данным, опубликованным в Европе, от 10 до 20% из штаммов Klebsiella oxytoca устойчивы к азтреонаму (10), цефалоспоринам третьего поколения (за исключением цефтазидима) и комбинациям ингибиторов β-лактамаз. Инфекции мочевыводящих путей являются наиболее распространенным типом внутрибольничных инфекций, на которые приходится от 23% до 43% от общего числа внутрибольничных инфекций (11). Klebsiella играет роль в 6-17% инфекций мочевыводящих путей.Более того, вторая после E. coli , грамотрицательная бактерия, Klebsiella является наиболее важной причиной инфекций мочевыводящих путей. В турецком отчете 2004 г. указано, что среди 411 исследованных образцов инфекций мочевыводящих путей 41% были связаны с E. coli и 40% — с Klebsiella pneumoniae .
Клебсиелла также считается второй причиной бактериемии после Pseudomonas aeruginosa у пациентов с ожогами. С 1984 года Klebsiella pneumonia была известна как причина внутрибольничных инфекций и переносчик множественной резистентности.Эти бактерии благодаря приобретению плазмиды, кодирующей β-лактамазы расширенного спектра (ESBL) и ферментов, модифицирующих аминогликозиды, стали устойчивыми к нескольким бета-лактамам, включая цефалоспорины расширенного спектра и аминогликозиды. Следовательно, вероятность лечения антибиотиками инфекций Klebsiella мала (12).
Потенциальная профилактическая ценность бычьего молозива при некротическом энтероколите у новорожденных: исследование прикрепления бактерий, уровней антител и продукции цитокинов in vitro | Возбудители и болезни
573″ data-legacy-id=»ss0″> Введение
Некротический энтероколит (НЭК) является ведущей причиной заболеваемости и смертности недоношенных новорожденных с низкой массой тела при рождении (Holman et al., 1997; Hsueh et al. , 2002; Noerr, 2003). Он характеризуется некротическим поражением кишечника, требующим лечения антибиотиками и, в тяжелых случаях, хирургического вмешательства (Bell et al. , 1978; Hsueh et al. , 2002). Тяжесть заболевания варьируется от предполагаемых случаев с неспецифическими признаками до запущенных случаев с шоком, диссеминированным внутрисосудистым свертыванием, ацидозом и перитонитом (Hsueh et al. , 2002; Noerr, 2003). Ряд стадий был определен в соответствии с системными, желудочно-кишечными и рентгенологическими признаками кишечного пневмоза или свободного воздуха в воротной вене, важных детерминант для подтверждения диагноза НЭК (Bell et al., 1978; Noerr, 2003). Терминал подвздошной кишки и толстой кишки являются наиболее частыми участками травм, но весь желудочно-кишечный тракт является восприимчивым (Albanese & Rowe, 1995; Kosloske, 2001; Noerr, 2003).
Несмотря на более чем 30-летние исследования, единственная этиология НЭК не выяснена. Большинство исследователей верят в многофакторный патогенез, включая следующие: энтеральное питание; заселение кишечного тракта внутрибольничными бактериями; прикрепление бактерий к эпителию и последующее перемещение через стенку кишечника; и кишечная ишемия (Kosloske, 1994; Dai & Walker, 1999; Hoy et al., 2000; Kafetzis et al. , 2003). Недоношенность, по-видимому, является единственным постоянным фактором риска, а уязвимость недоношенного ребенка перед НЭК, вероятно, частично является отражением незрелости кишечного тракта и иммунной системы (Hoy et al. , 2000; Kosloske, 2001). Бактерии явно играют роль в развитии НЭК, так как начало заболевания почти всегда следует за пероральным кормлением и формированием кишечных микробных сообществ. Более того, газ, который накапливается внутри полости рта, содержит водород, образующийся в результате бактериальной ферментации (Hoy et al., 2000; Hsueh et al. , 2002). Ни один отдельный вид микробов не был связан с NEC, и в большинстве случаев члены нормальных микробных сообществ являются единственными обнаруженными организмами (Миллар и др. , 1996; Питер и др. , 1999; Хой и др. др. , 2000). Из видов бактерий, связанных с NEC, бактерии, принадлежащие к семейству Enterobacteriaceae , обычно связаны с этим заболеванием, и эксперименты на животных убедительно подтверждают патогенетическую роль эндотоксина (Hoy et al., 1990; Питер и др. , 1999; Hsueh et al. , 2002).
Хорошо известно, что первая стадия колонизации любой слизистой оболочки — это прилипание колонизирующих бактерий. Один из возможных подходов к профилактике NEC может заключаться в предотвращении прикрепления бактерий к эпителию до тех пор, пока кишечный тракт не достигнет достаточного уровня зрелости, чтобы быть полностью функциональным. Было показано, что иммуноглобулин IgA, присутствующий в грудном молоке, предотвращает колонизацию эпителиальной поверхности, связываясь с бактериями и подавляя прилипание (Van de Perre, 2003).Иммуноглобулины, полученные из молозива животных, обладают потенциалом делать то же самое, и предыдущее исследование показало, что высушенное распылением бычье молозиво, полученное из первых пяти дойок новозеландских коров, содержит значительные уровни антител против широкого спектра патогенных и непатогенных микроорганизмов (McConnell и др. , 2001). Однако НЭК — это заболевание сложной этиологии, и рассмотрение любого профилактического лечения должно включать знания о его возможном влиянии на воспалительный путь.Фактор активации тромбоцитов, фактор некроза опухоли (TNF) и различные интерлейкины (IL), включая IL-6 и IL-8, вовлечены в патогенез NEC (Hsueh et al. , 2002; Kafetzis et al. , 2003; Noerr, 2003). В качестве первого этапа оценки профилактического потенциала бычьего молозива было проведено исследование in vitro .
Первой целью исследования было выявление численно преобладающих культивируемых видов Enterobacteriaceae , присутствующих в фекалиях новорожденных с НЭК и без них, и определение того, содержит ли высушенное распылением обезжиренное молозиво коров против них антитела IgA и IgG1.Вторая цель состояла в том, чтобы исследовать, снижает ли молозиво прилипание этих видов бактерий к клеточной линии, полученной из толстой кишки. Третья цель состояла в том, чтобы определить, регулируется ли молозивом повышенная или пониженная продукция цитокинов IL-6 и TNF-α и хемокина IL-8 в моноцитарных клеточных линиях и клеточных линиях, полученных из толстой кишки.
584″ data-legacy-id=»ss2″> Младенцы
15 младенцев, участвовавших в исследовании, были недоношенными, поступившими в отделение интенсивной терапии новорожденных больницы Данидин в течение 17 месяцев.Согласие на сбор образцов кала было получено от информированных родителей, а этическое одобрение исследования было предоставлено Комитетом по этике Управления финансирования здравоохранения, Данидин. Статус НЭК определялся по следующим клиническим показаниям: вздутие живота; желчный аспират; кровь в стуле; и кишечный пневматоз на рентгенограмме. Младенцы были подтверждены как положительные по NEC (NEV + ve) по наличию кишечного пневматоза или перитонита. У младенцев с отрицательным результатом NEC (NEC-ve) не было никаких клинических показаний, и младенцы были определены как младенцы с подозрением на NEC, если пневматоз кишечника отсутствовал, но имелось одно или несколько других клинических показаний.Младенцы NEC-ve были выбраны в качестве контроля, имеющие такой же срок беременности, что и младенцы NEC-ve.
589″ data-legacy-id=»ss4″> ELISA
Для этого эксперимента бактериальные изоляты разных видов были случайным образом выбраны из пулов изолятов, использованных для анализа адгезии. Затем из дополнительных младенцев случайным образом отбирали изоляты, чтобы в коллекции были представлены все виды, извлеченные из образцов фекалий младенцев как NEC + ve, так и NEC-ve.Высушенное распылением обезжиренное бычье молозиво, содержащее 15% иммуноглобулина по данным ВЭЖХ (Baymilk, Edgecumbe, Новая Зеландия), и сухое обезжиренное молоко (торговая марка Anchor) были протестированы на антитела IgG1 и IgA против этих видов с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) в соответствии с к методу МакКоннелла (2001). Результаты выражали как конечные титры Log ₁₀, то есть 10-кратное разведение, при котором средняя абсорбция лунок в четырех экземплярах соответствовала таковой для обезжиренного молока, не содержащего иммуноглобулин.
597″ data-legacy-id=»ss6″> Цитокиновые анализы
Человеческие моноцитарные клетки THP-1 (ATCC TIB-202) выращивали в суспензионной культуре в среде RPMI 1640 с добавлением 5% фетальной телячьей сыворотки, 1% стрептомицина и 1% пенициллина (Gibco BRL). Клетки HT-29 выращивали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM; Gibco BRL), с добавлением 5% фетальной телячьей сыворотки, 1% стрептомицина и 1% пенициллина (Gibco BRL). Клетки HT-29 (1 мл) высевали в 24-луночные планшеты (Nunc) в концентрации 5 × 10 ⁵ клеток мл ^-1 и инкубировали в течение ночи при 37 ° C в 5% CO ₂.
Escherichia coli O111: липополисахарид B4 (LPS; Sigma) был восстановлен в PBS Дульбекко в концентрации 1 мг / мл ^-1. Бычье молозиво и сухое обезжиренное молоко восстанавливали в среде для культивирования тканей (10% мас. / Об.). Клетки THP-1 собирали центрифугированием (250 г × 7 мин), разбавляли до 5 × 10 ⁵ клеток мл ^-1 в среде RPMI с 2% фетальной телячьей сывороткой и высевали в 24-луночные планшеты. (Nunc). Для клеток HT-29 питательную среду заменяли свежей DMEM, содержащей 2% FCS.Обезжиренное молоко и молозиво добавляли в лунки в трех экземплярах, чтобы получить конечную концентрацию 3,5%. Добавляли ЛПС до конечной концентрации 1 мкг мл ^-1. Контрольные лунки в трех повторностях содержали либо LPS, либо PBS. Планшеты инкубировали при 37 ° C в 5% CO ₂ и супернатанты собирали через шесть и 24 часа и хранили при -70 ° C. IL-8, IL-6 и TNF-α анализировали с использованием анализа на основе шариков Bioplex ™ (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA) в соответствии с инструкциями производителя.
605″ data-legacy-id=»ss8″> Статистика
средневзвешенных значений и стандартных ошибок были получены с использованием средних значений степеней приверженности, а значения P были определены с помощью anova. Результаты анализа цитокинов сравнивали с использованием тестов Anova и Tukey posthoc, а распределение различных видов бактерий в группах младенцев, исследованных с использованием точного вероятностного теста Фишера.
609″ data-legacy-id=»ss10″> Клинические данные
Средняя масса тела при рождении и гестационный возраст шести младенцев с диагнозом НЭК в соответствии с установленными критериями составляли 1135 г и 29,2 недели соответственно. Было четыре ребенка с подозрением на НЭК (средний вес при рождении / гестационный возраст составлял 2181 г на 34,6 недели) и пять младенцев без НЭК (средний вес при рождении / гестационный возраст составлял 1520 г / 31 неделю).
Младенцы NEC + ve38 NEC − ve 917 917 Виды ( n = 6) ( n = 5) ( n = 4) ( n = 15)8 1 1 0 2 Escherichia coli 7 (3) 13 (2) 1 Enter 21677717 (4) 1 10 (2) 31 Klebsiella oxytoca 13 (2) 26 (4) 14 (2) 53 К.pneumoniae ssp. pneumoniae 2 (1) 10 (4) 0 12 Serratia marcescens 3 (2) 3 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1) S. liquefaciens 0 1 0 1 Proteus mirabilis 1 1 917 Всего 917 917 56 35 138 cloacae 917 917 38 917 917 917 917 917
Младенцы
NEC + ve NEC − ve 938 937 917 917 917 917 917 917 = 6) ( n = 5) ( n = 4) ( n = 15)
Citrobacter koseri / amalonaticus 1 1 0 2
Escherichia coli 7 (3) 38 13 (2) 1 38 20 (4) 1 10 (2) 31
Klebsiella oxytoca 13 (2) 26 (4) 917 14 (2) 917
к.pneumoniae ssp. pneumoniae 2 (1) 10 (4) 0 12
Serratia marcescens 3 (2) 3 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1)
S. liquefaciens 0 1 0 1
Proteus mirabilis 1 1 56 35 138
Таблица 1
Идентичность Enterobacteriaceae изолятов, культивируемых из фекалий младенцев с NEC и без них
917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 NEC − ve 917 Всего 917 917
Подозреваемый NEC Всего
Виды ( n = 6) ( n = 5) ( n = 4) ( n = 15)
Citrobacter koseri / amalonaticus 1 1
Escherichia coli 7 (3) 13 (2) 1 21
Enterobacter cloacae 20 (4) 917 937 917 917) 31
Klebsiella oxytoca 13 (2) 26 (4) 14 (2) 53
K.pneumoniae ssp. pneumoniae 2 (1) 10 (4) 0 12
Serratia marcescens 3 (2) 3 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1)
S. liquefaciens 0 1 0 1
Proteus mirabilis 1 1 56 35 138
cloacae 917 Всего 917 917
Младенцы
NEC + ve NEC − ve 938 937 917 917 917 917 917 917 = 6) ( n = 5) ( n = 4) ( n = 15)
Citrobacter koseri / amalonaticus 1 1 0 2
Escherichia coli 7 (3) 38 13 (2) 1 38 20 (4) 1 10 (2) 31
Klebsiella oxytoca 13 (2) 26 (4) 917 14 (2) 917
к.pneumoniae ssp. pneumoniae 2 (1) 10 (4) 0 12
Serratia marcescens 3 (2) 3 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1) 10 (1)
S. liquefaciens 0 1 0 1
Proteus mirabilis 1 1 56 35 138
373737373737 Log ₁₀ титров конечной точки) Виды Младенец IgA IgG1 Citrobacter koseri / amalon. NEC + 5 6 Enterobacter cloacae NEC + 4 6 Escherich96 937 917 917 917 917 937 917 917 917 937 937 917 937 917 937 coli NEC− 4 6 Klebsiella oxytoca NEC + 4 5 K.oxytoca NEC− 5 6 K. pneumoniae NEC + 4 6 937 K. pneumoniae 937 917 917 917 917 9176 Proteus mirabilis NEC + 5 5 P. mirabilis NEC− 5 51795 8 9173 6 С.liquefaciens NEC− 4 5 917 917
Антитело
937 937 917 917 917 937 917 937 917 917 917 917 Младенческий IgA IgG1
Citrobacter koseri / amalon. NEC + 5 6
Enterobacter cloacae NEC + 4 6
Escherich96 937 917 917 917 917 937 917 917 917 937 937 917 937 917 937 .coli NEC− 4 6
Klebsiella oxytoca NEC + 4 5 9173 917 9173 Ntoxy
K. pneumoniae NEC + 4 6
K. pneumoniae NEC– 4 5
17
8 917 5
П.mirabilis NEC− 5 5
Serratia marcescens NEC + 4 6
937−917 9178 9178 9178 917 938 937EC 9178 9178 S. lique
Таблица 2
Log ₁₀ конечных титров IgA и IgG1 в бычьем молозиве против Enterobacteriaceae видов, выделенных от недоношенных новорожденных с NEC и без них
937 K. pneumoniae 937 917 917 917 917 91768 9173
17 917 917 917 (Log ₁₀ титров конечной точки)
Виды Младенцы IgA IgG1
Citrobacter koseri / amalon. NEC + 5 6
Enterobacter cloacae NEC + 4 6
Escherich96 937 917 917 917 917 937 917 917 917 937 937 917 937 917 937 coli NEC− 4 6
Klebsiella oxytoca NEC + 4 5
K.oxytoca NEC− 5 6
K. pneumoniae NEC + 4 6
Proteus mirabilis NEC + 5 5
P. mirabilis NEC− 5 51795 6
С.liquefaciens NEC− 4 5
917 917
Антитело
937 937 917 917 917 937 917 937 917 917 917 917 Младенческий IgA IgG1
Citrobacter koseri / amalon. NEC + 5 6
Enterobacter cloacae NEC + 4 6
Escherich96 937 917 917 917 917 937 917 917 917 937 937 917 937 917 937 .coli NEC− 4 6
Klebsiella oxytoca NEC + 4 5 9173 917 9173 Ntoxy
K. pneumoniae NEC + 4 6
K. pneumoniae NEC– 4 5
17
8 917 5
П.mirabilis NEC− 5 5
Serratia marcescens NEC + 4 6
937- 9178 9178 9178 917 917 938 937EC 9178 S. lique
NEC + ve младенцы Enterobacter cloacae 1 12.73 (4,69) 5,63 (1,70) 11,16 (1,74) Escherichia coli 1 9,53 (1,23) 3,78 (1,03) 975 (1,75) 975 (1,75) Klebsiella oxytoca 6 13,55 (4,21) 6,14 (0,95) 12,51 (5,1) K. pneumoniae 2 9173,01 13.26 (3,09) Serratia marcescens 1 11,76 (0,44) 4,00 (1,63) 11,00 (3,00) NEC −ve infants36 9173 NEC −ve413636 9173 . 1 3,63 (1,69) 3,86 (0,95) 4,24 (0,45) E. coli 1 12,16 (1,08) 3,83 (0,4037) 3,83 9,4037 81716 (0,67) K. oxytoca 7 18,65 (6,40) 6,81 (1,69) 16,45 (5,36) 1 К. 0,67) 4,36 (0,51) 10,31 (1,09) S. marcescens 3 31,89 (4,43) 10,35 (4,65) Штаммы 17,81738 917 917 917 5,22 Контроль E.coli O111 (+ ve) 1 17,57 (1,08) 3,51 (1,08) 12,97 (0,54) Citrobacter NA (−ve) 3,337 917 2,16 (0,81) 4,05 (0,54)
Enterobacteriaceae видов Кол-во изолятов Необработанные Молозиво крупного рогатого скота 9177 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917
Enterobacter cloacae 1 12.73 (4,69) 5,63 (1,70) 11,16 (1,74)
Escherichia coli 1 9,53 (1,23) 3,78 (1,03) 975 (1,75) 975 (1,75) Klebsiella oxytoca 6 13,55 (4,21) 6,14 (0,95) 12,51 (5,1)
K. pneumoniae 2 9173,01 13.26 (3,09)
Serratia marcescens 1 11,76 (0,44) 4,00 (1,63) 11,00 (3,00)
NEC −ve infants 36 9173 NEC −ve41 36 36 9173 . 1 3,63 (1,69) 3,86 (0,95) 4,24 (0,45)
E. coli 1 12,16 (1,08) 3,83 (0,4037) 3,83 9,4037 81716 (0,67)
K. oxytoca 7 18,65 (6,40) 6,81 (1,69) 16,45 (5,36)
1 К. 0,67) 4,36 (0,51) 10,31 (1,09)
S. marcescens 3 31,89 (4,43) 10,35 (4,65) Штаммы 17,81738 917 917 917 5,22 Контроль
E.coli O111 (+ ve) 1 17,57 (1,08) 3,51 (1,08) 12,97 (0,54)
Citrobacter NA (−ve) 2,16 (0,81) 4,05 (0,54)
Таблица 3
Влияние бычьего молозива по сравнению с обезжиренным молоком на прилипание Enterobacteriaceae , выделенных от младенцев NEC + ve и NEC-ve к клеткам HT-29
55 (4,21) K. oxytoca E. ve)
Enterobacteriaceae видов No.изолятов Необработанные Молозиво крупного рогатого скота Обезжиренное молоко
Младенцы NEC + ve
Enterobacter cloacae 937 1 9173 738 (4,6173) 9173 9173 9173 9173 9173 1,74)
Escherichia coli 1 9,53 (1,23) 3,78 (1,03) 8,45 (1,75)
Klebsiella 6179 6,14 (0,95) 12,51 (5,1)
K. pneumoniae 2 14,88 (4,01) 5,33 (1,33) 13,21738 9,0179) Serratia marcescens 1 11,76 (0,44) 4,00 (1,63) 11,00 (3,00)
NEC −ve младенцы
Citrobacalon koseri 1 3.63 (1,69) 3,86 (0,95) 4,24 (0,45)
E. coli 1 12,16 (1,08) 3,83 (0,40) 8,16 (0,61741)
7 18,65 (6,40) 6,81 (1,69) 16,45 (5,36)
K. pneumoniae 1 611,12 (0,617) 6 11,12 (0,65) 10,31 (1.09)
S. marcescens 3 31,89 (4,43) 10,35 (4,65) 17,81 (5,22)
Контрольные штаммы
1 17,57 (1,08) 3,51 (1,08) 12,97 (0,54)
Citrobacter NA (−ve) 1 3,34 (2,9237) 2,1638 3,34 (2,9237) 2,1638 4.05 (0,54)
917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 917 9174 917 917 917 917 917 9174 917 9178 917 917 917,5 K. pneumoniae 917 917
Enterobacteriaceae видов Кол-во изолятов Необработанное Молозиво крупного рогатого скота Обезжиренное молоко
1 12,73 (4,69) 5,63 (1,70) 11,16 (1,74)
Escherichia coli 1 9.53 (1,23) 3,78 (1,03) 8,45 (1,75)
Klebsiella oxytoca 6 13,55 (4,21) 6,14 (0,95) 2 14,88 (4,01) 5,33 (1,33) 13,26 (3,09)
Serratia marcescens 1 11,717 938 (0,417) 11,717 938 (0,417) 11.00 (3.00)
NEC −ve младенцы
Citrobacter koseri / amalon . 1 3,63 (1,69) 3,86 (0,95) 4,24 (0,45)
E. coli 1 12,16 (1,08) 3,83 (0,407) 3,83 (0,40) 9,17 )
K. oxytoca 7 18,65 (6,40) 6,81 (1,69) 16.45 (5,36)
K. pneumoniae 1 11,12 (0,67) 4,36 (0,51) 10,31 (1,09)
S. 4,43) 10,35 (4,65) 17,81 (5,22)
Контрольные штаммы
E. coli O111 (+ ve) 1 17,57 (1,0837) 12.97 (0,54)
Citrobacter NA (−ve) 1 3,34 (2,92) 2,16 (0,81) 4,05 (0,54)
Производство цитокинов
Уровни IL-6, TNF-α и IL-8 (нг / мл ^-1), обнаруженные в 6-часовом супернатанте клеток THP-1, показаны в таблице 4. Для всех трех цитокинов добавление обезжиренного молока оказало влияние. не вызывают каких-либо существенных различий в концентрациях надосадочной жидкости.Напротив, добавление бычьего молозива заметно увеличивало продукцию IL-8 по сравнению с нестимулированными контрольными клетками и клетками с добавленным обезжиренным молоком ( P <0,001). IL-6 и TNF-α продуцировались клетками THP-1 на более низких уровнях, но все же наблюдалось значительное увеличение количества клеток, обработанных молозивом, по сравнению с обезжиренным молоком ( P <0,001). Стимуляция низкой концентрацией эндотоксина E. coli значительно увеличивала продукцию цитокинов ( P <0.001). Добавление эндотоксина к клеткам, также обработанным молозивом, имело тенденцию к аддитивному эффекту в отношении IL-8, но значения TNF-α не были значительно увеличены. Легкое подавление стимулирующего эффекта эндотоксина наблюдалось при добавлении обезжиренного молока к клеткам, но различия не были статистически значимыми. Подобное снижение уровня IL-6 в обработанных молозивом и стимулированных эндотоксинами клеточных супернатантах не было статистически значимым. Для IL-6 и IL-8 24-часовые супернатанты демонстрировали сходную тенденцию с 6-часовыми супернатантами, в то время как уровни TNF-α были значительно снижены (данные не показаны).
Таблица 4
Влияние бычьего молозива и обезжиренного молока на продукцию IL-8, IL-6 и TNF-α клетками THP-1 и HT-29, стимулированными эндотоксином, и в нестимулированных клетках
9170,0177
Цитокин Skim Молозиво Обезжиренное + LPS Col. + LPS LPS PBS
THP-1
IL-8 1.92 917 938 3371 76,33 47,17 0,77
(± 0,1) (± 6,98) (± 6,78) (± 6,1) (± 5,43) ± 917 0,038
ИЛ-6 0,14 1,40 4,04 3,08 5,22 0,034
(± 0,0) (0,417 ± 0,117) (± 0,0) (0,417 ± 0,117 9) ± 0,02) (± 0.85) (± 0,0)
TNF-α 0,029 1,54 1,69 4,9 4,22 0,008
(± 0,6) (± 0,27) (± 0,96) (± 0,0)
HT-29
IL-8 1,55 2,24 1,43 8 1,43
2,0 1.58
(± 0,01) (± 0,08) (± 0,09) (± 0,04) (± 0,1) (± 0,06)
9173 737 917 917 917 738 917 917 917 917 917 917 917 917 917 76.33 917 ± 0,017 (± 0,0) 917 ± 0,49 917 ± 17 917 917
Обезжиренное Молозиво Обезжиренное + ЛПС Цветное + ЛПС ЛПС PBS
THP-1
47,17 0,77
(± 0,1) (± 6,98) (± 6,78) (± 6,1) (± 5,43) (± 0,01741) (± 0,01741)
ИЛ-6 0,14 1,40 4,04 3,08 5,22 0,034
(± 0,0) (± 0,19) (± 0,19) (± 0,85) (± 0.0)
TNF-α 0,029 1,54 1,69 4,9 4,22 0,008
(± 0,01) (± 0,01) (± 0,27) (± 0,96) (± 0,0)
HT-29
IL-8 1,55 2,24 1,43 2,24
(± 0.01) (± 0,08) (± 0,09) (± 0,04) (± 0,1) (± 0,06)
Таблица 4
Влияние бычьего молозива и обезжиренного молока на выработку IL -8, IL-6 и TNF-α клетками THP-1 и HT-29, стимулированными эндотоксином и в нестимулированных клетках
917
Цитокин Skim Colostrum Skim + LPS Col. + LPS LPS PBS
THP-1
IL-8 1.92 33,24 38,71 76,33 47,17 0,77
(± 0,1) (± 6,98) (± 6,78) 917 6,117 ± (5,438 ± 6,78) 917 6,117 ± 937 (± 0,04)
IL-6 0,14 1,40 4,04 3,08 5,22 0,034
917 (0,17) 917 (0,17) 937 917 917 917 (0,17) 917) ± 0.49) (± 0,02) (± 0,85) (± 0,0)
TNF-α 0,029 1,54 1,69 4,9 4,22 938 938 938 938 938 938 938 (± 0,01) (+0,12) (± 0,6) (± 0,27) (± 0,96) (± 0,0)
HT-29
IL-8 1,55 2,24 1.43 2,24 2,0 1,58
(± 0,01) (± 0,08) (± 0,09) (± 0,04) (± 0,1) 9176 917)
9177 917 917 917 917 917 917 937 937 9174 917 917 917 917 917 917 917 -17 1.92 917
Цитокин Обезжиренный Молозиво Обезжиренное + ЛПС Кол. + ЛПС ЛПС PBS
33,24 38,71 76,33 47,17 0,77
(± 0,1) (± 6,98) (± 6,78) 917 6,117 ± (5,438 ± 6,78) 917 6,117 ± 937 (± 0,04)
IL-6 0,14 1,40 4,04 3,08 5,22 0,034
917 (0,17) 917 (0,17) 937 917 917 917 (0,17) 917) ± 0.49) (± 0,02) (± 0,85) (± 0,0)
TNF-α 0,029 1,54 1,69 4,9 4,22 938 938 938 938 938 938 938 (± 0,01) (+0,12) (± 0,6) (± 0,27) (± 0,96) (± 0,0)
HT-29
IL-8 1,55 2,24 1.43 2,24 2,0 1,58
(± 0,01) (± 0,08) (± 0,09) (± 0,04) (± 0,1) 9176 917)
IL-6 и TNF-α не были обнаружены в супернатантах клеток HT-29, а продукция IL-8 была умеренной даже в клетках, стимулированных эндотоксином. Уровни цитокинов, обнаруженные в 24-часовых супернатантах клеток HT-29, показаны в таблице 4. Значительное увеличение продукции IL-8 наблюдалось как в клетках HT-29, обработанных эндотоксином, так и в клетках, обработанных молозивом ( P <0.001), тогда как клетки, обработанные обезжиренным молоком, были подобны нестимулированным контрольным клеткам. Уровни IL-8 в клетках HT-29, обработанных обезжиренным молоком и молозивом, больше не увеличивались при добавлении эндотоксина.
Анализ эндотоксинов и биологической активности
По данным анализа Limulus, содержание эндотоксина в коровьем молозиве составило 0,125 нг (1,25 ЕС). Эта очень низкая концентрация не стимулировала линию клеток макрофагов MHS, о чем свидетельствует ее неспособность повышать продукцию маркеров CD80 и CD86 на этих клетках (данные не показаны).
Обсуждение
Необходимым условием для этого исследования было выделение ряда штаммов Enterobacteriaceae , колонизирующих кишечник недоношенных детей с НЭК и без них. За 17-месячный период исследования в отделении интенсивной терапии больницы Данидина было шесть младенцев с подтвержденным НЭК и четыре с подозрением на НЭК, которые также были колонизированы Enterobacteriaceae . Была предпринята попытка получить бактериальные штаммы от младенцев без NEC, которые были сопоставлены со случаями по времени и по гестационному возрасту.Однако эта группа была неполной из-за отсутствия Enterobacteriaceae в кале некоторых младенцев. Поскольку исследование в первую очередь касалось уровней антител и биологической активности в бычьем молозиве, было сочтено, что это не сильно отвлекает от исследования. Путем исследования нескольких бактериальных изолятов на один образец фекалий были выявлены представители преобладающих видов, колонизирующих кишечник недоношенных детей в течение периода исследования. В целом, это были виды, о которых обычно сообщали другие исследователи, с преобладанием Klebsiella oxytoca и Enterobacter cloacae (Hoy et al., 2000; Boccia et al. , 2001; Noerr, 2003). Предыдущие исследования показали, что младенцы с NEC колонизируются теми же видами, что и дети без NEC, и что эти виды, как правило, имеют нозокомиальное, а не материнское происхождение (Millar et al. , 1996; Peter et al. , 1999; Hoy и др. , 2000; Schwiertz и др. , 2003). Неожиданным открытием исследования было относительное отсутствие Enterobacter cloacae у младенцев с NEC-ve по сравнению с NEC + ve и предполагаемыми случаями NEC.Несмотря на высокий уровень статистической значимости, кажется вероятным, что это открытие было следствием небольшого числа обследованных младенцев. Enterobacter cloacae не был изолирован от всех младенцев NEC + ve, и другие исследования показали, что не существует конкретных видов Enterobacteriaceae , исключительно связанных с NEC (Peter et al. , 1999; Noerr, 2003).
Одно из основных различий между зрелым и незрелым кишечным трактом новорожденных касается выработки слизи.У недоношенных детей слой слизи, который обычно покрывает эпителий, невелик, и может происходить тесный контакт между бактериями, колонизирующими просвет, и клетками-хозяевами (Albanese & Rowe, 1995). Энтеральное питание и введение антибиотиков снижает или задерживает колонизацию анаэробными бактериями, которые обычно населяют слой слизи и делают условия роста менее благоприятными для Enterobacteriaceae (Blakey et al. , 1982; Brunel & Gouet, 1993). Следовательно, недостаточность слизистого слоя в сочетании с уменьшенной или отсроченной анаэробной колонизацией может позволить Enterobacteriaceae , которые в нормальных условиях ограничены просветом кишечника, прикрепиться к кишечному эпителию, размножаться и вызывать повреждение за счет выработки эндотоксина.Затем считается, что происходит последующее перемещение бактерий через стенку кишечника (Duffy et al. , 2001; Hsueh et al. , 2002). Хотя общепринято, что бактерии прикрепляются к эпителию (Dai & Walker, 1999; Hsueh et al. , 2002), прямых доказательств нет. Однако работа с кроличьей моделью NEC решительно поддерживает это утверждение (Panigrahi et al. , 1994). Хотя не все случаи НЭК связаны с Enterobacteriaceae , это семейство бактерий связано с высокой долей, и исследования на животных показывают, что эндотоксин участвует в патогенезе НЭК (Hoy et al., 1990; Питер и др. , 1999; Hsueh et al. , 2002).
Помимо дефицита слизи, недоношенным детям не хватает секреторных IgA (sIgA), а также кишечных IgG и IgM (Albanese & Rowe, 1995). Было показано, что кормление грудью и введение препаратов человеческих антител IgA-IgG важны для предотвращения развития NEC (Eibl et al. , 1988; Lucas & Cole, 1990; Kosloske, 2001). Как крысы, находящиеся на грудном вскармливании, так и дети грудного возраста показали снижение частоты НЭК по сравнению с теми, кто кормил молочными смесями (Dvorak et al., 2001). Одним из способов защиты грудного молока от NEC является обеспечение sIgA и IgG в просвете кишечника. Считается, что эти иммуноглобулины агрегируют бактерии, поэтому они больше не могут прикрепляться к эпителию, и было показано, что как sIgA, так и IgG уменьшают количество бактерий, перемещающихся через стенку кишечника (Albanese et al. , 1994). Следовательно, иммуноглобулины могут предотвращать НЭК посредством процесса иммунного исключения, то есть они связываются с бактериями, предотвращая прилипание и последующую транслокацию.Поскольку антитела в молозиве животных могут действовать так же, как антитела в молозиве человека, мы исследовали, подавляет ли преинкубация с бычьим молозивом способность Enterobacteriaceae прикрепляться к клеточной линии, полученной из толстой кишки. Кроме того, мы определили титры IgA и IgG1 против видов Enterobacteriaceae , обычно выделяемых от недоношенных детей с НЭК и без них. Бычье молозиво отличается от человеческого молозива тем, что IgG1 является преобладающим антителом (IgA у человека).У коровы IgG1 выделяется в виде димера, который по размеру похож на sIgA и устойчив к пищеварительным ферментам. Считается, что он выполняет ту же функцию, что и IgA, в молозиве человека (Butler, 1971; Ungar et al. , 1990; Korhonen et al. , 2000a; Kosloske, 2001). В настоящем исследовании преинкубация с бычьим молозивом значительно снизила прилипание 24/25 изолятов Enterobacteriaceae , представляющих шесть видов от четырех младенцев, на c . 60% по сравнению с необработанными бактериями.Единственным непораженным изолятом был C. koseri / amalonaticus от младенца NEC-ve, который, естественно, демонстрировал очень низкий уровень прикрепления к клеткам HT-29. Напротив, обезжиренное молоко мало влияло на уровни приверженности, за исключением S. marcescens , выделенного от младенца NEC-ve. Поскольку изолят S. marcescens от младенца NEC + ve не подавлялся обезжиренным молоком, значимость этого открытия остается неопределенной.
Высокие титры IgA и IgG1 (от 10 ⁴ до 10 ⁶) против семи протестированных видов Enterobacteriaceae были получены с помощью ELISA.Несколько более высокий диапазон титров IgG1 по сравнению с IgA, вероятно, отражает большее количество IgG1, присутствующего в бычьем молозиве (Butler, 1971; McConnell et al. , 2001).
Текущие исследования показывают, что в NEC участвует ряд медиаторов воспаления, включая TNF-α, IL-6 и IL-8 (Caplan et al. , 1990; Romagnoli et al. , 2001; Noerr, 2003) . Действительно, повышение уровня IL-8 значительно коррелирует со степенью тяжести и началом симптомов НЭК (Noerr, 2003).Помимо взаимодействия с бактериями, иммуноглобулины могут также защищать кишечный тракт новорожденных, модулируя иммунный ответ. Это подтверждается исследованием Вольфа и Эйбла, которое продемонстрировало, что добавление препарата человеческого IgA-IgG к моноцитам человека приводит к дозозависимому снижению высвобождения TNF-α и IL-6 (Wolf & Eibl, 1994). . Хотя возможно, что очищенные бычьи иммуноглобулины могут иметь такой же эффект, результаты настоящего исследования показывают, что бычье молозиво мало влияло на выработку цитокинов в клетках моноцитарной линии ТНР-1, стимулированных эндотоксином.Более того, в нестимулированных клетках продукция цитокинов была значительно увеличена. В клетках HT-29, линии клеток толстой кишки, аналогичные результаты были получены для IL-8. Очень маловероятно, что заражение эндотоксином было ответственным за этот эффект, поскольку анализы эндотоксина показали, что концентрация в молозиве была слишком низкой для биологической активности (Davies et al. , 2005).
Принимая во внимание исчезновение банков грудного молока и трудности кормления недоношенных новорожденных исключительно грудным молоком, добавление энтерального питания к коровьему молозиву теоретически является привлекательным предложением.Молозиво крупного рогатого скота содержит множество защитных факторов, таких как лактоферрин, лактопероксидаза и иммуноглобулины, которые предназначены для защиты от инфекции (Van Hooijdonk et al. , 2000; Korhonen et al. , 2000b). Факторы роста, присутствующие в коровьем молозиве, включают инсулиноподобный фактор роста и трансформирующие факторы роста (Schams, 1994). Они почти идентичны своим человеческим аналогам (Schams, 1994) и могут способствовать созреванию кишечного тракта недоношенного ребенка.Кроме того, экспериментальная работа на крысиной модели показывает, что бычье молозиво способствует выведению эндотоксина (Dohler & Nebermann, 2002). Для обычных кишечных патогенов, таких как Salmonella и E. coli O157, антиадгезионная активность бычьего молозива была хорошо задокументирована, но, насколько известно авторам, Enterobacteriaceae , связанные с NEC, не тестировались. В настоящем исследовании бычье молозиво показало значительную антиадгезионную активность и содержало высокие титры антител к Enterobacteriaceae , колонизирующим кишечный тракт новорожденных с NEC и без него.Однако наши результаты предполагают, что он также может иметь потенциал к увеличению уровней хемокина IL-8 в эпителии толстой кишки и моноцитарных клетках. Кроме того, бычье молозиво может способствовать усилению регуляции провоспалительных цитокинов IL-6 и TNF-α за счет инфильтрации макрофагов. Предыдущее исследование, проведенное авторами, продемонстрировало провоспалительную активность того же продукта на модели мышей (McConnell et al. , 2001). Хотя это свойство может быть полезным для предотвращения других инфекций, эти результаты показывают, что немодифицированное бычье молозиво может не подходить для профилактики NEC, и необходимы дальнейшие исследования для подтверждения, выявления и исключения любых потенциально провоспалительных компонентов.Если рассматривать на фоне коммерческих шагов по включению бычьего молозива в детские смеси, результаты этого исследования показывают, что следует проявлять осторожность в отношении младенцев с низкой массой тела при рождении.
Благодарности
Авторы благодарят медперсонал отделения интенсивной терапии больницы Данидин за их сотрудничество в этом проекте. Работа была поддержана грантом Фонда наследия Университета Отаго.
Список литературы
(
1995
)
Некротический энтероколит
.
Semin Pediatr Surg
4
:
200
—
206
.
(
1994
)
Влияние секреторного IgA на трансэпителиальный переход бактерий через интактную подвздошную кишку in vitro
.
J Am Coll Surg
179
:
679
—
688
.
(
1978
)
Некротический энтероколит новорожденных: терапевтические решения, основанные на клинической стадии
.
Ann Surg
187
:
1
—
7
.
(
1982
)
Развитие колонизации кишечника у недоношенных новорожденных
.
J Med Microbiol
15
:
519
—
529
.
(
2001
)
Вспышки внутрибольничного некротического энтероколита: эпидемиология и меры борьбы
.
Eur J Pediatr
160
:
385
—
391
.
(
1993
)
Влияние дестабилизации материнской пищеварительной микрофлоры на микрофлору новорожденных крыс
.
Biol Neonat
63
:
236
—
245
.
(
1971
)
Физико-химические и иммунохимические исследования бычьего IgA и гликопротеина-а
.
Biochim Biophys Acta
251
:
435
—
449
.
(
1990
)
Роль фактора активации тромбоцитов и фактора некроза опухоли альфа в некротическом энтероколите новорожденных
.
J Педиатр
116
:
960
—
964
.
(
2005
)
Скрининг молочных продуктов на иммуноактивный потенциал
.
J Nutr
135
:
2651
—
2656
.
(
1999
)
Защитные питательные вещества и бактериальная колонизация в незрелом кишечнике человека
.
Adv Pediatr
46
:
353
—
382
.
(
2002
)
Молозиво крупного рогатого скота при пероральном лечении энтерогенной эндотоксемии у крыс
.
Crit Care
6
:
536
—
539
.
(
2001
)
Бактериальные токсины и энтеральное вскармливание недоношенных детей с риском некротического энтероколита
.
Adv Exp Med Biol
501
:
519
—
527
.
(
2001
)
Материнское молоко снижает тяжесть некротического энтероколита и увеличивает уровень кишечного интерлейкина-10 у новорожденных крыс модели
.
Pediatr Res
53
:
426
—
433
.
(
1988
)
Профилактика некротического энтероколита у детей с низкой массой тела при рождении путем кормления IgA-IgG
.
N Engl J Med
319
:
1
—
7
.
(
1997
)
Эпидемиология младенческой смертности от некротического энтероколита в США
.
Am J Public Health
87
:
2026
—
2031
.
(
1990
)
Количественные изменения фекальной микрофлоры, предшествующие некротизирующему энтероколту у недоношенных новорожденных
.
Arch Dis Child
65
:
1057
—
1059
.
(
2000
)
Микрофлора двенадцатиперстной кишки новорожденных с очень низкой массой тела при рождении и связь с некротическим энтероколитом
.
J Clin Microbiol
38
:
4539
—
4547
.
(
2002
)
Некротический энтероколит новорожденных: клинические аспекты и патогенетические концепции
.
Pediatr Dev Pathol
6
:
6
—
23
.
(
2003
)
Некротический энтероколит новорожденных: обзор
.
Curr Opin Infect Dis
16
:
349
—
355
.
(
2000a
)
Иммуноглобулины молока и факторы комплемента
.
Br J Nutr
84
(
Suppl 1
),
S75
—
S80
.
(
2000b
)
Антитела к коровьему молоку для здоровья
.
Br J Nutr
84
(
Suppl 1
),
S135
—
S146
.
(
1994
)
Эпидемиология некротического энтероколита
.
Acta Pediatr
396
(
Suppl
),
2
—
7
.
(
2001
)
Грудное молоко снижает риск некротического энтероколита у новорожденных
.
Достижения в исследованиях питания. Vol. 10, Имунологические свойства молока
(, ред.), Стр.
123
—
136
.
Kluwer Academic / Plenum Publishers
,
Нью-Йорк
.
(
1990
)
Грудное молоко и некротический энтероколит новорожденных
.
Ланцет
336
:
1519
—
1523
.
(
2001
)
Сравнение активности IgG и IgG1 в концентрате раннего молока от неиммунизированных коров и в молоке от гипериммунизированных животных
.
Food Res Int
34
:
255
—
261
.
(
1996
)
Применение ПЦР гена 16s рРНК для изучения флоры кишечника недоношенных детей с некротическим энтероколитом и без него
.
J Clin Microbiol
34
:
2506
—
2510
.
(
2003
)
Часть 1. Текущие разногласия в понимании некротического энтероколита
.
Adv Neonatal Care
3
:
107
—
120
.
(
1994
)
Возникновение некротического энтероколита может зависеть от характера прикрепления бактерий и колонизации кишечника: исследования на культуре ткани Caco-2 и на моделях кроликов-отъемышей
.
Pediatr Res
36
:
115
—
121
.
(
1999
)
Некротический энтероколит: есть ли связь с конкретными патогенами?
Eur J Pediatr
158
:
67
—
70
.
(
2001
)
Уровни интерлейкина-6 и интерлейкина-10 в плазме у недоношенных новорожденных, оцененных на предмет сепсиса
.
Eur J Pediatr
160
:
345
—
350
.
(
1994
)
Факторы роста молока
.
Endocr Regul
28
:
3
—
8
.
(
2003
)
Развитие бактериального состава кишечника у госпитализированных недоношенных новорожденных по сравнению с доношенными детьми, находящимися на грудном вскармливании
.
Педиатр Res
54
:
393
—
399
.
(
1990
)
Прекращение диареи, связанной с Cryptosporidium , у пациента с синдромом приобретенного иммунодефицита после лечения гипериммунным молозивом крупного рогатого скота
.
Гастроэнтерология
98
:
486
—
489
.
(
2003
)
Перенос антител с материнским молоком
.
Вакцина
21
:
3374
—
3376
.
(
2000
)
In vivo антимикробная и противовирусная активность компонентов коровьего молока и молозива, участвующих в неспецифической защите
.
Br J Nutr
84
(
Suppl 1
),
S127
—
S134
.
(
1994
)
Противовоспалительное действие препарата перорального иммуноглобулина (IgA-IgG) и его возможное значение для профилактики некротического энтероколита
.
Acta Paediatr
396
(
Suppl
),
37
—
40
.
Заметки автора
© 2006 Федерация европейских микробиологических обществ
(PDF) Факторы вирулентности и устойчивость к антибиотикам штаммов Klebsiella pneumoniae, выделенных от новорожденных с сепсисом
Khaertynov et al. Факторы вирулентности клебсиелл при неонатальном сепсисе
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1.Камачо-Гонсалес А., Копейщик П.В., Столл Б.Дж. Инфекционные болезни новорожденных:
оценка неонатального сепсиса. Педиатр Clin North A (2013) 60: 367–89.
doi: 10.1016 / j.pcl.2012.12.003
2. Верма П., Бервал П.К., Нагарадж Н., Свами С., Дживаджи П., Нараян С. Неонатальный
сепсис: эпидемиология, клинический спектр, недавние противомикробные препараты и их
Профиль чувствительности к антибиотикам. Int J Contemp Pediatr. (2015) 2: 176–80.
DOI: 10.18203 / 2349-3291.ijcp20150523
3. Столл Б.Дж., Хансен Н., Фанаро А.А., Райт Л.Л., Карло В.А., Эренкранц Р.А. и др.
Поздний сепсис у новорожденных с очень низкой массой тела при рождении: опыт исследовательской сети неонатальных исследований
NICHD. Педиатрия (2002) 110: 285–91. DOI: 10.
1542 / peds.110.2.285
4. Заиди А.К., Тавер Д., Али С.А., Хан Т.А. Возбудители, ассоциированные с сепсисом, у
новорожденных и младенцев раннего возраста в развивающихся странах. Pediatr Infect Dis J.
(2009) 28 (Дополнение.1): S10–8. DOI: 10.1097 / INF.0b013e3181958769
5. Верньяно С., Менсон Э., Кеннеа Н., Эмблтон Н., Рассел А.Б., Уоттс Т. и др.
Инфекции новорожденных в Англии: сеть эпиднадзора NeonIN. Arch Dis
Child Fetal Neonatal Ed. (2011) 96: F9–14. DOI: 10.1136 / adc.2009.178798
6. Зеа-Вера А., Очоа Т.Дж. Проблемы диагностики и лечения
неонатального сепсиса. J Trop Pediatr. (2015) 61: 1–13. DOI: 10.1093 / tropej / fmu079
7. Шон А.С., Баджва Р.П., Руссо Т.А.Гипервирулентная (гипермуковязкозная) клебсиелла
pneumoniae: новая и опасная порода. Вирулентность (2013) 4: 107–18.
doi: 10.4161 / viru.22718
8. Podschun R, Ullmann U. Klebsiella spp. в качестве внутрибольничных возбудителей:
эпидемиология, систематика, методы типирования и факторы патогенности. Clin
Microbiol Rev. (1998) 4: 589–603.
9. Haller S, Eller C, Hermes J, Kaase M, Steglich M, Radonic A, et al. Что
вызвало вспышку Klebsiella pneumoniae, продуцирующую БЛРС, в отделении интенсивной терапии новорожденных
, Германия, с 2009 по 2012 год? Восстановление передачи
с эпидемиологическим анализом и полногеномным секвенированием.BMJ (2015)
5: e007397. doi: 10.1136 / bmjopen-2014-007397
10. Хаэртынов Х.С., Анохин В.А., Николаева И.В., Семенова Д.Р., Любин С.А.,
Агапова И.В. Неонатальный сепсис, вызванный клебсиеллой. Новости Мед. Северный Кавказ
(2016) 11: 82–6. DOI: 10.14300 / mnnc.2016.11004
11. Гельбанд Х, Миллер-Петри М, Пант С., Гандра С., Левинсон Дж., Бартер Д. и др.
Состояние антибиотиков в мире. Вашингтон, округ Колумбия: Центр болезней
Динамика, экономика, политика (2015).
12. Лю YC, Cheng DL, Lin CL. Klebsiella pneumoniae абсцесс печени, ассоциированный с
септическим эндофтальмитом. Arch Intern Med. (1986) 146: 1913–6.
13. Cheng DL, Liu YC, Yen MY, Liu CY, Wang RS. Септические метастатические образования
гнойного абсцесса печени. Их связь с бактериемией Klebsiella pneumoniae
у пациентов с диабетом. Arch Intern Med. (1991) 151: 1557–9.
doi: 10.1001 / archinte.1991.00400080059010
14. Ван Дж. Х., Лю Ю. К., Ли С. С., Йен М. Ю., Чен Ю. С., Ван Дж. Х. и др.Первичный
абсцесс печени, вызванный Klebsiella pneumoniae в Тайване. Clin Infect Dis. (1998)
26: 1434–8.
15. Декре Д., Верде С., Эмириан А., Ле Гуррьерек Т., Пети Дж. К., Оэнштадт Г.,
и др. Возникающие тяжелые и смертельные инфекции, вызванные Klebsiella pneumoniae, в
двух университетских больницах Франции. J Clin Microbiol. (2011) 49: 3012–304.
doi: 10.1128 / JCM.00676-11
16. Биалек-Давенет С., Крискуоло А., Аиллоуд Ф, Пассет В., Джонс Л., Деланной-
Вийярд А.С. и др.Геномное определение гипервирулентных и мультирезистентных клональных групп Klebsiella pneumoniae. Emerg Infect Dis. (2014)
20: 1812–20. DOI: 10.3201 / eid2011.14020622.
17. Yu WL, Ko WC, Cheng KC, Lee HC, Ke DS, Lee CC, et al. Связь
между генами rmpA и magA и клиническими синдромами, вызываемыми Klebsiella
pneumoniae на Тайване. Clin Inect Dis. (2006) 42: 1351–8. DOI: 10.1086 / 503420
18. Чжан Р., Линь Д., Чан Э. У., Гу Д., Чен Г. X, Чен С.Появление
устойчивых к карбапенемам гипервирулентных штаммов Klebsiella pneumoniae
серотипа K1 в Китае. Противомикробные агенты Chemother. (2015) 60: 709–11.
DOI: 10.1128 / AAC.02173-15
19. Surgers L, Boyd A, Girard PM, Arlet G, Decré D. Штамм, продуцирующий ESBL
гипервирулентной Klebsiella pneumoniae K2, Франция. Emerg Infect Dis. (2016)
22: 1687–8. doi: 10.3201 / eid2209.160681
20. Paczosa MK, Mecsas J. Klebsiella pneumoniae: совершение операции
с сильной защитой.Microbiol Mol Biol Rev. (2016) 80: 629–61.
doi: 10.1128 / MMBR.00078-15
21. Zhang Y, Zhao C, Wang Q, Wang X, Chen H, Li H, et al. Высокая распространенность
гипервирулентной инфекции Klebsiella pneumoniae в Китае:
географическое распространение, клинические характеристики и устойчивость к противомикробным препаратам.
Противомикробные агенты Chemother. (2016) 60: 6115–20. DOI: 10.1128 / AAC.
01127-16
22. Росси П., Ботгрос Р., Шейн Тибби (Великобритания), Надел С., Манзони П., Аренас-
Лопес С.Отчет о совещании экспертов по неонатальному и педиатрическому лечению
Сепсис. Лондон: Европейское агентство по лекарственным средствам (2010). Доступно в Интернете
по адресу: http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Report/2010/
12 / WC500100199.pdf
23. Колли Дж. Г., Маки Т. Дж., Маккартни Дж. Э.. Практическая медицинская микробиология. Новый
Йорк, Нью-Йорк: Черчилль Ливингстон (1996).
24. MacFaddin JF. Биохимические тесты для идентификации медицинских бактерий. 3-й
Эдн.Балтимор, Мэриленд: Уильямс и Уилкинс (2000).
25. Patel JB, Cockerill FR, Bradford PA, Eliopoulos GM, Hindler JA, Jenkins SG,
et al. Стандарты производительности для тестирования чувствительности к противомикробным препаратам. Уэйн:
Институт клинических и лабораторных стандартов (2015).
26. Ло Й, Ван Й, Йе Л., Ян Дж. Молекулярная эпидемиология и факторы вирулентности
гнойный абсцесс печени, вызывающий Klebsiella pneumoniae в Китае. Clin Microbiol
Заражение.(2014) 20: 818–24. DOI: 10.1111 / 1469-0691.12664
27. Compain F, Babosan A, Brisse S, Genel N, Audo J, Ailloud F и др.
Мультиплексная ПЦР для обнаружения семи факторов вирулентности и капсульных серотипов K1 / K2
Klebsiella pneumoniae. J Clin Microbiol. (2014) 52: 4377–80.
doi: 10.1128 / JCM.02316-14
28. Yu WL, Ko WC, Cheng KC, Lee CC, Lai CC, Chuang YC. Сравнение
распространенности факторов вирулентности для абсцессов печени Klebsiella pneumoniae
между изолятами с капсульным серотипом K1 / K2 и не-K1 / K2.Диагностика
Microbiol Infect Dis. (2008) 62: 1–6. DOI: 10.1016 / j.diagmicrobio.2008.04.007
29. Лай Ю.К., Лин А.С., Чианг М.К., Дай Й.Х., Сюй С.К., Лу М.К. и др.
Генотоксическая Klebsiella pneumoniae на Тайване. PLoS ONE. (2014) 9: e96292.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096292
30. Центры по контролю и профилактике заболеваний. Жизненно важные функции: устойчивость к карбапенемам
Enterobacteriaceae. Morb Mortal Wkly Rep. (2013) 62: 165–70.
31. Аль-Хасан М.Н., Хускинс В.С., Лар Б.Д., Экель-Пассов Д.Е., Баддур Л.М.
Эпидемиология и исход грамотрицательной инфекции кровотока у
детей: популяционное исследование. Epidemiol Infect. (2011) 139: 791–6.
DOI: 10.1017 / S0
8810001640.
32. Брансвелл Х. ВОЗ опубликовала список опасных супербактерий в мире. Стат. (2017
27 февраля).
33. Самуэльссон А., Исакссон Б., Ханбергер Х., Ольхагер Э. Поздний неонатальный
сепсис, факторы риска и вмешательства: анализ повторяющихся вспышек
Serratia marcescens, 2006-2011 гг.J Hosp Infect. (2014) 86: 57–63.
doi: 10.1016 / j.jhin.2013.09.017
34. Кортезе Ф, Шиккитано П., Джезуальдо М., Филанинно А., Де Джорджи Э, Скеттини Ф,
и др. Ранние и поздние инфекции у новорожденных: где мы находимся? Обзор.
Pediatr Neonatol. (2016) 57: 265–73. DOI: 10.1016 / j.pedneo.2015.09.007
35. Родос А., Эванс Л. Е., Альхазани В., Леви М. М., Антонелли М., Феррер Р.,
и др. Кампания по выживанию после сепсиса: международные рекомендации по ведению
сепсиса и септического шока: 2016 г.Intens Care Med. (2017) 43: 304–77.
doi: 10.1007 / s00134-017-4683-6
36. Ариф С.Х., Ахмад И., Али С.М., Хан Х.М. Тромбоцитопения и бактериальный сепсис
у новорожденных. Индийский J Переливание гематоловой крови. (2012) 28: 147–51.
doi: 10.1007 / s12288-011-0118-7
37. Broberg CA, Palacios M, Miller VL. Клебсиелла: пройти долгий путь к
, чтобы понять этот загадочный реактивный самолет. F1000Prime Rep. (2014) 6:64:
DOI: 10.12703 / P6–64
38.Ли Б., Чжао Ю., Лю С., Чжоу Д. Молекулярный патогенез клебсиеллёзной пневмонии.
Future Microbiol. (2014) 9: 1071–81.
No related posts.