Диктант по клеточкам для 1 класса: Для 1-го класса (6-7 лет)

jazezim графический диктант 1 класс с тетради умников и умниц цветок

графический диктант 1 класс с тетради умников и умниц цветок 1 классbrРабочие тетради расширяют границы учебников и побуждают . Юные умники и умницы 1 класс. . Товары для цветоделия, цветы из шелка Flart. 1 … 1. Узорова, Нефедова — Графические диктанты обложка книги. Пособие Юным умникам и умницам использую во внеурочной деятельности.. . Моя дочка учится в первом классе. . например, в графическом диктанте на стр.78 ошибка: вместо 1 клетка вправо надо начинать . Начальная точка и в пособии для учителя, и в тетради для ученика отмечена неверно. 1 классbrРабочие тетради расширяют границы учебников и побуждают . Юные умники и умницы 1 класс. . Товары для цветоделия, цветы из шелка Flart. 1 … 1. Узорова, Нефедова — Графические диктанты обложка книги. Курс включает 133 занятия: 1 занятие в неделю, 31 занятие в 1 классе и по 34 занятия во 2-4 классах. . Графические диктанты — это и способ развития речи, так как попутно . В рабочие тетради включены упражнения на развитие и совершенствование слуховой памяти. … Графический диктант « Цветок». 25 фев 2014 . Мы очень полюбили такие графические диктанты. Как только ребенок научился . Картинки по клеточкам в тетради. Для удобного . Юным умникам и умницам, Информатика, Логика, Математика, 1 класс, Hабочая тетрадь, Часть 2, Холодова О., 2008 Рисунки по клеточкам цветы. Рисунки по клеточкам в тетради фото. Графический диктант по клеточкам для 1 класса — это очень увлекательное и полезное занятие для ребенка. материалы / Рабочая тетрадь Юным умникам и умницам 1 класс (часть 1). Графический диктант. Здесь вы найдете Задачи с ответами в рабочей тетради по логике Юным умникам и умницам, 2 класс, часть 1. Методическое пособие для 2-х рабочих тетрадей Юным умникам и умницам — 1 класс. Здесь тексты графических диктантов. Дидактический материал разработан к курсу Холодовой О.А. Юным умникам и умницам. Работа содержит 30 слайдов с графическими диктантами. ••• 1 класс юным умникам и умницам . варфаломеева мария Мастер (1895), закрыт 2 года назад. подскажите не могу понять как из одной точки нарисовать рисунок, графический диктант. 26 окт 2013 . Цветок Графический диктант «Цветок». Рисунок по клеточкам. Рак . Поэтому психологи и педиатры рекомендуют начинать ещё за год до первого класса, в детском саду или на .. Перед ребёнком листок в клетку или тетрадь, ластик и простой карандаш. . 1 ↓ — 1 клетка вниз, и так далее . Юным умникам и умницам.. О.Холодова Рабочая тетрадь 2 класс. О.Холодова Рабочая тетрадь 2 класс. Скачать тетради с графическим диктантом . Кликните по обложке, чтобы просмотреть pdf файл и сохранить тетрадь себе на компьютер. Оригами лебедь двойной из треугольных модулей — мастер класс. Приложение 2. Программа кружка «Я – исследователь». 1 класс … Рабочая тетрадь. .. Аппликация «Цветок в уголок». . Рабочая программа к курсу « Умники и умницы» составлена в … Графический диктант (вводный урок). 2. 1. 9. Графический диктант . В этом доме тишина. Много окон, дверь одна. Х73 Юным умникам и умницам : Задания по развитию познавательных способностей (6-7 лет) : Рабочие тетради : В 2-х частях, часть 1/ О. А. Холодова.

Графический диктант для детей

У учителей, психологов и неврологов существуют определенные параметры, по которым они судят, готов ли ребенок к школе. И основным в этих параметрах является отнюдь не знание цифр, букв и умение читать. Учителя начальных классов давно уже говорят, что при подготовке к школе родителям нужно обращать внимание на развитие мелкой моторики, пространственного и логического мышления, а так же умение работать по образцу и следовать указаниям педагога.

Казалось бы, сложная задача: научить этому ребенка за год до школы. Но на это есть одно предельно просто занятие, которое очень нравится детям и которым можно заниматься где угодно — графический диктант. 

 

Что же такое графический диктант?

Графический диктант или рисование по клеточкам — создание изображения по клеточкам под диктовку. Упражнение подходит детям от 5 до 10 лет. Простая игра, но сколько в ней пользы:

1. развивает пространственное и абстрактное мышление;
2. тренирует мелкую моторику, а значит улучшает речь и подготавливает руку к письму;
3. улучшает усидчивость, внимание, концентрацию, умение слушать, действовать по образцу и анализировать информацию;
4. учит счету и ориентации в пространстве: различать лево — право, верх — низ.

Для выполнения задания вам понадобится: тетрадь в клетку (для дошкольников лучше выбирать крупную клетку — 0,8см), карандаш, ластик и образец задания. Образцы заданий есть в конце статьи, также в большом количестве их можно найти в интернете или купить сборник заданий. 

Играть можно 2 способами:

• Предлагаем ребенку перечертить фигуру по образцу.
• Ребенок рисует фигуру, следуя указаниям взрослого: 2 клеточки вправо, одна вниз и тд. В конце малыш может сравнить то, что получилось у него, с образцом, по которому ему диктовали.  При этом можно заранее сообщить ребенку, какая фигура будет на изображении, или ребенок сам говорит в конце, что у него получилось. 

В качестве дополнительного задания можно предложить заштриховать или раскрасить картинку, дорисовать другие элементы рисунка. Например, если рисовали гриб, можно дополнить рисунок полянкой, бабочками и цветами. 
Обычно детям нравятся такие задания, поэтому взрослый должен следить за временем, чтобы не допускать переутомления. Например, для  детей 5-6 лет достаточно 10-15 минут за один раз, после этого нужно обязательно сделать гимнастику для глаз и разминку или поиграть в подвижную игру. 

С чего начать?

Если вы впервые собираетесь заниматься с ребенком графическим диктантом, то вот несколько правил:

1. Действуйте от простого к сложному. Даже если ребенку 8 лет, начинайте с простых заданий и усложняйте их постепенно, адаптируя под уровень развития ребенка. Это позволит ребенку поверить в свои силы и сохранить интерес к упражнению надолго.
2. Начните с объяснения правил, а для детей помладше еще раз повторите где лево и право, что вы имеете в виду, когда говорите 2 клеточки вверх или вниз, и что такое клетка.
3. Важно показать в тетради где верх и низ, где левый верхний угол, нижний правый… Ориентация в тетради будет большим плюсом перед началом письма в школе.
4. В заданиях используются определенные обозначения: 4 →, 1 ↑, 2 ↓, 2 ←, где число — это количество клеток, а стрелочка — это направление движения: право, верх, низ, лево.

Графические диктанты для детей 5-6 лет

«Кошечка»
Отступи 3 клетки вправо и 5 клеток сверху, ставь точку и приступай к заданию: 1 вправо, 1 вниз, 2 вправо, 1 вверх, 1 вправо,2 вниз,5 вправо, 2 вверх, 1 влево, 1 вверх, 2 вправо, 9 вниз,1 влево, 2 вверх, 1 влево,2 вниз, 1 влево, 3 вверх,3 влево, 3 вниз, 1 влево, 2 вверх, 1 влево, 2 вниз, 1 влево,4 вверх, 1 влево, 4 вверх.
«Грибок»
Отступи 9 клеток слева, 6 клеток сверху, поставь точку и приступай к заданию: 4 влево, 1 вверх,1 вправо, 1 вверх, 1 вправо, 1 вверх, 1 вправо, 1 вверх,5 вправо, 1 вниз,1 вправо, 1 вниз, 1 вправо, 1 вниз, 1 вправо,1 вниз, 4 влево, 7 вниз, 3 влево, 7 вверх.

Очень полезно совмещать графический диктант с пальчиковой гимнастикой, загадками и скороговорками. Такой подход работает одновременно над мелкой моторикой, речью и словарным запасом ребенка. Также прекрасным дополнением к графическим диктантам являются и онлайн-занятия на сайте «Разумейкин», которые позволяют развивать внимание, память, логику, речь ребенка в игровой форме. 

Методика Графического диктанта (Рисование по клеточкам) для…

Привет, Вы узнаете про графический диктант, Разберем основные ее виды и особенности использования. Еще будет много подробных примеров и описаний. Для того чтобы лучше понимать что такое графический диктант,рисование по клеточкам,развитие памяти,развитие внимания , настоятельно рекомендую прочитать все из категории Педагогика и дидактика

графический диктант по клеточкам — развивающая игра для старших дошкольников и учеников 1 класса, учит ориентироваться на листе бумаги, развивает зрительное и слуховое восприятие , произвольность внимания и памяти. Помогает сформировать у детей старшего дошкольного возраста графические умения, необходимые для подготовки руки к письму. Графические диктанты развивают мелкую моторику и координацию движений руки, формируют пространственное мышление.

Рисунки по клеточкам даются только после того, как дошкольники усвоят графические умения, познакомятся с тетрадью в крупную клетку, научатся ориентироваться на листе, сформируется умение фиксировать уголок клетки. Можно не говорить заранее, что получится в итоге. Преподнесите задание как загадку, это повысит заинтересованность детей.

Поступление в школу – важный момент в жизни ребенка и его родителей. Чем лучше ребенок будет подготовлен к школе психологически, эмоционально и интеллектуально, тем увереннее он будет себя чувствовать, тем легче у него пройдет адаптационный период в начальной школе.

Графические диктанты или рисование по клеточкам для дошкольников хорошо помагают родителям и педагогам планомерно подготовить ребенка к школе и предотвратить такие типичные трудности в обучении, как неразвитость орфографической зоркости, неусидчивость и рассеянность. Регулярные занятия с данными графическими диктантами развивают у ребенка произвольное внимание, пространственное воображение , мелкую моторику пальцев рук, координацию движений, усидчивость.

Рисование по клеточкам – очень увлекательное и полезное занятие для детей. Это игровой способ развития у малыша пространственного воображения, мелкой моторики пальцев рук, координации движений, усидчивости. Графические диктанты могут с успехом применяться для детей от 5 до 10 лет.

Выполняя предложенные в выложенных ниже заданиях — графических диктантах, ребенок расширит кругозор, увеличит словарный запас, научится ориентироваться в тетради, познакомится с разными способами изображения предметов.

Советы по выполнению графического диктанта

1. Не ругайте ребенка, если рисунок не получается. Спокойно помогите, подскажите где ошибка. Некоторые дошкольники хорошо воспринимают новую информацию, а другие постоянно путают лево и право .
2. Не спешите во время устного диктанта, убедитесь, что ребенок успевает.
3. Делайте перерыв между занятиями, каждые 5-10 минут письма . Об этом говорит сайт https://intellect.icu . Проведите гимнастику для глаз и пальцев рук, пусть ребенок поиграет в подвижные игры, а затем приступает к написанию графического диктанта.
4. Следите за правильной посадкой за столом, освещением и правильным положением пальцев.
5. Получив результат, порадуйтесь вместе с ребенком, похвалите за старание, поблагодарите за усердный труд.

Помните! Время занятий для детей 4-5 лет должно составлять не более 15 минут, 5-6 лет 20 минут. Ребята постарше могут заниматься 30 минут.

Как работать с данными графическими диктантами:

В каждом диктанте даны задания для детей 5-ти – 7-ми лет.

Графический диктант можно выполнять в двух вариантах:
1. Ребенку предлагают образец геометрического рисунка и просят его повторить точно такой же рисунок в тетради в клетку.
2. Взрослый диктует последовательность действий с указанием числа клеточек и их направлений (влево, вправо, вверх, вниз), ребенок выполняет работу на слух, а затем сравнивает методом наложения свое изображение орнамента или фигуры с образцом в пособии.

Графические диктанты дополнены загадками, скороговорками, чистоговорками и пальчиковой гимнастикой. В процессе занятия ребенок отрабатывает правильную, четкую и грамотную речь , развивает мелкую моторику рук, учится выделять отличительные особенности предметов, пополняет свой словарный запас.

Задания подобраны по принципу «от простого к сложному». Если вы начинаете заниматься с ребенком по этим графическим диктантам, выполняйте с ним задания по порядку: начинайте с самых первых простых диктантов и постепенно переходите к более сложным.

Для занятий необходима тетрадь в клетку, простой карандаш и ластик, чтобы ребенок мог всегда исправить неправильную линию. Для детей 5 – 6-ти лет лучше использовать тетрадь в крупную клетку (0,8 мм), чтобы не перенапрягать зрение. Начиная с графического диктанта №40 все рисунки расчитаны на обычную школьную тетрадь (в тетради в крупную клетку они не поместятся).

В заданиях используются следующие обозначения: количество отсчитываемых клеток обозначается цифрой, а направление обозначается стрелкой. Например, запись:

следует читать: 1 клетка вправо, 3 клетки вверх, 2 клетки влево, 4 клетки вниз, 1 клетка вправо.

Во время занятий очень важен настрой ребенка и доброжелательное отношение взрослого. Помните, что занятия для ребенка – не экзамен, а игра. Помогайте малышу, следите за тем, чтобы он не ошибался. Результат работы всегда должен удовлетворять ребенка, чтобы ему вновь и вновь хотелось рисовать по клеткам.

Ваша задача – помочь ребенку в игровой форме овладеть необходимыми для хорошей учебы навыками. Поэтому никогда не ругайте его. Если у него что-то не получается, просто объясните, как надо делать правильно. Чаще хвалите малыша, и никогда ни с кем не сравнивайте.

Продолжительность одного занятия с графическими диктантами не должна превышать 10 – 15 минут для детей 5-ти лет, 15 – 20 минут для детей 5 – 6-ти лет и 20 – 25-ти минут для детей 6 – 7-ми лет. Но если ребенок увлекся, не стоит останавливать его и прерывать занятие.

Обратите внимание на посадку ребенка во время выполнения диктанта, на то, как он держит карандаш. Покажите малышу, как надо удерживать карандаш между фалангами указательного, большого и среднего пальцев. Если ребенок плохо считает, помогайте ему отсчитывать клетки в тетради.

Перед каждым занятием обязательно поговорите с ребенком о том, что есть разные направления и стороны. Покажите ему, где право, где лево, где верх, где низ. Обратите внимания малыша, что у каждого человека есть правая и левая сторона. Объясните, что та рука, которой он ест, рисует и пишет – это правая рука, а другая рука – левая. Для левшей наоборот, левшам надо обязательно объяснять, что есть люди, для которых рабочая рука – правая, а есть люди, для которых рабочая рука – левая.

После этого можно открывать тетрадь и учить ребенка ориентироваться на листе бумаги. Покажите ребенку, где у тетради левый край, где правый, где верх, где низ. Можно объяснить, что раньше в школе были наклонные парты, поэтому верхний край тетради и назвали верхним, а нижний нижним. Объясните малышу, что если вы говорите «вправо», то надо вести карандашом «туда» (вправо). А если говорите «влево», то надо вести карандашом «туда» (влево) и так далее. Покажите малышу, как надо считать клеточки.

Вам самим тоже понадобится карандаш и ластик для того, чтобы отмечать прочитанные строчки. Диктанты бывают довольно объемные, и чтобы вам не запутаться, ставьте точки карандашом напротив строчек, которые читаете. Это вам поможет не сбиться. После диктанта все точки вы сможете стереть.

Каждое занятие включает в себя графический диктант, обсуждение изображений, скороговорки, чистоговорки, загадки и пальчиковую гимнастику. Каждый этап занятия несет смысловую нагрузку. Занятия с ребенком можно выстраивать в разной последовательности. Можно вначале сделать пальчиковую гимнастику, прочитать скороговорки и чистоговорки, а затем сделать графический диктант. Можно наоборот, сначала сделать графический диктант, о потом скороговорки и пальчиковая гимнастика. Загадки лучше загадывать в конце занятия.
Когда ребенок нарисует рисунок, поговорите о том, что есть предметы и есть их изображения. Изображения бывают разные: фотографии, рисунки, схематичное изображение. Графический диктант – это схематичное изображение предмета.

Поговорите о том, что каждое животное имеет свои отличительные особенности. Схематичное изображение показывает отличительные особенности, по которым мы можем узнать животное или предмет . Спросите у ребенка, какие отличительные особенности у животного, которое он нарисовал. Например, у зайца – длинные уши и маленький хвостик, у слона – длинный хобот, у страуса длинная шея, маленькая голова и длинные ноги, и так далее.

Поработайте со скороговорками и чистоговорками разными способами:
1. Пусть ребенок возьмет в руки мяч и, ритмично подбрасывая и ловя его руками, проговорит скороговорку или чистоговорку. Подбрасывать и ловить мяч можно на каждое слово или на слог.
2. Пусть ребенок проговорит скороговорку (чистоговорку), перебрасывая мячик из одной руки в другую.
3. Проговорить скороговорку можно, прохлопывая ритм ладошками.
4. Предложите проговорить скороговорку 3 раза подряд и не сбиться.
Пальчиковую гимнастику делайте вместе, чтобы ребенок видел и повторял движения за вами.

См. также

• Память
• Внимание
• развитие памяти
• развитие внимания
• Восприятие
• память , психические процессы , запоминание , сохранение ,
• восприятие , физиологические механизмы восприятия , развитие восприятия , виды восприятия ,
• психические процессы , внимание , развитие внимания ,
• развитие памяти ,

На этом все! Теперь вы знаете все про графический диктант, Помните, что это теперь будет проще использовать на практике. Надеюсь, что теперь ты понял что такое графический диктант,рисование по клеточкам,развитие памяти,развитие внимания и для чего все это нужно, а если не понял, или есть замечания, то нестесняся пиши или спрашивай в комментариях, с удовольствием отвечу. Для того чтобы глубже понять настоятельно рекомендую изучить всю информацию из категории Педагогика и дидактика

Графический диктант №6 «Ящерица»

Графический диктант №6

Отгадайте загадку:

Она всегда сбегает,

А фокус очень прост:

Ей в этом помогает

Ужасно хитрый хвост.(Ящерица)

В траве мелькнёт,

Хвостом вильнёт,

Если хвост оторвёт –

Другой наживёт. (Ящерица.)

Длина ящерицы не более 18 см, половина приходится на тонкий и гибкий хвост. Испуганная ящерица легко отбрасывает свой хвост, а сама убегает. Это своеобразная защита от врагов: лучше уж потерять хвост, зато спастись самой. Причём хвост начинает извиваться по земле, скручиваясь и выпрямляясь. Внимание хищника привлечено к хвосту, а хозяйка хвоста тем временем исчезает в спасительной норке. Через несколько недель на месте старого хвоста вырастает новый, хотя и не такой длинный.

У ящерицы четыре лапки, на каждой из них — по пять пальцев, вооружённых цепкими коготками. Глаза довольно крупные, окаймлённые веками. Позади глаз ушные отверстия. Ящерица не только хорошо видит, но и слышит отлично. Ящерица не имеет постоянной температуры тела. Она зависит от температуры окружающей среды. Вот почему они так любят погреться утром на солнышке — за ночь они остывают и становятся вялыми.

Большинство ящериц откладывают яйца, из которых позже вылупляются маленькие ящерята. Но некоторые вынашивают яйца внутри своего тела и откладывают их уже в тот момент, когда из яйца появляется детёныш. Поэтому их и называют живородящими. (Энциклопедия «Что такое? Кто такой?». — М.: Педагогика-Пресс, 1993.)

Диктант:

от начальной точки 1 клетка вверх на уголок вправо,

 1 клетка вверх на уголок вправо, 

2 вправо,1 вниз на уголок вправо, 

9 вправо, 

1 вниз на уголок вправо, 

1 вниз на уголок вправо,

 1 вниз, 

1 вниз на уголок влево,

1 вниз на уголок влево, 

1 вниз на уголок влево, 

1 вниз на уголок влево, 

1 вниз на уголок влево, 

1 вверх, 

1 вверх на уголок вправо,

 1 вверх на уголок вправо,

 1 вверх на уголок вправо, 

1 вверх на уголок вправо,

 1 вверх, 

2 влево, 

2 вниз, 

2 влево, 

1 вверх, 

1 вправо, 

1 вверх, 

3 влево, 

2 вниз, 

2 влево, 

1 вверх, 

1 вправо,

 2 вверх,

 3 влево, 

1 вниз на уголок влево, 

4 влево, 

1 вверх, 

соединяем в начальной точке.

Ответ: см. рисунок.

 

Узоры по клеточкам 1 класс

656010, Алтайский край, город Барнаул, ул.Эмилии Алексеевой, 53 корпус 1,39 корпус2 Телефон / Факс: +7 (3852) 22-62-77 [email protected]

Узоры по клеточкам в тетради. 1000 бесплатных узоров для рисования. Коллекция авторских раскрасок для детей всех возрастов. На данный момент насчитывает 14.365 картинок. -Азбуки (Русская, Украинская, English) -Для малышей -Зарубежные мультфильмы -Отечественные мультфильмы -Мандалы Флеш-раскраски для ваших малышей. Огромный выбор интересных картинок. Интересные и необычные факты обо всем на свете. Новый раздел ТРАФАРЕТЫ поможет в оформлении праздников. К новому году добавлены тафареты Ёлочки, Игрушки, Олени, Снеговички, Снежинки. Раздел регулярно пополняется, Следите за новинками. Игры различных жанров для девочек и мальчиков всех возрастов. Большая коллекция картинок для развития детей. Ребусы, азбуки, цифры, животные, растения. Фотографии интересных мест, детей, животных. Все самое интересное в фотографиях. Стенгазеты ко всевозможным праздникам создадут необходимую атмосферу. -Стенгазеты «С днем рождения» -Стенгазеты «С новым годом» -Стенгазеты «Времена года» -Стенгазеты «С юбилеем» -Стенгазеты «C 8 марта» и много других. Самые разнообразные лабиринты различной степени сложности. Интересное и смешное видео с участием детей и животных. Мастер классы. Детские песни для детей к Новому году и другим праздникам. Аудио-сказки для детей. Открытки к праздникам. С Новым годом, 14 февраля — День влюбленных, День Святого Валентина, Деньзащитника отечества-23 февраля, 8 марта, День Победы, 1 мая, Ретро открытки, советские открытки, авторские. Огромная коллекция смайликов, на данный момент содержит 7371 смайликов. Всевозможные анимированнные картинки и аватарки для соцсетей. Детские анекдоты на различные темы: Из жизни животных, Объявления, Отцы и дети, Про Вовочку, Про рыбалку, Школа. Коллекция анекдотов регулярно пополняется, следите за обновлениями. Веселые истории из жизни с детьми и о них. Загадки для детей на разные темы Статьи для родителей о воспитании детей, здоровье детей и их досуге. Поделки с детьми и для детей. Поделки из бумаги, природных материалов, соленое тесто, лепка из глины и пластилина. www.xn—-gtbdmbeft1bdk.net Графические диктанты по клеточкам для дошкольников Многим ребятишкам такие графические диктанты кажутся развлечением, но у многих они в то же время вызывают трудности. И преодолевая эти трудности ребенок учится, запоминает такие понятия, как право и лево, верх и низ, и закрепляет эти понятия на практике. Всего парочка таких графических диктантов в неделю всего за пару месяцев позволит дошкольнику уже не путаться в названиях, а ориентироваться точно. Диктант заключается в рисовании по клеточкам, соответственно, под диктовку родителя или воспитателя. Поэтому еще одно важное умение развивают в ребенке диктанты, и в частности графический диктант — он учит слушать и слышать, сосредоточиться на том, что говорит учитель, а это практически самое важное для школы умение. В этом разделе сайта мы предлагаем вам скачать и распечатать несколько вариантов графического диктанта по клеточкам для занятий с детьми дошкольного возраста. Одни из них предполагают только движение вверх, вниз, вправо, влево в пределах 10-ти, без движения по диагонали, последующие более сложные, с угловыми передвижениями. Во время занятий очень важен настрой ребенка и доброжелательное отношение взрослого. Помните, что занятия для ребенка – это игра, и не ломайте, пожалуйста, положительное впечатление ребенка об этой игре. Помогайте малышу, следите за тем, чтобы он не ошибался. Результат работы всегда должен удовлетворять ребенка, чтобы ему вновь и вновь хотелось рисовать по клеточкам. Задача взрослого – помочь ребенку в игровой форме овладеть необходимыми для хорошей учебы навыками. Поэтому никогда не ругайте его. Если у него что-то не получается, просто объясните, как надо делать правильно. Скачать и распечатать графический диктант по клеточкам для дошкольников   А эти листы можно распечатать и дать непосредственно ребенку, чтобы он сам, по порядку, с учетом стрелок, а не под диктовку, нарисовал фигурку. Читать слева-направо. Скачать тетради с графическим диктантом Кликните по обложке, чтобы просмотреть pdf файл и сохранить тетрадь себе на компьютер.    Как еще можно использовать графические рисунки по клеточкам Умение сосредоточиться очень важно для учебы в школе, и материалы для графического диктанта развивают это умение как нельзя лучше. Помимо рисования под диктовку, предложите ребенку скопировать графический рисунок по клеточкам, или нарисовать его не под диктовку, а глядя на пошаговое руководство. Любой вариант будет интересным и развивающим. 7gy.ru Графический диктант для дошкольников 6-7 лет по клеточкам Графический диктант по клеточкам — развивающая игра для старших дошкольников и учеников 1 класса, учит ориентироваться на листе бумаги, развивает зрительное и слуховое восприятие, произвольность внимания и памяти. Помогает сформировать у детей старшего дошкольного возраста графические умения, необходимые для подготовки руки к письму. Графические диктанты развивают мелкую моторику и координацию движений руки, формируют пространственное мышление. Рисунки по клеточкам даются только после того, как дошкольники усвоят графические умения, познакомятся с тетрадью в крупную клетку, научатся ориентироваться на листе, сформируется умение фиксировать уголок клетки. Можно не говорить заранее, что получится в итоге. Преподнесите задание как загадку, это повысит заинтересованность детей. Советы по выполнению графического диктанта Не ругайте ребенка, если рисунок не получается. Спокойно помогите, подскажите где ошибка. Некоторые дошкольники хорошо воспринимают новую информацию, а другие постоянно путают лево и право. Не спешите во время устного диктанта, убедитесь, что ребенок успевает. Делайте перерыв между занятиями, каждые 5-10 минут письма. Проведите гимнастику для глаз и пальцев рук, пусть ребенок поиграет в подвижные игры, а затем приступает к написанию графического диктанта. Следите за правильной посадкой за столом, освещением и правильным положением пальцев. Получив результат, порадуйтесь вместе с ребенком, похвалите за старание, поблагодарите за усердный труд. Помните! Время занятий для детей 4-5 лет должно составлять не более 15 минут, 5-6 лет 20 минут. Ребята постарше могут заниматься 30 минут. Графические диктанты по клеточкам для дошкольников Задания выполнены на крупной клетке 8 мм, можете скачать или распечатать без водяных знаков бесплатно. Распечатать Скачать файл Графические диктанты по клеточкам для 1 класса Распечатать Скачать файл Полезные материалы doshkolnik.net Узоры и Орнаменты по Клеточкам в Тетради и на Бумаге Кто из нас не любил рисовать по клеточкам узоры – ровные геометрические или абстрактные, но с прямыми линиями. Мир узоров велик и разнообразен, посмотрите сами как можно украсить простой лист бумаги Узоры по клеточкам в тетради Узоры на бумаге в клетку Красивые узоры по клеточкам Узоры по клеточкам сердечко Красивые цветы Цветные узоры по клеточкам Узор с колокольчиком Красные узоры для вышивания по клеточкам Узоры для рушников Рисунки по клеточкам для полей тетради Разноцветные узоры по клеточкам Украинские узоры для вышиванки Узоры в клетку двух цветов Многоцветные узоры по клеточкам для вышивки Узоры цветов по клеточкам Цветы по клеточкам для вышивки или вязания Красивые цветы Цветы-орнамент для узора Узор по клеткам василек Маленькие узоры по клеточкам с цветами linedot.ru математика по схемам, верблюд, носорог Графический диктант по клеточкам для детей в 1 классе – это занимательная, полезная и интересная игра, в процессе которой ребенок старается угадать, что же за картинка получится у него в тетради. Такой вид работы является очень популярным среди педагогов. Многие из них используют в своей деятельности пособие О.А. Холодовой «Умники и умницы», где можно встретить много таких рисунков по клеточкам. Рассмотрим подробнее. Польза Рисование таких узоров предлагается детям в тетрадях по математике. Для школьников эти моменты учебной деятельности интересны и воспринимаются ими с удовольствием. Первоклассникам такой вид деятельности на уроке или дома помогает в умении координировать движение рук, формировать письменные навыки. Справляясь с заданием, дети учатся быть внимательнее, развивается усидчивость, воображение, творческое мышление, увеличивается активный словарь. Проводя линии по клеточкам, ребенок развивает мелкую моторику руки, запоминает счет в пределах 10, происходит формирование начальных математических представлений. Эта занимательная форма работы содействует развитию орфографической зоркости, способствует более легкому процессу адаптации к школе. Эти картинки применяются и в различных методах, помогающих определить уровень развития крохи. Например, с помощью методики «Графический диктант» Д.Б. Эльконина можно выявить, насколько у малыша развито ориентирование в пространстве, умение быть внимательным, слушать и с точностью следовать инструкции, предлагаемой педагогом, работать самостоятельно под диктовку взрослого, проводить линии на тетрадном листе в указанном направлении. Особенности проведения занятий Подготовьте рабочее место ребенка, проверьте, что нет ничего лишнего, отвлекающего кроху от работы. Все необходимые материалы должны быть на столе: тетрадь в клетку; простой карандаш; ластик; образец выполнения или инструкция для взрослого. Вам необходимо поставить на листочке начальную точку, от которой малыш будет начинать движение по клеточкам. Далее начинайте диктовать. Цифры в задании обозначают, на какое количество клеток необходимо двигаться, а стрелочки – направление движения. Например, обозначение 2→, говорит о том, что необходимо провести линию на 2 клетки вправо. Речь диктующего должна быть четкой и понятной. Следите за тем, чтобы ребенок успевал за темпом вашей диктовки. В случае необходимости оказывайте ему помощь. Заниматься будет интереснее, если вы добавите в процессе деятельности загадки, чистоговорки, скороговорки, физминутки и пр. Когда малыш увидит готовое изображение, можно провести беседу о нем, рассказать интересные факты, предложить ему раскрасить или заштриховать его. Способы выполнения Рисование по клеточкам для первоклашек должны быть не слишком сложными. Их можно проводить несколькими способами: Под диктовку. Педагог говорит на какое количество клеточек необходимо продвигаться и в каком направлении. Ученик работает, воспринимая информацию на слух, а затем сверяет ее с образцом. Можно предложить готовый узор и попросить повторить его у себя в тетради. Крохе также понравится дорисовывать фигуры по симметрии. В этом случаем ему предлагается половина симметричного изображения, а вторую он должен дорисовать самостоятельно. Какие диктанты подойдут первоклассникам Для учащихся первого класса подойдут следующие задания: В следующем видеоролике можно посмотреть, как должен проходить диктант в домашних условиях. o-krohe.ru Графический диктант по клеточкам для дошкольников 6-7 лет Формирование графических умений необходимо для развития навыков письма, рисования, начертания цифр. Педагоги детских садов, родители используют разные упражнения и задания. Одной из самых эффективных и интересных методик являются графические диктанты. Продиктовать несложный рисунок, инструкцию к схеме могут родители, учителя в «развивашках», а дети приходят в неописуемый восторг от полученных результатов. Поговорим об этом способе подготовки к школе подробнее. Из этой статьи вы узнаете Что такое графический диктант Необычные дидактические занятия нравятся дошкольникам. Они не требуют от ребенка глубоких знаний, сильного напряжения ума. К таким методам работы относятся и графические диктанты по клеточкам. Это игра, в процессе которой ребенок рисует линии, диагонали на листе бумаги и в результате получает картинку. Делать это несложно. Нужно только внимательно слушать педагога, проводить карандашом черточки влево, вправо, вверх или вниз. Развивая моторику, малыш учится считать, ориентироваться в пространстве, оценивать себя и радоваться успехам однокашников. Если дошкольник зазевается, отвлечется, то картинка не сложится. Ребенок осознает важность настроенности на урок, бдительности и серьезности в процессе будущего обучения в школе. Для графических диктантов используют простые картинки. Например, домик, собака, машина. Изображения должны быть знакомы малышам, не требовать длительного времени исполнения. Польза математических диктантов Графический диктант для дошкольников – полезная методика для диагностики уровня развития и занятий по подготовке к школе в детском саду, дома. В ДОУ воспитатели чаще используют пособия авторов: Д.Б. Эльконина, О.А. Холодовой. К.В. Шевелев разработал целый курс поэтапных занятий с детьми 4–5 лет, 5–6 лет, а также первоклассниками. Специальные тетради развивают следующие навыки и умения у дошколят из подготовительной группы: координация движений; внимание; память; усидчивость; воображение; словарный запас; мелкая моторика; орфографическая зоркость. Одновременно с физическими навыками ребенок повышает самооценку. Он осознает необходимость восприятия инструкции на слух. Делает работу четко и быстро, не отвлекаясь на птичку в окошке или смех соседа по парте. Еще одной задачей графической математики является расширение кругозора. Подбирать картинки нужно по возрасту и уровню развития малышей, но это только на первых порах. Позже рисуйте изображения, которые незнакомы дошкольникам. После начертания такой арифметической задачи на листе бумаги расскажите историю о необычном животном, познакомьте с местом обитания, покажите фотографию. Числовые задания под диктовку хорошо адаптируют детсадовцев к школе. Учат шестилеток самостоятельности, ориентированию в новом пространстве. Это поможет в освоении программы начальной школы, при знакомстве с новым коллективом, педагогом. Умение держать карандаш, выполнять устные инструкции, расшифровывать текст, писать – отличная база для подготовки к первому классу. Можно попросить ребенка распечатывать листы, шаблоны, помочь в интерпретации инструкции. Это помогает познакомить будущего дошкольника с офисной техникой, воспитать уважение к старшим. Правила выполнения Графические диктанты лучше использовать на математических уроках, например в 1 классе. Выполнение связано с системой координат, счетом, геометрическими фигурами. Методика проведения состоит из нескольких этапов: Подготовьте для ученика лист бумаги в клеточку. У себя держите готовый вариант диктанта. Поставьте точку на ученическом листке. Это будет начало отсчета. Или попросите дошкольника сделать это самостоятельно, объяснив, сколько места нужно отступить. Нарисуйте на бумаге для ребенка, только начинающего обучение, стрелочки, которые указывают направления сторон. Так легче получить правильный результат. На последующих занятиях подсказки уже не понадобятся. Объясните, что 1 шаг – это клетка. Если делаем 2 шага, линия проходит 2 клетки. Учитель диктует условия работы поэтапно. На готовом листе для педагога есть рисунок, координатная плоскость, состоящая из стрелок, цифр. Например, чтобы нарисовать елочку, проложите линию по горизонтали в 1 клеточку, по вертикали – 3 клеточки, наискосок – 3 клеточки и так далее. Чаще это просто стрелочки и цифры без слов. Педагог проговаривает, какие линии, куда, на какое расстояние чертят дошкольники. Инструкции даются друг за другом, не торопясь. После выполнения письменных заданий, получения результата сделайте выводы об уроке, стараниях дошкольников. Пожурите за невнимательность, если ребенок отвлекался по пустякам, или похвалите за достижения. Важно! Нельзя торопиться. Если дошколенок не успевает, чаще на первых занятиях, подождите его. Пропуск даже одного шага или неверное начертание испортят готовый результат. Временные рамки устанавливайте постепенно, ускоряя процесс на пару секунд от урока к уроку. Скачать задания Примеры можно бесплатно скачать в Сети в формате Word, напечатать на цветном и черно-белом принтере. Так вы составите для себя целую картотеку, подходящую для любого возраста детсадовцев и школьников. Скачать одним файлом графические диктанты по клеточкам. 01. Слон. 02. Жираф. 03. Змея. 04. Ключ. 05. Кот. 06. Сердце. 07. Утка. 08. Дом с трубой. 09. Человек. 10. Елочка. 11. Кораблик. 12. Белка. 13. Верблюд. 14. Кенгуру. 15. Олень. 16. Маленькая собачка. 17. Собака. 18. Заяц. 19. Робот. 20. Поросенок. 21. Ежик. 22. Цветок. 23. Медведь. Скачать одним файлом графические диктанты по клеточкам. Необходимые инструкции Для проведения развивающего занятия с маленькими детьми и старшими дошкольниками понадобится: тетрадь в клетку для каждого ребенка. Для младших дошколят лучше выбрать крупную клетку, для старших и первоклассников – мелкую; простые и разноцветные карандаши; ластик; бланк с образцом картинки; инструкция для педагога; линейка, если черточки длинные или идут по диагонали; картотека с рисунками. Первое занятие будет пробным. На нем нужно объяснить малышам принцип работы, цели и задачи упражнения. Постарайтесь сделать урок веселым, увлекательным, чтобы юный ученик заинтересовался. Устную инструкцию давайте четко, внятно. Проговорите с детьми все этапы работы: Давайте создадим волшебную картинку из разных черточек. Это будут заколдованные фигурки. Вам нужно их расшифровывать, делая записи на листе бумаги. Если вы выполните мои указания и просьбы правильно, не перепутаете право, лево, будете внимательно считать клетки, то получите удивительный результат. Я буду говорить: «Рисуем на бланке линию влево на 2 клетки, вправо – на 4 клетки». Вы проводите красивую и ровную черту, не отрывая руку от бумаги. Давайте потренируемся вместе на доске. Начертим в качестве примера под диктовку совсем легкий рисунок. А потом вы сделаете другой вариант без подсказок. После выполнения простого логического задания предлагайте дошкольникам боле сложные схемы для самостоятельной работы. Получив правильный ответ, обязательно хвалите ребят. Распечатайте похвальные грамоты, звездочки, сделайте доску личностного роста для каждого ученика. Если у детей возникает много трудностей с подобными упражнениями, педагог должен провести анализ методики, частых ошибок. Желательно вести протокол уроков, заносить в него итоговый результат за каждое занятие. Таким образом, прослеживается динамика развития навыков, умений дошколят. Возможно, уровень сложности картинок не подходит по возрасту, развитию умений, навыков. Используйте более простые шаблоны, увеличьте время на выполнение задания. Не нужно самостоятельно разрабатывать, составлять описание к картинкам для диктантов. Способы выполнения Методик проведения диктантов несколько: Слуховой. Ребеночек чертит график, картинку под диктовку. Педагог дает устную инструкцию о том, сколько клеток и в каком направлении нужно вести линию. После окончания работы сверьте полученный результат с образцом. Эта технология развивает внимание, концентрацию мозга при выполнении сложных заданий, сосредоточенность малыша. Рисование по образцу. Распечатайте готовый шаблон. Положите на стол перед ребенком. Пусть копирует в свою тетрадь. Важно смотреть внимательно за направлением линии, считать клетки. Заинтересуйте малыша фигурами, схемами. Девочка с удовольствием скопирует небольшой узор, цветы; мальчик – геометрические фигуры, машины, животных. Для 4–5-летних дошкольников выбирайте простой образец с примерно одинаковыми черточками, для шестилеток более сложный, где есть диагональные линии, длинные и короткие. Технология предполагает развитие зрительного внимания, его устойчивости, усидчивости. Рисуем симметрию. Заготовка представляет собой неоконченный рисунок, выполненный с одной стороны. Детсадовцу нужно дорисовывать половину картинки самостоятельно, соблюдая симметрию. Методика развивает пространственную ориентацию, мышление. Временные рамки Длительность урока зависит от возраста дошколят. Учитывайте их подготовленность к серьезным занятиям и уровень развития усидчивости. Если запланировать слишком продолжительные уроки с детьми, то они устанут, вы потеряете время и силы, а слишком короткие – не успеете выполнить нужный фронт работ. Педагогам, родителям лучше ориентироваться на временные рамки, установленные психологами: С детсадовцами 5-летнего возраста выполняйте письменные работы не больше 15 минут. С шестилетками – 15–20 минут. Первоклашек удерживайте за партой не больше получаса, минимум 20 минут. Графические упражнения кажутся незамысловатыми заданиями для дошкольников, простыми и иногда ненужными. Это ошибочное мнение. Такие уроки помогают детям вырастать уверенными в себе, с адекватной самооценкой, развитым вниманием и усидчивостью. А это пригодится для адаптации к школе. Полезные советы В процессе освоения математической науки, новых понятий у малыша и мамы возникают некоторые трудности. Преодолеть их помогут советы опытных педагогов. Перед началом занятий четко и понятно объясните ребенку, что вы хотите получить в итоге, зачем нужны эти уроки, какие знания получит дошкольник. Эта информация необходима будущему первокласснику для мотивирования действий, заинтересованности в процессе обучения. Не спешите ругать за ошибки. Разберите их вместе, исправьте. Наладьте дружественную атмосферу. Не загружайте ребенка сложными схемами с первых уроков. Должно пройти некоторое время, чтобы детсадовец прочно усвоил понятия лево – право, вверх – вниз. Подбирайте картинки с учетом индивидуальных особенностей развития интеллекта, скорости выполнения рисунков. Отдавайте предпочтение симметричным рисункам для медлительных малышей, повторяйте для них инструкцию несколько раз. Сложно даются маленьким ученикам наклонные линии. Заранее объясните, что такое диагональ, как ее прокладывают, разрешите пользоваться линейкой. Следите за осанкой, положением рук. Листок должен лежать на столе прямо, спинка не сгибаться в процессе письма. Соблюдайте тишину, если детсадовцам сложно сосредоточиться. Детям с гиперактивностью, рассеянным внимание, ЗПР лучше проводить индивидуальные занятия, печатать схемы для дополнительных упражнений дома. Радуйтесь положительному результату. Даже если итог работы средний, обязательно хвалите дошкольника за старания. Делайте перемены. В промежутках между упражнениями читайте веселые стихотворения для разминки пальчиков, попрыгайте, поиграйте. ВАЖНО! *при копировании материалов статьи обязательно указывайте активную ссылку на первоисточник: https://razvitie-vospitanie.ru/intellect/graficheskij_diktant.html Если вам понравилась статья – поставьте лайк и оставьте свой комментарий ниже. Нам важно ваше мнение! razvitie-vospitanie.ru Графический диктант по клеточкам для детей   Рисование по клеточкам очень увлекательное и одновременно полезное занятие для детей. На сегодняшний день выполнение графических диктантов стало невероятно популярным занятием, которое завоевало сердца многих дошколят, а также выступило отличным помощником в подготовке вашего ребенка к школе. С помощью рисования по клеточкам графических диктантов  малыш развивает навыки письма, так сказать, «набивает твердую руку». С помощью таких игровых занятий ребенок учится быть более внимательным, развивает логику, абстрактное мышление, усидчивость и кропотливость. Рисунок по клеткам в тетради учит ребенка ориентироваться в пространстве, а также помогает закрепить понятия вверх – вниз, вправо – влево. Математические диктанты, в качестве развивающей игры для детей,  используют в различных местах: дома, на отдыхе, на море, на даче или на специальных дополнительных занятиях по подготовке ребенка к школе. Здесь самое важное заинтересовать малыша, сказать, что в итоге получится неизвестная картинка, которую потом можно будет раскрасить карандашами или фломастерами.  Выполнение графических диктантов хорошо помогают родителям и педагогам планомерно подготовить ребенка к школе и предотвратить такие типичные трудности в обучении, как неразвитость орфографической зоркости, неусидчивость и рассеянность. Чем лучше ваш ребенок будет подготовлен к школе психологически, эмоционально и интеллектуально, тем увереннее он будет себя чувствовать и тем легче у него пройдет адаптационный период в начальной школе.   Советы по выполнению графического диктанта и правила рисования картинки по клеточкам. Взрослые должны понимать, что это все же больше игра для ребенка, чем обучение. Во время такого занятия очень важен настрой ребенка и доброжелательное отношение взрослого. Для выполнения графического диктанта  потребуется листок в клетку, простой мягкий карандаш, возможно еще ластик.  Весь диктант заключается в рисовании коротеньких линий на обычном тетрадном листе в клеточку. Желательно, чтобы ребенок не отрывал руку от тетрадного листа в процессе выполнения задания. В приведенных ниже схемах используются следующие обозначения: количество отсчитываемых клеток обозначается цифрой, а направление обозначается стрелкой. Следуйте стрелочкам слева направо.   Как выполнять графический диктант    Для начала на тетрадном листе в клеточку нанесите метку, которая будет служить началом отчета для ребенка. Обратите внимание, что на каждой схеме рисунка всегда указывается, сколько клеток нужно отступить от края и верха, чтобы начать диктант. В указанном месте, нужно поставить жирную точку. Теперь, на листе у ребенка, с вашей помощью будет изображена, точка отсчета.  Объясните малышу, что с этой точки нужно начинать рисовать линии (вправо, влево, вниз и вверх), в том направлении и с тем количеством клеток, которое вы назовете. Некоторые дошкольники хорошо воспринимают новую информацию, а другие постоянно путают понятия влево и вправо. Для того, чтобы облегчить задание и не запутать ребенка,  вы можете нарисовать в уголках тетрадного листа стрелочки ← и→  чтобы он запомнил, с какой стороны, где и что находиться. Теперь приступайте к выполнению задания. Вы будете диктовать ребенку, а он будет четко выполнять ваши указания, при условии, что он умеет считать до десяти. Считайте вместе, если понадобиться необходимое количество клеток. Диктуйте четко, не торопясь, ведь ребенок должен воспринимать все на слух.  Во время графического диктанта, убедитесь, что ребенок успевает. В конце работы посмотрите, насколько нарисованная фигура ребенком, совпадает с заданием. Если малыш ошибся, выясните вместе, где именно. Спокойно помогите, ластиком сотрите лишние в том месте, где произошла ошибка. Не ругайте ребенка, если у малыша сразу не получилось. Продолжительность  занятия 15 – 20  (максимум 30) минут.  А после выполнения диктанта обязательно похвалите своего малыша, спросите, понравилась ли ему такая игра? И будет ли он играть в нее с вами в следующий раз? Успехов вам в выполнении интересных заданий по клеткам!       Читать другие похожие по тематике статьи: Дорисуй половинку по клеточкам  Рисование по клеточкам. Симметричные рисунки в тетради Математическая обучалочка. Рисуем орнамент по клеточкам Готовим руку к письму. Рисуем по клеточкам и точкам gofunnykids.com

Как рисовать по клеточкам животных легких. Сложные графические диктанты по клеточкам для школьников.

Графический диктант обычно базируется на том, что на листике в клеточку нужно изобразить тот или иной рисунок, при чем очень схематично. Такое упражнение прекрасно развивает фантазию дошкольника, позволяет развивать мелкую моторику ручек ребенка, позволяет ориентироваться по сторонам, запомнить, где право-лево, верх-вниз, а также обучает ребенка тому, как можно схематично нарисовать те или иные рисунки.

Графические диктанты могут выполняться детьми двумя разными способами. Первый заключается в том, что ребенку дается уже готовая картинка и предлагается нарисовать точно такую же. Второй способ заключается в том, что учитель или мама диктует малышу, что нужно рисовать и произносит, сколько клеток, и в какую сторону нужно провести карандашиком.

Подготавливая дошкольников к школе, обязательно нужно обращать большое внимание на то, как развивается мелкая моторика ручек деток. Если ручки малыша будут развиты, то у него уже будет наблюдаться необходимая зрелость мозга для того, чтобы речь, мышление и письмо развивались в правильном направлении. Малыши, которые хорошо владеют своими руками, более понятливы и сообразительны. Именно для развития умения мыслить, а также для тренировки мелкой моторики рук и проводятся графические диктанты для детей младшего школьного возраста

Такие упражнения, где нужно рисовать по клеточкам, помогут воспитателям и родителям подготовить малыша к школе, развить в нем орфографическую зоркость, усидчивость и внимательность. Если по клеточкам рисовать регулярно, то у дошкольников будет развиваться пространственное воображение, координация движений, мышление, внимание и память.

Для школьников

Для деток младшего школьного возраста можно предлагать более сложные графические диктанты. Такие предложения будут полезны, если дети уже знакомы с данным упражнением и смогут легко и быстро, а главное, без ошибок, справиться с графическим диктантом поменьше.

Дети должны уже хорошо владеть знаниями, где лево-право и верх-низ, а также оперировать такими понятиями как точка, клеточка, угол и сторона. Сложный графический диктант заключается в том, что школьник должен не только правильно выполнить упражнение, чтобы на листике появилась нужная картинка, но также и сделать это максимально аккуратно и внимательно. Учитель может следить за тем, чтобы весь класс слушал его предложения по диктанту и чертил все правильно, избегая неточностей и ошибок.

Животные

По клеточкам с детьми будет очень весело и занятно. Чтобы заинтересовать малышей, поговорите с ними о том, чем отличаются животные одни от других. Попробуйте внести предложения нарисовать то или иное животное, поговорите с детьми о его отличительных особенностях. Тогда графический диктант с животными по клеточкам пройдет очень хорошо.

Мы предлагаем вам попробовать нарисовать симпатичную небольшую черепашку. Поставим точку ближе в левому края листа и проведем 2 клетки вправо, 4 вниз, 1 вправо, 2 вверх, 1 вправо, 1 вверх, 4 вправо, 1 вниз, 1 право, 3 вниз, 1 влево, 1 вниз, 1 влево, 1 вверх, 4 влево, 1 вниз, 1 влево, 1 вверх, 1 влево, 3 вверх, 1 влево, 2 вверх.

Робот

Деткам будет также интересно рисовать роботов, мы предлагаем вам средней сложности вариант рисования робота по клеточкам. Помните, что у детей во время рисования должен быть настрой на такую работы и вы, как взрослый, должны его поддерживать. Нет ничего страшного в том, что малыш может ошибиться, поправляйте его и подсказывайте ему.

Кенгуру

Скорее всего, деткам очень нравятся графические и их безумно забавляет рисовать по клеточкам. Мы предлагаем вам не слишком мудреный рисунок кенгуру и скорее всего детки не откажутся от предложения нарисовать его.

Графический диктант кенгуру

Самолет

Любые занятия с детками должны строится по принципу от простого к сложному. Берите сначала самые простенькие упражнения и постепенно подводите детей к более трудным и замудренным. Достаточно трудным считается упражнение самолет.

Узоры

Узоры как никакое другое упражнение помогает развивать малышам глазомер и мелкую моторику рук. Узоры могут быть как сложными, так и совсем простыми. Постарайтесь начинать с простеньких, а заканчивать трудными и интересными узорами.

Графический диктант 3.рисуем корабль

Почему именно животные? Так как они лучшие друзья людей.

Дети и даже взрослые обожают их рисовать, в этой статье мы подберём несколько рисунков по рисовании рисунки по клеточкам животные . Их вы сможете срисовать приложив лист к монитору или отсчитав клеточки от полей листа (что более интересно! ) .

Лёгкие рисунки животных по клеточкам.

Лёгкий рисунок панды

Лёгкий рисунок головы лошади

Лёгкий рисунок собаки

Лёгкий рисунок улиток

Лёгкий рисунок медведя

Лёгкий рисунок совы

Сложные рисунки животных по клеточкам.

Здесь вы увидите подборку рисунков для более продвинутых художников.

Три сложных рисунка собачек

Очень сложный рисунок тигрёнка

Для того чтобы нарисовать этого котика, вы должны быть уже мастером рисование по клеточкам. И вам нужен будет специальный лист бумаги.

Не Совсем реальное животное. Попробуйте нарисовать пони из знаменитого мультсериала My little pony

Средней сложности котик

Несколько видео уроков по рисованию животных по клеточкам.

Заключение темы рисунки по клеточкам животные.

Обязательно попробуйте нарисовать все рисунки с нашей статьи и вы точна повысите свой уровень рисование. Всем удачи.

P.S p.s Если вам нравится рисовать по клеточкам то больше рисунков вы можете посмотреть тут.

Диктанты 1 класс — ✍️ «По русскому»

Сборник диктантов по русскому языку для учеников 1 классов — диктанты разбиты по темам и правилам.

Объём диктантов для 1 класс: 15 — 30 слов.

Оценивание работы

Диктант служит средством проверки орфографических и пунктуационных умений и навыков. Грамматический разбор есть средство проверки степени понимания учащимися изучаемых грамматических явлений, умения производить простейший языковой анализ слов и предложений.

• «5» – за работу, в которой нет ошибок.
• «4» – допущено 1–2 ошибки.
• «3» – допущено 3–5 ошибок.
• «2» – допущено более 5 ошибок.

ГРАММАТИЧЕСКИЕ ЗАДАНИЯ

• «5» ставится за безошибочное выполнение всех заданий.
• «4» ставится, если ученик правильно выполнил не менее 3/4 заданий.
• «3» ставится, если ученик правильно выполнил не менее 1/2 заданий.
• «2» ставится, если ученик не справился с большинством грамматических заданий.

Диктанты по русскому 1 класс ФГОС «Школа России»

1. Сочетания ча, ща, чу, щу
2. Сочетания жи, ши
3. Обозначение мягкости согласных звуков
4. Заглавная буква в именах собственных

Диктант «Настала весна»

Зима ушла. Солнышко начало греть землю. Весело зажурчали ручьи. Запели птицы на ветвях. Набухшие почки сменила листва. Всё вокруг зазеленело. Распустились яркие цветы. Витя несёт букет ромашек для мамы. Объём слов: 29

Диктант «Первый снег»

Выпал снег. Все рады снегу. Миша и Яша вышли во двор. Там их ждала Оля. Папа купил ей лыжи. Дети идут в парк. Объём слов: 23

Контрольный диктант «Ранняя весна»

Яркое солнце. Ранняя весна. Зеленеют проталины. Звонко поют зяблики. Проснулся ежик. Объём слов: 11 / Г. Скребицкий

Диктант «Жители дома»

Осенью мы часто топили печку. У огонька устраивались кот Вьюнок и ручной зайчик Ушастик. Птенчик Чир любил сидеть над дверью. Объём слов: 22

Диктант «Книга»

Я люблю читать. Тётя Люся купила мне книгу. Там картинки. Вот лось и конь. А это шишки ёлки. Я читаю стихи о лисе. Объём слов: 23

Контрольный диктант «Весна»

Весна. Звонко запели птицы. Юра и Коля гуляют в парке. Пес Полкан пугает ворон. Мальчики сели на скамейку. В траве зашуршал ежик. Он проснулся. Объём слов: 24

Диктант «Весна»

В начале марта мы прощаемся с зимой. Не трещат морозы. Мы встречаем весну. Скоро запищат галчата, грачата и скворчата. Объём слов: 19

Диктант «Начало зимы»

День стоял тёплый. Дули нехолодные ветры. Мягкий пушистый снег сыпал почти каждую ночь. Он долго не залёживался. Сразу его начинали соскребать с асфальта. Грузили в автомашины и вывозили за город. Объём слов: 30

Диктант «Зима»

Зима. Мы бежим по улице. Мы дрожим от холода. Крыши домов в снегу. Снег пушист. Объём слов: 15

Диктант «Школа»

Мне семь лет. Я учусь в школе. Идет урок. Мы учим русский язык. Ученики работают хорошо. Объём слов: 16

Итоговый диктант за 1 класс «В лесу»

Мальчики Юра и Ваня идут в лес. Рядом бежит пес Бимка. По веткам скачут рыжие белки. Поют чижи. Пахнут ландыши. Дятлы стучат по дубу. Под елкой укрылись серые ежики. Объём слов: 29

Итоговый диктант за 1 класс «На реке»

Вот и настали теплые деньки. Ребята по тропке идут к реке. Там шумно и весело. Малыши играют в песке. Они строят большой дом. Объём слов: 23

Итоговый диктант за 1 класс «Гроза»

Ваня и Дима были у реки. Они ловили рыбу. Ваня поймал щуку, а Дима леща. Вдруг Ваня увидел тучу. Застучали капли дождя. Мальчики помчались домой. Объём слов: 25

Контрольный диктант «Друзья»

Ребята работали. А Петя сел на ступеньку и сидит. Кошке песню поёт. * Потом услышал ребячьи крики и помчался к друЗьям. Давно пора. Объём слов: 22 / В. Голявкин

Диктант «Прятки»

В лесу стоит избушка. Там живут зайчата. Часто к зайчатам в гости ходит белка. Зайчата и белка играют в прятки. Объём слов: 20

Диктант «Собака и кот»

Папа и мама любили животных. Жили в доме собака Джек и рыжий кот Мурзик. Часто бывали ежи и зайчата. Зверьков я приносил из леса. Объём слов: 24 / Г. Скребицкий

Диктант «Наш двор»

Наш двор большой. Я и мой брат Алёша сделали горку.
Хороша наша горка. Малыши были рады. Быстро мчат они на санках с горки. Объём слов: 24

Диктант «Брат»

Вася и Юра идут в школу. Оля пишет брату письмо. Он живет в Кишинёве. Там есть река Бык. Брат часто удит рыбу. Объём слов: 22

Диктант «Хозяин двора»

Лучи солнышка залили ярким светом весь двор. Важно по двору шагал петух Яшка. Он грозный, всех пугал. Яшка — хозяин двора. Объём слов: 20

Диктант «В лесу»

Пойдем скорей в лес! Вот на дереве сойка. Она вертит шейкой. Вот большой муравейник. Объём слов: 14

← 1 2 3 →

M2-подобных макрофагов диктуют клинически значимую иммуносупрессию при метастатическом раке яичников

Введение

Опухоль — это сложный и динамичный процесс, включающий различные этапы: злокачественная трансформация, локальное прогрессирование и метастатическое распространение1. за счет множества взаимодействий между неопластическими клетками и окружающей их средой (включая эпителиальные, эндотелиальные, стромальные и иммунные клетки, а также внеклеточный матрикс), в целом определяя, будет ли новообразованное поражение ликвидировано иммунной системой, бесконтрольно прогрессировать или сохраняться временно находится под контролем как спящий микрометастаз.2 3 Следует отметить, что состав, локализация и функциональная ориентация микроокружения опухоли (TME) демонстрируют значительную степень гетерогенности не только по пациентам, типам рака и стадиям заболевания, но также и по различным очагам одной и той же опухоли. Серозная карцинома степени (HGSC) представляет собой один из наиболее летальных видов рака брюшины.9 Плохой прогноз для пациентов с HGSC в основном связан с ранним распространением в брюшную полость и формированием устойчивых к терапии метастазов.10 HGSC действительно демонстрируют характерное внутрибрюшинное метастатическое распространение с явным предпочтением сальника.10 Микроокружение сальника, которое окружено одним слоем мезотелиальных клеток, в основном состоит из адипоцитов, встроенных в коллагеновый матрикс, с вкраплениями фибробластов, эндотелиальных клеток. клетки и резидентные иммунные клетки.11 12 Во время метастатического процесса эти стромальные клетки рекрутируются и перепрограммируются своими злокачественными аналогами, чтобы поддерживать выживание и пролиферацию раковых клеток.10 Накапливающиеся данные показывают, что как клеточные, так и неклеточные компоненты первичного TME (P-TME) динамичны, развиваются по мере прогрессирования заболевания и обладают надежной прогностической и прогностической ценностью.13-15 Однако HGSC TME в местах метастазирования ( M-TME) определяется плохо. Точно так же неясно, имеют ли иммунологические характеристики M-TME прогностическую или прогностическую ценность у пациентов с HGSC.

Здесь мы сравнили транскрипционный профиль 24 парных P-TME и M-TME пациентов с HGSC с целью определения молекулярных сигнатур, которые могут предсказать состав TME и повлиять на клинический результат.Функциональный анализ дифференциально экспрессируемых генов (ДЭГ) выявил сильную связь с организацией внеклеточного матрикса и иммунными ответами. Комбинируя биомолекулярные, цитофлуориметрические и иммуногистохимические исследования, мы демонстрируем, что M-TME содержат более высокую плотность инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL) по сравнению с P-TME. Однако плотность TIL в M-TME не связана с улучшенным клиническим исходом, в основном из-за функционального нарушения, вызванного устойчивой иммуносупрессией в местах метастазирования макрофагами, связанными с опухолью (TAM).Хотя дихотомическое различие между противоопухолевыми (M1) и протопухолевыми (M2) ТАМ не отражает должным образом функциональную сложность этого клеточного компартмента, 16 17 M-TME пациентов с HGSC действительно был обогащен иммунодепрессивным CD68 ⁺ CD163 ⁺ ТАМ, которые были здесь, называются М2-подобными ТАМ.

Результаты

Транскрипционная характеристика первичных и метастатических микроокружений HGSC

Сначала мы использовали секвенирование РНК (RNA-seq) для сравнения профиля экспрессии генов 24 парных первичных (P-TME) и метастатических (M-TME) опухолей образцы от пациентов с HGSC, которые не получали неоадъювантную химиотерапию (основная группа) (таблица 1).Мы определили набор из 1468 DEG (онлайн-дополнительная таблица 3), связанных с тремя основными функциональными кластерами (рисунок 1A). Обогащенный анализ терминов генной онтологии (GO) из кластера 1, который был чрезмерно представлен в P-TME, в основном выявил DEG, связанные с женской репродуктивной системой (рисунок 1B). Напротив, кластеры 2 и 3, которые были чрезмерно представлены в M-TME, были обогащены генами, связанными с организацией внеклеточного матрикса, иммунным ответом, перемещением лимфоцитов и регуляцией иммунной системы (рисунок 1B).Эти данные показывают, что, хотя в P-TME преобладают гены, связанные с яичниками, M-TME содержит обильный иммунный инфильтрат.

Рисунок 1

Транскрипционная характеристика первичной и метастатической серозной карциномы высокой степени злокачественности (HGSC). (A) Иерархическая кластеризация 1468 транскриптов (кратность> 2, скорректированное значение p <0,05), которые были значительно изменены в парных 24 образцах микроокружения метастатической опухоли (M-TME) по сравнению с 24 образцами первичного микроокружения опухоли (P-TME) из исследования группа 1, как определено секвенированием РНК.(B) Анализ генетической онтологии (биологические процессы), дифференциально экспрессируемый в M-TME по сравнению с P-TME. См. Также дополнительную онлайн-таблицу 3. (C) Относительные уровни экспрессии наборов генов, связанных с T-клетками, B-клетками, CD8 ⁺ T-клетками, дендритными клетками (DC), естественными киллерами (NK), клетками T _H 1 , T _H 2 клетки, моноциты, регуляторные T (T _REG ) клетки и супрессорные клетки миелоидного происхождения (MDSC) в парных образцах 24 P-TME и 24 M-TME, как определено метагенами по данным секвенирования РНК. из 1-й учебной группы.Ящичные диаграммы: нижний квартиль, медиана, верхний квартиль; усы, минимум, максимум.

Как опубликовано ранее нами и другими авторами, 13 20 26 27 состав, локализация и функциональная ориентация иммунологического P-TME пациентов с HGSC несут надежную прогностическую и прогностическую информацию. Однако мало что известно о потенциальном влиянии иммунологического M-TME на клинические исходы этих пациентов. Руководствуясь этими предпосылками, мы использовали «метагенные» маркеры для оценки относительной численности различных популяций иммунных клеток в P-TME по сравнению с M-TME в исследуемой группе 1.В соответствии с данными о полном транскриптоме (рис. 1B), образцы метастазов были обогащены наборами генов, связанных с Т-клетками (p <0,0001), B-клетками (p = 0,0002), CD8 ⁺ T-клетками (p = 0,0003), дендритными клетки (DC, p = 0,0005), естественные клетки-киллеры (NK) (p = 0,0005), T _H 1 клетки (p <0,0001), T _H 2 клетки (p = 0,009), моноциты (p = 0,0002 ), а также регуляторные T (T _REG ) клетки (p = 0,0002) и клетки-супрессоры миелоидного происхождения (MDSC, p <0,0001) (рисунок 1C). Эти данные показывают, что субпопуляции иммуностимулирующих и иммуносупрессивных клеток увеличиваются в M-TME HGSC по сравнению с их P-TME.

Чтобы подтвердить эти данные с помощью другого технологического подхода и в большей группе пациентов с HGSC, мы затем проанализировали состав иммунного инфильтрата в парных образцах 80 P-TME и 80 M-TME (из исследовательской группы 1) с помощью иммуногистохимии ( рисунок 2А). Подтверждая транскриптомные наблюдения, мы обнаружили более высокую плотность DC-LAMP ⁺ зрелых DC (p <0,0001), CD20 ⁺ B-клеток (p <0,0001), CD8 ⁺ T-клеток (p = 0,001) и NKp46. ⁺ NK-клеток (p = 0.001) в M-TME по сравнению с P-TME (рисунок 2B). Чтобы оценить прогностическое влияние иммунного инфильтрата P-TME и M-TME, мы исследовали общую выживаемость (OS) при стратификации всей когорты пациентов на основе средних значений DC-LAMP ⁺ DC, CD20 ⁺ B-клеток, CD8 ⁺ Т-клеток и NKp46 ⁺ NK-клеток (рисунок 2C, D). Как было показано нами ранее, сильная инфильтрация опухоли DC-LAMP ⁺ DC, CD20 ⁺ B-клетками и CD8 ⁺ T-клетками в P-TME была связана с благоприятной ОС в исследуемой группе 1 (рисунок 2C).Более того, пациенты с обильным инфильтратом DC-LAMP ⁺ DC в ткани M-TME демонстрировали значительно более длительную ОС по сравнению с их аналогами DC-LAMP ^Lo (p = 0,0084). Однако плотность CD20 ⁺ B-клеток, CD8 ⁺ T-клеток и NKp46 ⁺ NK-клеток в M-TME не повлияла на ОС в этой когорте пациентов (рисунок 2D). Одномерный анализ Кокса подтвердил прогностическое влияние инфильтрации зрелых DC в M-TME (HR = 0,74, 95% ДИ 0.От 60 до 0,92; р = 0,006) (таблица 2).

Рисунок 2

Прогностическое влияние иммунного инфильтрата на опухолевое микроокружение первичной и метастатической ткани тяжелой серозной карциномы (HGSC). (A) Типичные изображения лизосомно-ассоциированного мембранного белка (DC-LAMP), CD20, CD8 и иммуноокрашивания p46 естественного киллера (NK) в первичном микроокружении опухоли (P-TME) и образцах микроокружения метастатической опухоли (M-TME) из исследования группа 1. Масштабная линейка = 50 мкм. (B) Плотность клеток DC-LAMP ⁺ , CD20 ⁺ , CD8 ⁺ и клеток NKp46 ⁺ в парных 80 P-TME по сравнению с 80 образцами M-TME из исследовательской группы 1, как определено с помощью иммуноокрашивания. .Ящичные диаграммы: нижний квартиль, медиана, верхний квартиль; усы, минимум, максимум. (C и D) Общая выживаемость (OS) 80 пациентов из исследуемой группы 1 по стратификации на основе средней плотности клеток DC-LAMP ⁺ , клеток CD20 ⁺ , клеток CD8 ⁺ и клеток NKp46 ⁺ в P-TME (C) и M-TME (D). Кривые выживаемости оценивались методом Каплана-Мейера, а различия между группами оценивались с использованием логрангового критерия. Сообщается количество пациентов из группы риска и значения p.нс, не имеет значения.

Таблица 2

Одномерный анализ пропорциональных рисков Кокса

Функциональное нарушение CD8

⁺ Т-клеток из M-TME пациентов с HGSC

Удивлен тем фактом, что инфильтрирующие M-TME CD8 ⁺ Т-клетки не оказали влияния по клиническому исходу, в противоречии с их аналогами, инфильтрирующими P-TME, 13 20 мы решили сравнить функциональную способность этих двух популяций CD8 ⁺ Т-клеток. С этой целью мы сосредоточились на недавно резецированных опухолях проспективной когорты из 15 пациентов с HGSC (исследовательская группа 2).В этих условиях неспецифическая стимуляция инфильтрирующих опухоль мононуклеарных клеток с помощью PMA и иономицина вызвала более выраженное увеличение клеток CD8 ⁺ , положительно окрашивающих цитотоксический эффекторный гранзим B (GZMB), когда мононуклеарные клетки были выделены из P-TME. по сравнению с M-TME (p = 0,04) (рисунок 3A, B). Соответственно, мРНК, кодирующие множество эффекторных молекул Т-клеток CD8 ⁺ , включая IFNG (p = 0,01), перфорин 1 (PRF1; p = 0,04), гранулизин (GNLY; p = 0,006) и GZMB ( p = 0 .005) были чрезмерно представлены в образцах P-TME по сравнению с образцами M-TME, как определено с помощью RNA-seq в образцах из исследовательской группы 1 (рисунок 3C). Эти данные свидетельствуют о том, что CD8 ⁺ Т-клетки из M-TME функционально нарушены и обладают ограниченными эффекторными функциями.

Рисунок 3

Функциональное истощение Т-клеток в микроокружении метастатической опухоли (M-TME) пациентов с серозной карциномой высокой степени злокачественности (HGSC). (A и B) Процентное содержание интерферона гамма (IFN-γ ⁺ ) и гранзима B (GZMB) ⁺ в популяции CD3 ⁺ CD8 ⁺ парных 15 первичных (P-TME) и 15 микроокружение метастатической опухоли (M-TME) у пациентов из 2-й исследовательской группы при неспецифической стимуляции форбол-12-миристат-13-ацетатом (PMA) и иономицином, как определено с помощью проточной цитометрии.Приводятся стратегия стробирования (A) и количественные результаты (B). Ящичные диаграммы: нижний квартиль, медиана, верхний квартиль; усы, минимум, максимум. (C) Уровни экспрессии IFNG, перфорина 1 (PRF1), гранулизина (GNLY) и GZMB относительно CD3E в 24 P-TME по сравнению с 24 образцами M-TME из исследовательской группы 1, как определено с помощью секвенирования РНК. Приведены значения P. (D) Плотность CD8 ⁺ T-клеток и лизосомально-ассоциированного мембранного белка (DC-LAMP ⁺ ) дендритных клеток (DC) в M-TME лиганда запрограммированной смерти 1 (PD-L1) ^— по сравнению с PD -L1 ⁺ и запрограммированная гибель клеток 1 (PD-1) ^Lo по сравнению с PD-1 ^Hi пациентов из исследуемой группы 1 (n = 80), как определено с помощью иммуноокрашивания.Ящичные диаграммы: нижний квартиль, медиана, верхний квартиль; усы, минимум, максимум. (E) Распределение уровней PD-L1 и плотности клеток PD-1 ⁺ и лимфоцит-активирующего гена 3 (LAG-3) ⁺ в парных образцах 80 P-TME и 80 M-TME из исследовательской группы 1, как определено иммуноокрашиванием. Ящичные диаграммы: нижний квартиль, медиана, верхний квартиль; усы, минимум, максимум. (F) Стратегия гейтирования IFN-γ ⁺ CD3 ⁺ CD8 ⁺ Т-клеток в парных 15 образцах P-TME и 15 M-TME (исследовательская группа 2).Сообщается процент ячеек в каждом гейте. (G) Кратное изменение IFN-γ ⁺ и GZMB ⁺ CD8 ⁺ Т-клеток, выделенных из парных 15 образцов P-TME и 15 M-TME (исследовательская группа 2) после неспецифической стимуляции PMA и иономицином в контексте блокады PD-1 и TIM-3 (Atbs), как определено с помощью проточной цитометрии. Указаны значения P. (H) Иерархическая кластеризация 33 генов, связанных с передачей сигналов цитокинов / хемокинов, которые дифференциально экспрессировались в парных 24 образцах M-TME по сравнению с 24 образцами P-TME из исследовательской группы 1.Приведены значения P. ИЛ, интерлейкин; нс, не имеет значения.

Поскольку экспрессия коингибиторных рецепторов является основным фактором функционального истощения Т-клеток при множественных злокачественных новообразованиях, включая рак яичников, 28 мы затем проанализировали статус иммунных контрольных точек в P-TME по сравнению с M-TME у пациентов с HGSC. С этой целью парные образцы 80 P-TME и 80 M-TME из исследовательской группы 1 были проанализированы иммуногистохимическим методом на (1) экспрессию коингибиторного лиганда PD-L1 в опухолевом гнезде и (2) инфильтрацию иммунными клетками, экспрессирующими коингибиторный рецепторы PD-1 (рецептор для PD-L1) и LAG-3 (онлайн-дополнительная фигура 3).Как экспрессия PD-L1, так и плотность клеток PD-1 ⁺ в M-TME положительно связаны с инфильтрацией DC-LAMP ⁺ DC (p = 0,03 и p = 0,002, соответственно). Аналогичные результаты были получены для CD8 ⁺ Т-клеток (p = 0,002 и p = 0,01, соответственно) (рисунок 3D). Однако уровни PD-L1, а также инфильтрация клетками PD-1 ⁺ и LAG-3 ⁺ были неоднородными в разных образцах и не различались в зависимости от места оценки (рис. 3E), что позволяет предположить, что PD-1 / Ось PD-L1 и системы LAG-3 не являются основными детерминантами функционального истощения в этой ситуации.

Эти результаты повторяют предыдущие результаты нашей группы по P-TME, где функциональное истощение, по-видимому, в основном зависит от коингибиторного рецептора вируса гепатита А, клеточного рецептора 2 (наиболее известного как TIM-3) .13 20 Поэтому мы использовали проточную цитометрию на образцы из исследовательской группы 2, чтобы выяснить, работает ли TIM-3 также в M-TME (рисунок 3F). Мы обнаружили, что одновременное блокирование PD-1 и TIM-3 улучшает способность CD8 ⁺ Т-клеток из P-TME, но не M-TME, реагировать на неспецифическую стимуляцию путем синтеза эффекторных молекул, включая IFN-γ. и GZMB (рисунок 3G).Кроме того, P-TME содержит увеличенное количество PD-1 ⁺ TIM-3 ⁺ клеток по сравнению с M-TME (онлайн-дополнительная фигура 3B), несмотря на то, что общая плотность Т-клеток снижена (фигура 2B). Таким образом, TIM-3 не является основной мишенью для иммуностимуляции M-TME пациентов с HGSC.

Таким образом, мы предположили, что иммуносупрессия в M-TME в основном происходит из-за передачи сигналов цитокинов. Мы исследовали эту возможность в нашем наборе транскриптомных данных из исследовательской группы 1, выявив 33 DEG, связанных с передачей сигналов цитокинов / хемокинов, которые были чрезмерно представлены в M-TME по сравнению с P-TME (рисунок 3H).Эти DEG включают основных участников в связанной с раком иммуносупрессии с помощью ТАМ, включая (но не ограничиваясь ими): хемокиновый лиганд 22 (CCL22) с мотивом CC, интерлейкин 6, интерлейкин 10 (IL-10), субъединицу рецептора IL-10 альфа, GATA- связывающий белок 3 и фактор регуляции интерферона 4 (рис. 3H), подтверждая возможность того, что иммуносупрессивные схемы, задействованные в M-TME, происходят из передачи сигналов цитокинов.

M2-подобные ТАМ диктуют клинически значимую иммуносупрессию в M-TME HGSC

Под влиянием потенциального участия ТАМ-зависимой передачи сигналов цитокинов в иммуносупрессию в местах метастазирования мы использовали иммунофлуоресцентную микроскопию для изучения инфильтрации опухоли CD68 ⁺ CD163 ⁺ M2-подобных ТАМ в парных образцах 50 P-TME и 50 M-TME из исследовательской группы 1 (рисунок 4A).Мы обнаружили более высокую плотность M2-подобных TAM в M-TME по сравнению с P-TME (p = 0,008) (рисунок 4B), но количество M2-подобных TAM не коррелировало с частотой различных иммунных компонентов. M-TME, включая клетки NKp46 ⁺ , DC-LAMP ⁺ , CD20 ⁺ и CD8 ⁺ (рисунок 4C). Чтобы оценить прогностическое влияние M2-подобных ТАМ в этой когорте пациентов, мы стратифицировали пациентов из исследуемой группы 1 на основе средней плотности M2-подобных ТАМ в P-TME и M-TME с последующим ретроспективным анализом OS.Хотя плотность M2-подобных ТАМ в P-TME не могла повлиять на ОС в этой группе пациентов, пациенты с высокой плотностью ТАМ M2 в M-TME имели плохую ОС по сравнению с их аналогами M2 ^Lo (p = 0,00033) (рисунок 4D). Одномерная регрессия Кокса подтвердила отрицательное прогностическое влияние инфильтрации M-TME M2-подобными ТАМ (HR = 6,74, 95% доверительный интервал от 1,58 до 28,68, p = 0,009; таблица 2), и значимость этой связи была дополнительно подтверждена многомерной регрессией Кокса. (ЧСС = 10.85, 95% ДИ от 2,28 до 51,44, p = 0,002; таблица 3). Затем мы сравнили профиль транскрипции 12 пациентов с M2 ^Hi и 12 M2 ^Lo M-TME (исследовательская группа 1). Мы идентифицировали 1016 генов, которые были значительно перепредставлены в выборках от пациентов с M2 ^Lo по сравнению с их аналогами M2 ^Hi TAMs (рисунок 4E, дополнительная онлайн-таблица 4), а функциональные исследования выявили сильную связь между такими DEG и иммунной системой. активация системы и пролиферация Т-клеток (дополнительный рисунок 4 онлайн).Более того, мы наблюдали отрицательную корреляцию между инфильтрацией M-TME M2-подобного ТАМ и цитолитической активностью (CYT) на основе уровней транскриптов, кодирующих цитолитические эффекторы гранзима A и PRF1 (рисунок 4F) .29 Эти результаты подтверждают отрицательное влияние. M2-подобных ТАМ на иммунные эффекторные функции M-TME у пациентов с HGSC. При разделении пациентов из основной группы на четыре подгруппы на основе инфильтрации M2 TAM и CYT в M-TME (M2 ^Hi / CYT ^Hi , M2 ^Hi / CYT ^Lo , M2 ^Lo / CYT ^Hi , M2 ^Lo / CYT ^Lo ), мы обнаружили, что люди M2 ^Lo / CYT ^Hi имели улучшенную ОС по сравнению с их аналогами M2 ^Hi / CYT ^Hi (p = 0.02) (рисунок 4G). В целом, эти данные подтверждают критическую роль M2-подобных ТАМ в установлении клинически значимой иммуносупрессии в M-TME пациентов с HGSC.

Рисунок 4

M2-подобные опухоль-ассоциированные макрофаги (ТАМ) диктуют клинически значимую иммуносупрессию в метастатическом опухолевом микроокружении (M-TME) серозной карциномы высокой степени злокачественности (HGSC). (A) Типичные изображения иммунофлуоресценции CD68 и CD163. Клетки, экспрессирующие CD68 (зеленая стрелка), клетки, экспрессирующие CD163 (красная стрелка), и клетки, коэкспрессирующие CD68 и CD163 (красная / зеленая стрелка).Для автоматического подсчета программное обеспечение Calopix позволяет сегментировать клетки на основе окрашивания ядра DAPI и морфометрических характеристик. (B) Плотность M2-подобных ТАМ, определенная как клетки CD68 ⁺ CD163 ⁺ в 50 первичном микроокружении опухоли (P-TME) и 50 M-TME HGSC из исследовательской группы 1. (C) Корреляционная матрица для M2-подобные ТАМ, естественные киллеры (NK) p46 ⁺ , лизосомно-ассоциированный мембранный белок (DC-LAMP) ⁺ , CD20 ⁺ и клетки CD8 ⁺ в опухолевом гнезде пациентов с HGSC (исследование группа 1).Отображается коэффициент корреляции. (D) Общая выживаемость (OS) 50 пациентов с HGSC из исследовательской группы 1 по стратификации, основанной на средней плотности M2-подобных ТАМ в P-TME и M-TME. Кривые выживаемости оценивались методом Каплана-Мейера, а различия между группами оценивались с использованием логрангового критерия. Сообщается количество пациентов из группы риска и значения p. (E) Иерархическая кластеризация 1016 транскриптов, которые были значительно изменены у 12 пациентов M2 ^Hi M-TME по сравнению с их 12 аналогами M2 ^Lo M-TME из группы исследования 1, как определено с помощью секвенирования РНК.(F) Относительные уровни экспрессии индекса иммунной цитолитической активности (CYT), основанные на уровнях транскриптов гранзима A (GZMA) и перфорина (PRF1) в образцах 24 M2 ^Lo и 24 M2 ^Hi P-TME и M-TME HGSC из исследовательской группы 1, как определено секвенированием РНК. (G) OS 50 пациентов с HGSC из группы исследования 1 по стратификации на основе средней плотности M2-подобных ТАМ и иммунного индекса CYT. Кривые выживаемости оценивались методом Каплана-Мейера, а разница между группами оценивалась с помощью лог-рангового теста.Сообщается количество пациентов из группы риска и значения p. нс, не имеет значения.

Таблица 3

Многомерный анализ пропорциональных рисков Кокса

Наконец, мы исследовали потенциальную роль других иммуносупрессивных сетей, включая сети, управляемые трансформирующим фактором роста бета 1 (наиболее известным как TGF-β1), 28 фибробластов, ассоциированных с раком (CAF). , 30 и эндотелиальные клетки. Используя наш набор транскриптомных данных из исследовательской группы 1, мы наблюдали значительное увеличение DEGs, связанных с TGF-β и сигнатурами CAF, в M-TME пациентов с HGSC по сравнению с P-TME (p = 0.001, p = 0,0002, соответственно) (дополнительный рисунок 5A онлайн). Напротив, транскриптомная сигнатура эндотелиальных клеток не различалась между M-TME и P-TME. Более того, мы наблюдали сильную корреляцию между сигнатурой TGF-β (и CAF) и сигнатурами MDSC и клеток T _REG в M-TME (но гораздо меньше) в P-TME HGSC (онлайн-дополнительный рисунок 5B). . Однако ни TGF-β, ни сигнатура CAF в M-TME не повлияли на ОС в нашей когорте пациентов на основании одномерного анализа Кокса (онлайн-дополнительная таблица 5).Напротив, наличие M2-подобных макрофагов в M-TME было связано с повышенным риском смерти (HR = 56,85, 95% доверительный интервал от 1,41 до 2291,5; p = 0,032) (дополнительная таблица 5 онлайн).

Обсуждение

Несмотря на недавние терапевтические достижения, рак яичников по-прежнему представляет собой наиболее смертоносное из гинекологических злокачественных новообразований, в основном отражающее проявление на поздней стадии заболевания с большим опухолевым бременем и обширным поражением брюшины. была приписана прогностическая и прогностическая ценность у пациентов с HGSC.13 20 26 27 32–36 Однако в большинстве случаев внимание было сосредоточено на P-TME, что в значительной степени отражает доступность образцов при диагностических или хирургических процедурах.37 38 Однако прогноз в значительной степени определяется установлением метастатических участков с комплексом TME.10 Таким образом, существует острая необходимость в улучшении нашего понимания различных компонентов M-TME и того, как они влияют на прогрессирование опухоли и исход заболевания.

Здесь мы сравнили транскриптомный профиль 24 парных образцов первичной и метастатической опухоли от пациентов с HGSC, которые не получали неоадъювантную химиотерапию.Анализ обогащения выявил два кластера генов, связанных с организацией внеклеточного матрикса и иммунными ответами, которые были чрезмерно представлены в образцах M-TME по сравнению с образцами P-TME (рисунок 1). Используя функциональный и иммуногистохимический анализы, мы подтвердили, что M-TME содержит большее количество иммунных клеток, чем P-TME (рисунки 1 и 2), но плотность CD8 ⁺ T-клеток, CD20 ⁺ B-клеток, и NKp46 ⁺ NK-ячейки в M-TME в значительной степени не смогли повлиять на ОС, за единственным исключением DC-LAMP ⁺ DC в ОС (рисунок 2).Это противоречит хорошо известной прогностической роли этих популяций клеток в P-TME.20 27 35 39

Таким образом, мы постулировали, что иммунные эффекторы функционально нарушены в M-TME, но мы не могли приписать такое нарушение передаче сигналов PD-1, LAG-3 или TIM-3 (рисунок 3), несмотря на наши предыдущие выводы о ключевая роль последнего в P-TME.13 Эти данные согласуются с низкой клинической активностью блокаторов иммунных контрольных точек у пациентов с поздней стадией HGSC.40 Напротив, мы идентифицировали несколько генов, участвующих в передаче сигналов цитокинов / хемокинов с помощью M2-подобных ТАМ, как потенциальных драйверов истощения Т-клеток в M-TME, включая IL-10, CCL22 и компоненты IL-4 и IL-13. сигнальные пути.33 34 В соответствии с этим мы обнаружили, что M-TME содержит большее количество M2-подобных TAMs, чем P-TME (рисунок 4). Более того, пациенты с HGSC с устойчивой инфильтрацией M-TME M2-подобными ТАМ проявляли ингибированные иммунные ответы в местах метастазирования, что коррелировало с плохим исходом заболевания (рисунок 4).Эти результаты согласуются с предыдущими доклиническими данными, показывающими, что M2-подобные ТАМ способствуют метастатическому распространению раковых клеток яичников, 41 42, а также клиническим данным, коррелирующим обилие иммуносупрессивных M2-подобных ТАМ с плохим исходом заболевания в различных опухолях. .43–45 Тем не менее, ТАМ представляют собой высокопластичную популяцию иммунологического TME, и их дихотомическая классификация на иммуностимулирующий (M1) по сравнению с иммунодепрессивным (M2) не позволяет воспроизвести такую ​​функциональную пластичность.16 17 Вместо этого ожидается, что ТАМ будут существовать в континууме фенотипических и функциональных состояний, которые постоянно развиваются во время прогрессирования заболевания. Таким образом, будет интересно определить, как ТАМ-компартмент HGSC развивается в пространстве (в разных областях опухоли) и во времени (вместе с прогрессированием и ответом на лечение).

Независимо от этих и других неизвестных, наши настоящие результаты демонстрируют, что микросреда первичных и метастатических поражений HGSC у одного и того же пациента отличается друг от друга в отношении иммунологической компетентности и прогностического воздействия, поскольку они впервые определяют негативное влияние M2-подобные ТАМ на установление клинически значимых противоопухолевых иммунных ответов на M-TME пациентов с HGSC.Недавно мы продемонстрировали, что TIM-3 является основным коингибиторным рецептором, который поддерживает клинически значимую иммуносупрессию у пациентов с HGSC, 13 и связь между иммуносупрессивными ТАМ, экспрессирующими галектин 9 (LGALS9), и истощенным PD-1 ⁺ TIM-3 ⁺ Т-клетки CD8 ⁺ были зарегистрированы у пациентов с мышечно-инвазивным раком мочевого пузыря.46 Таким образом, есть соблазн предположить, что пациенты с метастатическим HGSC могут получить пользу от двойной блокады PD-1 / TIM-3, потенциально в контексте химиотерапевтического лечения. схемы, которые истощают M2-подобные ТАМ.47 Срочно ожидаются клинические испытания, исследующие эти возможности.

Приобретенные генетические изменения в опухолевых клетках определяют развитие нейробластомы высокого риска и клинические исходы | BMC Cancer

Клетки нейробластомы человека (SH-SY5Y) со смешанными нейробластоподобными и эпителиально-подобными клетками развивают спонтанное агрессивное заболевание высокого риска

in vivo

Подкожное введение человеческих клеток SH-SY5Y привело к развитию ~ 200 мм ³ ксенотрансплантатов у ~ 70% животных в течение 30 дней, как описано ранее [26, 31], в то время как у других 30% мышей были обнаружены множественные клинически имитирующие агрессивные метастатические опухоли в средостении и забрюшинном пространстве. тазовая, брюшная и грудная полости, как показано ранее (27).

Рис. 1

Способность MSDAC к формированию опухоли. Репрезентативные покадровые микрофотографии высококонтрастных изображений родительского SH-SY5Y и агрессивных MSDAC. Клетки окрашивали DiI и отображали в реальном времени каждые 20 мин в течение 18 ч с помощью Operetta. Родительские клетки (верхняя панель) показали монослойное распространение, MSDAC (нижняя панель) продемонстрировали агрегацию и образование опухолевой сферы

Агрессивные CSC-подобные MSDAC вызывают онкогенность и воспроизводят заболевание высокого риска

Чтобы лучше охарактеризовать установленную модель агрессивного заболевания высокого риска и Подчеркивая обогащение выбранных клонов из родительской линии или продолжающееся приобретение генетических перестроек, клоны MSDAC были дискретно охарактеризованы кариотипированием, анализом CGH всего массива генома и способностью образовывать опухолесферу.MSDAC относительно малы и имеют сферическую форму с тонкими нейритами. Что еще более важно, каждый исследуемый клон MSDAC обладал внутренними характеристиками CSC в отношении способности легко выращивать ex vivo в бессывороточной среде и образовывать большие организованные опухолевые сферы (28). Предполагается, что этот процесс имитирует процессы регенерации и поддержания тканей клетками, которые выживают в условиях суспензии. В этом процессе начальная фаза симметричного расширения посевных стволовых клеток предшествует фазе асимметричного деления, которое дает начало дифференцированному потомству, составляющему основную массу сферы.Наблюдение за MSDAC в режиме реального времени в контролируемых условиях показало агрессивную агрегацию и образование опухолевой сферы в течение 18 часов (рис. 1; дополнительный файл 1: видео 1 и дополнительный файл 2: видео 2). Хотя родительские клетки SH-SY5Y и клетки, полученные из неметастатических ксенотрансплантатов (рис. 1), выживали в бессывороточной среде, они демонстрировали монослойное клеточное распространение без образования опухолевой сферы. In vivo , подкожное введение MSDAC привело к образованию относительно больших (> 500 мм ³ ) ксенотрансплантатов, как сообщалось ранее [27].У мышей, которым вводили MSDAC, были обнаружены множественные метастатические опухоли в забрюшинной, тазовой, брюшной и грудной полостях, что демонстрирует воспроизводимость агрессивного заболевания высокого риска. Напротив, мыши, которым вводили родительские клетки, не демонстрировали каких-либо отдаленных метастазов и, следовательно, служили в качестве контроля неметастатического ксенотрансплантата.

Рис. 2

Кариотипирование в родительских SH-SY5Y и MSDAC. Репрезентативные микрофотографии, показывающие паттерны кариотипирования в родительских SH-SY5Y и MSDAC с помощью ( a ) анализа G-бэндинга и ( b ) анализа массива CGH.G-диапазон идентичен 47, XX, добавить (1) (q32), + del (7)? (Q32), добавить (8) (p23), добавить (9) (q34), добавить (15) (q24) , add (22) (q13) [20] кариотипирование в SH-SY5Y и MSDAC

G-бэндинг подтвердило, что MSDAC из метастатических опухолей мыши происходят из SH-SY5Y клеток человека

Раковые клетки обычно характеризуются сложными кариотипами, включая структурные и количественные изменения. Чтобы определить и проиллюстрировать, что агрессивные опухоли, развивающиеся во множественных метастатических участках, произошли от родительских клеток SH-SY5Y человека, мы кариотипировали MSDAC с охарактеризованным CD133 ⁺ и без него и сравнили их с родительскими клетками.Все кариотипирование выполняли двойным слепым методом. Мы исследовали не менее 20 клеток на клон. Клетки SH-SY5Y показали 47, XX, add (1) (q32), + del (7)? (Q32), add (8) (p23), add (9) (q34), add (15) ( q24), добавить (22) (q13) [20] кариотип и служить положительным контролем (рис. 2 и.о. ). Все исследованные клоны MSDAC показали точное совпадение с родительскими клетками SH-SY5Y. Мы наблюдали уникальный маркер, состоящий из хромосомы 1 со сложной вставкой дополнительной копии сегмента 1q в длинное плечо, что привело к трисомии 1q.Кариотипирование также выявило шесть новых неслучайных хромосомных перестроек на 1q32, 8p23, 9q34, 15q24, 22q13 (добавления) и 7q32 (делеция; рис. aii ). Соответственно, массивный анализ CGH подтвердил кариотипирование в клонах родительских клеток и MSDAC (рис. 2b) и продемонстрировал, что развитые агрессивные метастатические опухоли у мышей действительно происходят и распространяются из родительских клеток SH-SY5Y.

Рис. 3

Вариации числа копий по всему геному в родительских SH-SY5Y и MSDAC. — анализ CGH на массиве , показывающий оцифрованные вариации числа копий (CNV) по геному, нанесенные на график для клеток SH-SY5Y и MSDAC. b Таблица, показывающая общий прирост и / или потерю количества копий для клонов MSDAC. Показаны номера хромосом, области и величина вариации CNV и соответствующих генов

Приобретенные генетические перестройки в клетках нейробластомы приводят к агрессивному заболеванию

Чтобы определить любые приобретенные генетические перестройки и подчеркнуть их влияние на прогрессирование заболевания, мы использовали высокопроизводительный полный геном массив CGH-анализа (рис.3а) в сочетании с количественной экспрессией транскрипции (QPCR). CGH-анализ с высоким разрешением показал уникальные, но обширные вариации числа копий (CNV), включая вставки, делеции и более сложные изменения, которые включают усиление (дупликацию) или потерю (делецию) в одном и том же локусе в клонах MSDAC (рис. 3а, рис. . 4). Однако, чтобы охарактеризовать связь приобретенных генетических перестроек с прогрессированием заболевания, мы рассмотрели только общие генетические вариации в исследованных клонах MSDAC.Сорок пять обычных CNV наблюдались с увеличением в 30 (Chr.1,7; Chr.2, 3; Chr.4, 1; Chr.6, 1; Chr.7, 6; Chr.8, 8; Chr. 11,2; Chr.17,2) регионов и потери в 15 (Chr.4,1; Chr.8,1; Chr.14,1; Chr.22,12) регионах (рис. 3b, рис. 4) . Интересно, что эти CNV соответствуют усилению в кодирующих областях CD1C, CFHR3, FOXP2, MDFIC, ADAM5, RALYL, CSMD3, SAMD12-AS1, MAL2, OR52N5 , LOC400927, APOBEC3B, RPLLC25, MGAAT3, S L3MBTL2, SERHL, POLDIP3, A4GALT и TTLL1 гены.(Рис. 3b, Рис. 4) . В отличие от здорового генома, в котором изменения в экспрессии генов тщательно контролируются с помощью факторов транскрипции, геном рака адаптируется за счет дупликации CD1C, CFHR3, FOXP2, MDFIC, RALYL, CSMD3, SAMD12-AS1, MAL2, и OR52N5 , и потеря в кодирующих областях генов ADAM5, LOC400927, APOBEC3B, RPL3, MGAT3, SLC25A17, EP300, L3MBTL2, SERHL, POLDIP3, A4GALT и TTLL1 генов. Анализ QPCR выявил прирост CNV с соответствующим увеличением транскрипционной экспрессии CD1C, FOXP2, RALYL и MAL2 в MSDAC, но не в клетках SH-SY5Y (рис.5а) . Аналогично , мы наблюдали репрессию транскрипции ADAM5, A4GALT, ABPOBEC3B, EP300, L3MBTL2, SERHL, SLC25A17 и POLDIP3 , что согласуется с потерей CNV в MSDAC (рис. 5a). Более того, анализ иммуноблоттинга выявил значительное увеличение трансляции RALYL и FOXP2 в агрессивных клонах MSDAC по сравнению с родительскими клетками SH-SY5Y (рис. 5b). Точно так же мы наблюдали устойчивое увеличение экспрессии RALYL и FOXP2 в метастатических опухолях по сравнению с неметастатическим первичным ксенотрансплантатом (рис.5б). Количественный денситометрический анализ выявил последовательное увеличение экспрессии RALYL и FOXP2 как в ex vivo , так и в in vivo настройках (рис. 5b, боковая панель). Вместе определенные генетические изменения (потеря / усиление CNV) в кодирующих областях конкретных генов и их последующие транскрипционные / трансляционные модуляции в MSDAC подчеркивают приобретенные генетические перестройки в прогрессировании нейробластомы.

Рис. 4

Варианты количества копий в родительских SH-SY5Y и MSDAC.Графики изменения количества репрезентативных копий, показывающие прирост в Chr.1, 158,35–160,00 МБ; Chr.7, 114.084–114.115 МБ; Chr.8, 39,25–39,40 МБ, и в Chr.8, 84,50–85,75 МБ, что соответствует кодирующим областям CD1C, FOXP2, ADAM5 и RALYL, соответственно в MSDAC по сравнению с клетками SH-SY5Y

Рис. 5

Результаты CGH массива транскрипционной и трансляционной валидации. a Гистограммы анализа QPCR, показывающие транскрипционную амплификацию CD1C, FOXP2, RALYL, NBPF20, и MAL2, и подавление APOBEC3B, SLC25A17, EP300, L3MBTL2, SERHL805 и 9 клоны MSDAC по сравнению с клетками SH-SY5Y. b Репрезентативные иммуноблоты, показывающие уровень экспрессии RALYL и FOXP2 (оба показали усиление в анализе Array CGH) в двух разных клонах агрессивных клеток, происходящих из метастатических сайтов (MSDAC), по сравнению с родительскими клетками SH-SY5Y и в метастатических опухолях, полученных от трех разных животных с агрессивной нейробластомой высокого риска (NB-MT-AD) по сравнению с неметастатическим первичным ксенотрансплантатом (NB-NM-PX). Боковая панель: гистограммы количественного денситометрического анализа, показывающие устойчивое увеличение экспрессии RALYL и FOXP2 в MSDAC, а также в метастатических опухолях in vivo

Рис.6

Связанная с опухолью экспрессия RALYL в нейробластоме человека. a Миниатюры и сконструированные изображения (20 ×) микроматрицы ткани нейробластомы человека в сочетании с автоматизированным IHC, показывающие уровни экспрессии RALYL в образцах нейробластомы человека (n = 25). b Анализ изображений Aperio для количественной оценки положительности TMA и RALYL и последующей корреляции экспрессии RALYL с классификацией опухоли нейробластомы

Приобретенные изменения связаны с плохим прогнозом экспрессия таких кандидатов коррелирует с нейробластомой высокого риска, в которой используется коммерчески доступная человеческая нейробластома ТМА.Ткани происходят из таких участков, как забрюшинная, брюшная и тазовая полости, средостение и надпочечники. Анализ RALYL-IHC выявил значительные различия в окрашивании RALYL между образцами пациентов (рис. 6a). RALYL IHC выявил ядерную положительность с различными уровнями проанализированных ядер ткани нейробластомы человека. Положительное окрашивание RALYL появилось в коричневом цвете и селективно локализовалось в ядре (см. Панель 40 ×, фиг. 6a). Корреляция положительности RALYL со степенью опухоли четко выявила прямо пропорциональную ассоциацию экспрессии уровня опухоли → RALYL (рис.6б). Положительность RALYL была относительно низкой в ​​степени 1, в то время как его экспрессия увеличивалась с увеличением инвазивного потенциала опухоли, с максимальным усилением в высокоинвазивных опухолях (рис. 6b).

Приобретенные генетические изменения связаны с прогрессированием опухоли и плохими клиническими исходами

Чтобы подчеркнуть важность наблюдаемых генетических перестроек при агрессивном заболевании, мы сначала прояснили их биологические функции, сетевые и общинные молекулярные структуры, а также их задокументированную роль в любом прогрессировании опухоли. системы.IPA «анализ взаимодействия путей» выявил сложную, но хорошо организованную сеть передачи сигналов из MAL2, A4GALT, POLDIP3, RPL3, EP300, CD1C, CFHR3, APOBEC3B, RALYL, NBPF20, FOXP2, MDFIC, TTL1 и MGAT3 (MGAT3 ). Дополнительный файл 3: Рисунок S1). Очевидно, гены с генетическими перестройками в кодирующих областях играют сопутствующую роль во множественных опухолевых системах, таких как хронический миелоидный лейкоз, меланома, мелкоклеточная карцинома, карцинома легких, опухоль молочной железы, рак простаты, рак поджелудочной железы, аденокарцинома толстой кишки, плоскоклеточная карцинома и другие. -мелкоклеточная аденокарцинома легкого.Более того, «IPA-Core-Analysis» выявил, что это небольшое подмножество строго взаиморегулируемых молекулярных мишеней проявляет влиятельное участие во многих канонических сигнальных путях и демонстрирует определенные роли в разнообразных биологических функциях. Анализ данных IPA с учетом только отношений, где достоверность = экспериментально наблюдаемая, эти молекулы продемонстрировали свою роль по крайней мере в 67 различных канонических путях, выполняющих> 150 биологических функций. Интересно, что в свете прогрессирования и распространения опухоли мы наблюдали значительную ассоциацию этих молекул в ключевых путях прогрессирования рака, а именно., Передача сигналов ATM, cAMP-опосредованная передача сигналов, клеточный цикл: регулирование контрольных точек, передача сигналов CREB в нейронах, созревание дендритных клеток, передача сигналов EIF2, передача сигналов ERK / MAPK, передача сигналов ERK5, передача сигналов эстрогеновых рецепторов, передача сигналов FGF, передача сигналов FLT3 в клетках-предшественниках, G- Передача сигналов рецепторов, связанных с белками, передача сигналов гранзима A, передача сигналов HIF1a, передача сигналов ILK, передача сигналов нейротрофина / TRK, передача сигналов NFkB, передача сигналов p38 MAPK, передача сигналов p53, передача сигналов фосфолипазы C, передача сигналов PPAR, активация PPARa / RXRa, передача сигналов протеинкиназы A, передача сигналов протеинкиназы A, Пиримидин дезоксирибонуклеотиды, передача сигналов TGF-b, активация VDR / RXR, путь Wnt / Ca +, передача сигналов Wnt / b-катенина и т. Д., (дополнительный файл 4: Рисунок S2A). Помимо своей роли в молекулярных сигнальных событиях, эти молекулы также выполняют свою определенную ( P <0,05) роль в биологических функциях, связанных с прогрессированием рака, включая морфологию раковых клеток, прогрессирование опухоли, репликативное старение клеточного цикла, репликацию ДНК сборки клеток. , Остановка клеточного цикла, гибель и выживание клеток, функция и поддержание клеток, посттрансляционная модификация, передача сигналов от клетки к клетке, сборка / организация клеток, рост и пролиферация клеток, перемещение клеток, ответ клеток на терапевтические препараты и т. Д., (Дополнительный файл 4: Рисунок S2B). К этому примечанию, всеобъемлющий обзор этих молекул, включая информацию об их символе, названии, субклеточном расположении, функциях белков, связывании, регуляции, регулируемой, нацеленной на миРНК, роли в клетке, молекулярной функции, биологическом процессе, клеточном компоненте, заболевании , роль в прогрессировании опухоли и метастазировании и т. д. , представлены в дополнительном файле 5: Таблица S1.

Чтобы продемонстрировать значимость этих генетических перестроек для нейробластомы высокого риска и плохих клинических исходов, мы исследовали корреляцию индивидуальной экспрессии гена с общей (OS) и безрецидивной выживаемостью у пациентов с нейробластомой.Мы использовали веб-платформу для анализа и визуализации микрочипов (http://r2.amc.nl), которая коррелирует выбранный профиль экспрессии гена с клиническими результатами для образцов из нескольких когорт пациентов с нейробластомой. Графики Каплана-Мейера показали значительную связь между повышенной экспрессией CFHR3, MDFIC, CSMD3, FOXP2 или RALYL (гены с усилением кодирующих областей) и плохой ОС у пациентов с нейробластомой (дополнительный файл 6: рисунок S3A). Эта обратная связь усиления CFHR3-, MDFIC-, CSMD3-, FOXP2- или RALYL- также отражает низкую безрецидивную выживаемость у этих пациентов (дополнительный файл 6: рисунок S3A).Интересно, что SLC25A17, POLDIP3, SERHL, LOC400927, MGAT3 или TTLL1 (гены с потерей CNV в кодирующих областях) продемонстрировали определенную связь с их потерей и плохой ОС (дополнительный файл 6: Рисунок S3B). Утрата любого из этих генов по отдельности приводит к плохой безрецидивной выживаемости у детей с нейробластомой (дополнительный файл 6: рисунок S3B). Анализ ассоциации клинических результатов также выявил сильную корреляцию между вариациями экспрессии обеих групп генов, перечисленных выше, и стадией прогрессирования: благоприятное → неблагоприятное заболевание и живое → умершее от болезни (данные не показаны).Уместно отметить, что прирост в CD1C, NBPF20, и MAL2 и потери в ADAM5, RPL3, L3MBTL2, A4GALT, EP300 и APOBEC3B не были связаны с плохими клиническими результатами (дополнительный файл 7: Рисунок S4). Вместе эти данные демонстрируют прямое, определенное влияние генетических перестроек при агрессивном заболевании на плохие клинические исходы у детей с нейробластомой.

p63 и SOX2 диктуют зависимость от глюкозы и метаболические уязвимости при плоскоклеточной карциноме

Основные моменты

•

p63 и SOX2 стимулируют повышенную экспрессию GLUT1 за счет SLC2A1

Enhanced 9044, усиливающий трансактор 9444

Интронный усилитель 9444 приток глюкозы способствует выработке антиоксидантов для повышения выживаемости

•

Системное ограничение глюкозы одновременно нацелено на жизненно важные метаболические и онкогенные пути

•

Высокий случайный уровень глюкозы в крови связан с худшими исходами у пациентов с плоскоклеточным раком

Плоскоклеточный рак (SCC), злокачественное новообразование, возникающее в нескольких анатомических участках, является причиной значительной смертности от рака из-за недостаточных терапевтических возможностей.Здесь мы идентифицируем исключительную зависимость от глюкозы среди SCC, продиктованную гиперактивным GLUT1-опосредованным притоком глюкозы. Механически факторы транскрипции плоскоклеточного клона p63 и SOX2 трансактивируют интронный энхансерный кластер SLC2A1 . Повышенный приток глюкозы способствует выработке NADPH и GSH, тем самым повышая антиоксидантную способность опухолей SCC. Системное ограничение глюкозы с помощью кетогенной диеты и ингибирование реабсорбции глюкозы в почках с помощью ингибитора SGLT2 вызывают внутриопухолевый окислительный стресс и ингибирование роста опухоли.Кроме того, снижение уровня глюкозы в крови снижает уровень инсулина в крови, что подавляет передачу сигналов PI3K / AKT в клетках SCC. Клинически мы демонстрируем устойчивую корреляцию между концентрацией глюкозы в крови и худшей выживаемостью среди пациентов с SCC. В совокупности это исследование идентифицирует исключительную зависимость SCC от глюкозы и предлагает его кандидатуру в качестве очень уязвимого типа рака, на который нацелено системное ограничение глюкозы.

Ключевые слова

p63

SOX2

GLUT1

плоскоклеточный рак

ограничение глюкозы

кетогенная диета

SGLT2

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (Резюме 0)

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

Стандартизированная операционная записка — Мичиганский онкологический консорциум по качеству (MOQC)

Контрольный список для оперативной записки по поводу рака яичников Диктовка

НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, чтобы активировать онлайн-генератор оперативных заметок

Не забудьте включить в оперативную записку следующие элементы данных.

• Статус разгрузки — Первичная и интервальная разгрузка
• Информация о стадии — Если доступно на основании изображений (например, по крайней мере стадия IIIc для пациента с подтвержденным биопсией поражением сальника) Ссылка на стадию рака яичника
• Тип операции — Открытый / роботизированный / лапароскопический
• Статус остаточной болезни — Укажите, если:
  • Отсутствие остаточной болезни (R0 или отсутствие видимой болезни)
  • Оптимально удаленная опухоль (наибольшее видимое поражение 1-5 мм)
  • Оптимально удаленная (видимая часть 6-10 мм)
  • Субоптимально удаленная масса (остаточное поражение> 10 мм)
    • Для пациентов с субоптимальным удалением опухоли укажите размер и локализацию остаточной болезни
• Оценка хирургической сложности — Используйте калькулятор ниже, чтобы получить оценку
  _{(Aletti GD, Dowdy SC, Podratz KC, Cliby WA.Взаимосвязь между сложностью хирургического вмешательства, краткосрочной заболеваемостью и общей выживаемостью при первичном хирургическом вмешательстве при распространенном раке яичников. Am J Obstet Gynecol . 2007; 197 (6): 676.e1-e7.)}

Контрольный список для оперативной записи при раке шейки матки Диктовка

НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, чтобы активировать онлайн-генератор оперативных заметок

Не забудьте включить в оперативную записку следующие элементы данных.

• Информация о стадии — Если доступно на основании изображений Ссылка на стадию рака шейки матки
• Гистология — Плоскоклеточный рак / Аденокарцинома / Аденосквамозная карцинома / Мелкоклеточный рак
• Марка — 1/2/3
• Тип операции — Открытый / роботизированный / лапароскопический
• Узловая диссекция — Полные узлы / Страж (включая местоположения и детали сопоставления участков)
• Яичники — удален / не удален / один удален
• Транспозиция яичника — Выполнено / Не выполнено

Контрольный список для оперативной записи при раке эндометрия Диктовка

НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ, чтобы активировать онлайн-генератор оперативных заметок

Не забудьте включить в оперативную записку следующие элементы данных.

• Тип операции — Открытый / роботизированный / лапароскопический
• Узловая диссекция — Полные узлы / Страж (включая местоположения и детали сопоставления участков)
• Промывание таза — Выполнено / Не выполнено
• Осложнения во время операции

% PDF-1.6 % 290 0 объект > / Метаданные 287 0 R / AcroForm 291 0 R / Страницы 270 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 287 0 объект > поток uuid: 4788c14d-587c-a740-8002-750a6cd3193cadobe: docid: indd: 2182fe74-6f43-11dc-a023-915b6e7ab210proof: pdf2008-01-14T09: 25: 22-05: 002008-01-18T13: 05: 09-05: 002008-01-18T13: 05: 09-05: 00 Adobe InDesign CS2 (4.0.4)

JPEG256256 / 9j / 4AAQSkZJRgABAgEASABIAAD / 7QAsUGhvdG9zaG9wIDMuMAA4QklNA + 0AAAAAABAASAAAAAEA AQBIAAAAAQAB / + 4ADkFkb2JlAGSAAAAAAf / bAIQACgcHBwcHCgcHCg4JCQkOEQwLCwwRFBAQEBAQ FBEPEREREQ8RERcaGhoXER8hISEhHystLS0rMjIyMjIyMjIyMgELCQkODA4fFxcfKyMdIysyKysr KzIyMjIyMjIyMjIyMjIyMjIyPj4 + Pj4yQEBAQEBAQEBAQEBAQEBAQEBAQEBA / 8AAEQgBAACzAwER AAIRAQMRAf / EAaIAAAHAQEBAQEAAAAAAAAAAAQFAwIGAQAHCAkKCwEAAgIDAQEBAQEAAAAAAAAA AQACAwQFBgcICQoLEAACAQMDAgQCBgcDBAIGAnMBAgMRBAAFIRIxQVEGE2EicYEUMpGhBxWxQiPB UtHhMxZi8CRygvElQzRTkqKyY3PCNUQnk6OzNhdUZHTD0uIIJoMJChgZhJRFRqS0VtNVKBry4 / PE 1OT0ZXWFlaW1xdXl9WZ2hpamtsbW5vY3R1dnd4eXp7fh2 + f3OEhYaHiImKi4yNjo + Ck5SVlpeYmZ qbnJ2en5KjpKWmp6ipqqusra6voRAAICAQIDBQUEBQYECAMDbQEAAhEDBCESMUEFURNhIgZxgZEy obHwFMHR4SNCFVJicvEzJDRDghaSUyWiY7LCB3PSNeJEgxdUkwgJChgZJjZFGidkdFU38qOzwygp 0 + PzhJSktMTU5PRldYWVpbXF1eX1RlZmdoaWprbG1ub2R1dnd4eXp7fh2 + f3OEhYaHiImKi4yNjo + DlJWWl5iZmpucnZ6fkqOkpaanqKmqq6ytrq + v / aAAwDAQACEQMRAD8A7NirsVdirsVdirsVdirs VdirsVdirsVdirsVdirsVS3Uf79f9QfrOKoXCh3KuxV2KuxV2Kp5gS7FXYq7FXYq7FXYq7FXYq7F XYq7FXYq7FXYq7FUt1H + / X / UH6ziqFwodirsVdirsVdiqeYEpXry661tGNBZEn5 / vDJxpwof5ge9 MVSL0 / zH / wB + 233R / wDNGKu9P8x / 9 + 233R / 80Yq70 / zH / wB + 233R / wDNGKu9P8x / 9 + 233R / 80Yq7 0 / zH / wB + 233R / wDNGKu9P8x / 9 + 233R / 80YqyHRRqy2IGtMjXfJqmOnHj + z9kDFUwxV2KuxV2KuxV 2KuxVLdR / v1 / 1B + s4qhcKHYq7FXYq7FXYqxyXzHrEpr9YKDsqKqgfhXGlVLfzPq8DDnIJ1 / lkUfr XicaVk + ka9a6qPTp6NwBUxE1qPFT3wJTTFXYq7FXYq7FXYq7FXYq7FXYq7FXYq7FUt1H + / X / AFB + s4qhcKHYq7FXYq7FXYqwnFXEgdTTFW4p2hkWWJ + DoeSsDuCMVeiaTfrqVhFdCnJhxkA7MuxwJRuK uxV2KuxV2KuxV2KuxV2KuxV2KuxVLdR / v1 / 1B + s4qhcKHYq7FXYq7FXYqwnFVG5to7pQklaA1FNs VWS + XhCiyTRTRo32WcFQfkSuNJZn5GUQ2VxbJXhG6la + LA1 / ViVZRgV2KuxV2KuxV2KuxV2KuxV2 KuxV2KpPrtx9UR7ng0vpx8uCfabc7DFWM / 4sb / q2XX / A / wBmKu / xY3 / Vsuv + B / sxVE6d5gN / dLbG yng5An1JBRRQV8MKE5xV2KuxVhOKoixuI7W8iuZY / VWJuRTpUjp498VT9b6a80jVbu8JMErBbZh4 4mpoF + VR92KUZ5Rtmh0952FPrD1X / VXYfjXEqn + BXYq7FXYq7FXYq7FXYq7FXYq7FXYqkXmUqLWY uZVX0tzB / edT9jpvirBvVtOJ / faz9y1 / 4niqrax213cR2yXGrxtIeIaSgUfM8jiqb / 4X / wC1ne / 8 jP7MKHf4X / 7Wd7 / yM / sxVPsVdirCcVV7O1kvbqK1i + 1K1KnsOpP0DFWT3WkXN5Nb6VDG0Gm2gBeU 0rI3cj33xSyGKKOGNIYl4pGAqqOwGBV + KuxV2KuxV2KuxV2KuxV2KuxV2KuxVIvMriO1mkaVrcLF UyxirLudwNsVYN + krfif9zl58 / TP / VTFWv0lb / 8AV8vf + RZ / 5rxVPF846KFALyEgUrwO + Kt / 4y0T + eT / AIA4qmmn6jbanb / WbQkxhinxChqKf1woRWKul8paVI1UMsQ / lRgR / wAOrHBaWho + haEp1G7u Pq8cO5uLiYRIlfh4f92N603xtU2t7y0u + f1SeO49PiH9J1fjzVZF5cSaVRww9jXFV888NrBJc3Mi wwwI0ksjkKqIo5MzE9AAMVXI6yIsiEMrAMpHQg7g4qh7jVNNtLmGzu7yCC5utoIJZUSSU9P3aMwL fRiqJJCgsxoBuSegGKoG213RLy3a7s9Rtbi3jdYnminjdFkkKqiFlYgMzMAB3riq5dZ0hpPSW + ty 9VWglTq8rWyr9rqZUZAP5hTriqNxVDXOo2Fm5S7uYrdhE9wfVcIBDEUWSQliKKpkWp98VROKoO21 fSr25msrO9t7m6tSVuIIZUeSIqeDCRFYstG23xVGYqpzTQ20MlxcSLDDCpkkkkIVERRyZmZqAAAb nFV4IYBlNQdwR0IxVKtZuIbStxcNwijj5O1CaCp7CpxVjtx5o0WS3lWC99ORkZUf0pDxYg8Wp6fY 4UJXYa4ILuOW91tbiBa84hBIOVVIG / peOBKcf4r0D / lr / wCScv8A1TwoTK0u7e + t0urV / Uhkrxah FaEqdmAPUYqrYq7FU8wJSfzHpV3qcVjLYmM3Gm3kd6kU7MkUvBZIzG7okhXaSoPE7gbYqxG7 / L3V pNUvtTs49OgW9hELWgMghKrHpqrCQsIHBWtZaVUjcVUgsuKpRZflxrk17d6feiBVh0 + SFLkhmiJu f0oIYYv9HjUrEZ43agXiUWi9KKpvN + XWo3Ml0ZGt44buKxiWCOUiGJLaWxeaAItmjMtLVijcxQsf gHJmxVP9f0LVNR1DT4rO3szpFsYXuUaV4biQwSepDHVbWcelGQG41HJu4HVVNrWweLSpbH0YLRpP rFI7cs0Y9V5GDVZUNW58m2 + 0T1xVgzfl9r82m6HYyNbR / ohofU53t1dK5jazYzwieAekeNs6rGvw gOdx3VVbb8udQt9RhvQbPks8M0koLCSkWqzaiQP3O / OCRVO / 2kA3G4VY5qn5f6zouhDThFHqLzRy JBaW8VxLGs8ltZwNOHS1dEf1Yn4lygoxPIbjFWbec / Jlz5hvWvbNLQyyaZdad6tzVZInmKPFIjLD KTSjodxQOaV6FVQ0PyNqWla1pt / NcJJbaelzHHFHKV9JZJ72SMKrW7l1MdyisvNACgPx8Voqg7 / 8 vNbuWvHjvomF1NfSLE5ASNLm + gvVjQ / Vnr6qRFZfUDgdgVqCqrHyFqKxzxhbe5MiWfGW5uJWkeK3 FkJdPuCLYLJC / wBVJ9TjX4j8HxNVVL7v8r9Wm064hNxa3l3OIYy9yzhZFi036gGdhE5DRz / vU2PQ VNeir0q1iMFtDAxqYo1QkdCVAGKpR5k5fVpuDxxt6Wzz0MY3P26htvoxVg9brif9P0j / AIFP + qGK urdf8t + kf8Cn / VDFXVuv + W / SP + BT / qhirJodX0SGJY0u7dAo + yjKFr1NAKd8KERbalYXjmK1uI5n A5FUYE02FdvniqKxVPMCUFqer6fo8ST6jN6EcjcFbizVahNPgVvDFUt / xx5X / wCW7 / klN / 1SxV3 + OPK // Ld / ySm / 6pYqmWmavp + sRPPp03rxxtwZuLLRqA0 + NV8cVRuKuxV2KuxV2KuxV2KuxV2KuxV2 KpL5gjklhkjhjjmkaKixy7oxqdm6bYqxBtM1ZEZn0vTFVRUkqQAB1J / eYqh / TuP + WTRv + CH / AFVx VVisdRuATBp2kygbEp8VPukxVU / ROsf9WrTP + BP / ADXiqf6fp1taIky20NvctGFlMKgCpoWUe1Rh QjcVTzAlBalp2m6lEkWpxrLGjclDsVAahHYjscVS7 / CvlP8A5ZIf + Rjf814q7 / CvlP8A5ZIf + Rjf 814qj9PstJ0qJodPWOCN25soetWpSvxMfDFUX68H + / E / 4IYq714P9 + J / wQxV3rwf78T / AIIYq714 P9 + J / wAEMVd68H + / E / 4IYq714P8Afif8EMVd68H + / E / 4IYq714P9 + J / wQxV3rwf78T / ghirvXg / 3 4n / BDFVyujiqMGHsa4qlWtvcRqz2sYmmWOqRkhQxqdqmmKsalu / M08Lwy6TGySKUZTMm6sCD / uzF Ut / RN7 / 1L0P / AEkf9fcVR2mrrNi4ig0eK2hldTKyzK1B0LbyHoMVZJhQ7FXYqnmBKQ + bLUXVlCh0 19V4y19KOUxFfhb4uQB + WKsV / Qyf9Sncf9Jjf80Yq79DJ / 1Kdx / 0mN / zRirv0Mn / AFKdx / 0mN / zR irv0Mn / Up3H / AEmN / wA0Yq79DJ / 1Kdx / 0mN / zRirv0Mn / Up3H / SY3 / NGKu / Qyf8AUp3H / SY3 / NGK u / Qyf9Sncf8ASY3 / ADRirv0Mn / Up3H / SY3 / NGKu / Qyf9Sncf9Jjf80Yq79DJ / wBSncf9Jjf80Yq7 9DJ / 1Kdx / wBJjf8ANGKu / Qyf9Sncf9Jjf80YqzPy7pttp2nKLe1axa4PqywO5kKvTjTk3sMVWa5N Lbq00MRuJEjqsSmhY1O3Q4qxv / EGs / 8AVjm / 4M / 9UsKHf4g1n / qxzf8ABn / qliqO0vUr6 + kdLvT3 sQgBVnblyNen2FxVMsVdirsVTzAlIPN0Mc1lCslrd3gEtQljXmPhbdqK22KsS + oWv / Vm1z72 / wCq WKu + oWv / AFZtc + 9v + qWKu + oWv / Vm1z72 / wCqWKu + oWv / AFZtc + 9v + qWKu + oWv / Vm1z72 / wCqWKu + oWv / AFZtc + 9v + qWKu + oWv / Vm1z72 / wCqWKu + oWv / AFZtc + 9v + qWKu + oWv / Vm1z72 / wCqWKu + oWv / AFZtc + 9v + qWKu + oWv / Vm1z72 / wCqWKu + oWv / AFZtc + 9v + qWKu + oWv / Vm1z72 / wCqWKsm0jXbhPqu mLo2oQxLxhE06NRV6cnbiMVR + t2yXatbSlgksfFipoaVPQ4qxmfyrp0NvLKrXUpjRnCJJVmKgniv w9TiqS / U7f8A6tmq / j / 1TxVOLXyvp1zbxzubuBpBUxyPRl9iOOKqv + ENM / 37cf8AIz / m3FU1sLCH TrcW0DOyAlqyHkd / fbChE4qnmBKQebmhSyhMz3qD1djp1PUrxb7VSvw4qxL1rH / f / mH7l / 6qYq71 rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6q Yq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7 l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYq71rH / f / mH7l / 6qYqyHynawzTPfw3OpsIaxmHUCAp5CvIKC3TFUd5lK i1mLmVV9Lcwf3nU / Y6b4qwb1bTif32s / ctf + J4q16tp / v7WvuX / mvFVezit725jtUuNXjaQkB5CF UUBO55HwxVk + m6d + jkdPrE1zzINZ25EUHQYUI3FXYqnmBKQebrqO1soXlv59ODS0ElupZm + FvhNG XbFWJfpi0 / 6mXUP + RR / 6qYq79MWn / Uy6h / yKP / VTFXfpi0 / 6mXUP + RR / 6qYq79MWn / Uy6h / yKP8A 1UxV36YtP + pl1D / kUf8Aqpirv0xaf9TLqH / Io / 8AVTFXfpi0 / wCpl1D / AJFH / qpirv0xaf8AUy6h / wAij / 1UxV36YtP + pl1D / kUf + qmKu / TFp / 1Muof8ij / 1UxV36YtP + pl1D / kUf + qmKu / TFp / 1Muof 8ij / ANVMVd + mLT / qZdQ / 5FH / AKqYqmXl / V7RtWgj / Td5fGQlFgmjKoxINKnmemKsj1uF7hWhilaB 3josq9VNTuOmKsZn0a / treW4l1q5CRI0jEAk8VBJ / bxVJf0lb / 8AV8vf + RZ / 5rxVPV0HUmUMNaua EVG3j / s8VRmm6Zd2UryXF / LeKy8QknQGta / aOFCZYq7FU8wJSHzZeSWVlDJFqI0stLxMpjaXl8LH jRUfFWK / p67 / AOpqT / pFk / 6oYq79PXf / AFNSf9Isn / VDFXfp67 / 6mpP + кВт / AKoYq79PXf8A1NSf 9Isn / VDFXfp67 / 6mpP8ApFk / 6oYq79PXf / U1J / 0iyf8AVDFXfp67 / wCpqT / pFk / 6oYq79PXf / U1J / wBIsn / VDFXfp67 / AOpqT / pFk / 6oYq79PXf / AFNSf9Isn / VDFXfp67 / 6mpP + kWT / AKoYq79PXf8A 1NSf9Isn / VDFXfp67 / 6mpP8ApFk / 6oYqyjyzrtnexLp7aiNRvlDyO4ieOq8v8qNBtUYqitZuIbSt xcNwijj5O1CaCp7CpxVIf8V6B / y1 / wDJOX / qnhQ7 / Fegf8tf / JOX / qnirv8AFegf8tf / ACTl / wCq eKphZ3trqEAubR / UiJKhqFdx12YA4qiMVdiqeYEpB5ueRLKExT2lsTLu18odD8LbKDHJv9GKsS + s Xf8A1ctD / wCRI / 7JcVd9Yu / + rlof / Ikf9kuKu + sXf / Vy0P8A5Ej / ALJcVd9Yu / 8Aq5aH / wAiR / 2S 4q76xd / 9XLQ / + RI / 7JcVd9Yu / wDq5aH / AMiR / wBkuKu + sXf / AFctD / 5Ej / slxV31i7 / 6uWh / 8iR / 2S4q76xd / wDVy0P / AJEj / slxV31i7 / 6uWh / 8iR / 2S4q76xd / 9XLQ / wDkSP8AslxV31i7 / wCrlof / ACJH / ZLirvrF3 / 1ctD / 5Ej / slxVlOi6poEcdtE1xZNqMgETvbIF5uxpRaInU0xVE + YIZp4pIbfh6 rx0T1RyStT9oEN + rFWIvouuRRtLI2moqAszGFQAoFST / AKPiqCpcf8t2j / 8AAJ / 1QxVGR6Nrs0ay xNpjo45KywqQQe4 / 0fFU50W01OzSWPUGtyhKmJbZQgB + LnUCNOu2FCaYq7FU8wJSDzcGNlDxWyY + r / 0sSqx / Zb7PNl + LFWJcZv8Affl7 / kZF / wBVMVdxm / 335e / 5GRf9VMVdxm / 335e / 5GRf9VMVdxm / 335e / wCRkX / VTFXcZv8Affl7 / kZF / wBVMVdxm / 335e / 5GRf9VMVdxm / 335e / 5GRf9VMVdxm / 335e / wCRkX / VTFXcZv8Affl7 / kZF / wBVMVdxm / 335e / 5GRf9VMVdxm / 335e / 5GRf9VMVdxm / 335e / wCR kX / VTFXcZv8Affl7 / kZF / wBVMVZDoEWgMkJvRpQ1ISVjFq8R3BqnCjE8sVTTWzcqrGzCtOI / 3Yk + yTU9aEYqxqaXzW0Miz29iYypD8i3HhQ8uVZOlMVSr07j / lk0b / gh / wBVcVTWNvNsMaxRWtiiIOKq vIAAdh + 8xVd63nD / AJZ7L73 / AOqmKpjpr6q8bnVUhjcEcBDWhFO / JmwoRuKp5gSkXmy2nurKFILG LUWWWpjnk9MKOLfED6ke / wBOKsU / RGo / 9S5Y / wDSSP8AsrxV36I1H / qXLH / pJH / ZXirv0RqP / UuW P / SSP + yvFXfojUf + pcsf + kkf9leKu / RGo / 8AUuWP / SSP + yvFXfojUf8AqXLH / pJH / ZXirv0RqP8A 1Llj / wBJI / 7K8Vd + iNR / 6lyx / wCkkf8AZXirv0RqP / UuWP8A0kj / ALK8Vd + iNR / 6lyx / 6SR / 2V4q 79Eaj / 1Llj / 0kj / srxV36I1H / qXLH / pJH / ZXirv0RqP / AFLlj / 0kj / srxVMvL + kTDVIpL3RbWzSK rpNFPzYOu6 / CLh / 1Yqn2uSTxK0lsglmWOqIxCgmp2JJGKsYl1DzBPC8MumQskilHUzpurAg / 7sxV Lf0dcf8AVit / + kkf9VsVTUap5mY0GmQknsJ4 / wDqpiq79Ieav + rVH / yOT / mvFUw0yfVJ1kOp2q2p Uj0wrh + Q3r9knChHYqnmBKQ + bLUXVlCh019V4y19KOUxFfhb4uQB + WKsV / Qyf9Sncf8ASY3 / ADRi rv0Mn / Up3H / SY3 / NGKu / Qyf9Sncf9Jjf80Yq79DJ / wBSncf9Jjf80Yq79DJ / 1Kdx / wBJjf8ANGKu / Qyf9Sncf9Jjf80Yq79DJ / 1Kdx / 0mN / zRirv0Mn / AFKdx / 0mN / zRirv0Mn / Up3H / AEmN / wA0YqiL Dy / aXV5Fb3Xlue0hckPO107BKAn7PFcVT3 / Afln / AJZn / wCRsn / NWKu / wH5Z / wCWZ / 8AkbJ / zVir v8B + Wf8Almf / AJGyf81YqitO8qaJpV0t7ZQskyAhWLu2zCh3ZjiqzzInq200ZhNzyip6KtxL7nYN 2xVg / wCjEp / yj01f + Ylv + aMVd + jF / wCpdm / 6SW / 5pxVWtLaSyuEurfy / MssZJUm4JpUU6FPfFWTa bd3d5Ez3do1k6txCM3KooPirxXChGYq7FU8wJS / V9Tm0uBJobKe / LvwMdupZlFCeRoDttiqU / wCL r7 / qwaj / AMim / wCacVd / i6 + / 6sGo / wDIpv8AmnFXf4uvv + rBqP8AyKb / AJpxV3 + Lr7 / qwaj / AMim / wCacVd / i6 + / 6sGo / wDIpv8AmnFXHzbfCn + 4DUN / + Km / 5oxV3 + Lr7 / qwaj / yKb / mnFXf4uvv + rBq P / Ipv + acVd / i6 + / 6sGo / 8im / 5pxV3 + Lr7 / qwaj / yKb / mnFXf4uvv + rBqP / Ipv + acVd / i6 + / 6sGo / 8im / 5pxV3 + Lr7 / qwaj / yKb / mnFUdpGu3Op3LQTaZdWKqhcS3CFVJBUcQSo3 + LFXa7cfVEe54NL6c fLgn2m3OwxVjP + LG / wCrZdf8D / Zirv8AFjf9Wy6 / 4H + zFXf4sb / q2XX / AAP9mKu / xY3 / AFbLr / gf 7MVTDSdYOqNKptZbb0gDWUU5Vr0 + 7ChMsVTzAlIPNzQpZQmZ71B6ux06nqV4t9qpX4cVYl61j / v / AMw / cv8A1UxV3rWP + / 8AzD9y / wDVTFXetY / 7 / wDMP3L / ANVMVd61j / v / AMw / cv8A1UxV3rWP + / 8A zD9y / wDVTFXetY / 7 / wDMP3L / ANVMVd61j / v / AMw / cv8A1UxV3rWP + / 8AzD9y / wDVTFXetY / 7 / wDM P3L / ANVMVd61j / v / AMw / cv8A1UxV3rWP + / 8AzD9y / wDVTFXetY / 7 / wDMP3L / ANVMVd61j / v / AMw / cv8A1UxVkPlfToriRdVhvNTKwO8Zt75gAxKdSoLVHx7e4xVHeZSotZi5lVfS3MH951P2Om + KsF9S 0p / faz9y / wDNeKqkF1aQTxzc9Yk9J1fg4Uq3E1ow59Diqdx + arWSRYxZ3gLkKCYhQVNN / jxVPMKH Yq7FU8wJSDzddR2tlC8t / PpwaWgkt1LM3wt8Joy7YqxL9MWn / Uy6h / yKP / VTFXfpi0 / 6mXUP + RR / 6qYq79MWn / Uy6h / yKP8A1UxV36YtP + pl1D / kUf8Aqpirv0xaf9TLqH / Io / 8AVTFXfpi0 / wCpl1D / AJFH / qpirv0xaf8AUy6h / wAij / 1UxV36YtP + pl1D / kUf + qmKu / TFp / 1Muof8ij / 1UxV36YtP + pl1 D / kUf + qmKu / TFp / 1Muof8ij / ANVMVd + mLT / qZdQ / 5FH / AKqYqnmnaPf6rZR39p5ivDDNy4llIPws UO3qeK4qnWj6Re6bJI93qc2oCRQFWYUCkHqPibFWtbhe4VoYpWgd46LKvVTU7jpirHf0BqVP + Ozc fd / zfirX6A1P / q9Xh4f834q79Aan / wBXq4 + 7 / m / FUVp + l3lnOZp9Rmu04lfTkG1TTf7RwoTTFXYq nmBKXazaardwImk3gsZVeruVDVWh + HcHviqTfoXzn / 1fE / 5FL / zTirv0L5z / AOr4n / Ipf + acVd + h fOf / AFfE / wCRS / 8ANOKu / QvnP / q + J / yKX / mnFXfoXzn / ANXxP + RS / wDNOKu / QvnP / q + J / wAil / 5p xV36F85 / 9XxP + RS / 804q79C + c / 8Aq + J / yKX / AJpxV36F85 / 9XxP + RS / 804qmOjafr1pPI + rait9E yURAgXi1R8WwHbFU5xV2KuxV2KpbqP8Afr / qD9ZxVC4UOxV2KuxV2KuxVPMCUl8z3l7ZWkUlle29 g7ScWkuq8WHFjxFI5N8VYx + nvMH / AFMGl / c3 / ZNirv095g / 6mDS / ub / smxV36e8wf9TBpf3N / wBk 2Ku / T3mD / qYNL + 5v + ybFXfp7zB / 1MGl / c3 / ZNirv095g / wCpg0v7m / 7JsVd + nvMH / UwaX9zf9k2K u / T3mD / qYNL + 5v8AsmxV36e8wf8AUwaX9zf9k2Ku / T3mD / qYNL + 5v + ybFXfp7zB / 1MGl / c3 / AGTY q79PeYP + pg0v7m / 7JsVd + nvMH / UwaX9zf9k2Kpn5e1fU7nU0gvdXsbyORW4w29fULActqwp0APfF U81H + / X / AFB + s4qhcKHYq7FXYq7FXYqnmBKQebgxsoeK2Th2f + liVWP7LfZ5svxYqxLjN / vvy9 / y Mi / 6qYq7jN / vvy9 / yMi / 6qYq7jN / vvy9 / wAjIv8AqpiruM3 ++ / L3 / IyL / qpiruM3 ++ / L3 / IyL / qp iruM3 ++ / L3 / IyL / qpiruM3 ++ / L3 / ACMi / wCqmKu4zf778vf8jIv + qmKu4zf778vf8jIv + qmKu4zf 778vf8jIv + qmKu4zf778vf8AIyL / AKqYq7jN / vvy9 / yMi / 6qYq7jN / vvy9 / yMi / 6qYqnHlaItqoa WPSP3cbMhsGRpg2y1 + F2NKMa4qyLUf79f9QfrOKoXCh3KuxV2KuxV2Kp5gSkXmy2nurKFILGLUWW Wpjnk9MKOLfED6ke / wBOKsU / RGo / 9S5Y / wDSSP8AsrxV36I1H / qXLH / pJH / ZXirv0RqP / UuWP / SS P + yvFXfojUf + pcsf + kkf9leKu / RGo / 8AUuWP / SSP + yvFXfojUf8AqXLH / pJH / ZXirv0RqP8A1Llj / wBJI / 7K8Vd + iNR / 6lyx / wCkkf8AZXirv0RqP / UuWP8A0kj / ALK8Vd + iNR / 6lyx / 6SR / 2V4q79Ea j / 1Llj / 0kj / srxV36I1H / qXLH / pJH / ZXirv0RqP / AFLlj / 0kj / srxVN / LOn6ja6mssmjW1jEUZJJ 4ZvUYVFQKevJ1IHbFU / 1H + / X / UH6ziqFwodirsVdirsVdiqeYEpD5stRdWUKHTX1XjLX0o5TEV + F vi5AH5YqxX9DJ / 1Kdx / 0mN / zRirv0Mn / AFKdx / 0mN / zRirv0Mn / Up3H / AEmN / wA0Yq79DJ / 1Kdx / 0mN / zRirJf8AAfln / lmf / kbJ / wA1Yq7 / AAH5Z / 5Zn / 5Gyf8ANWKu / wAB + Wf + WZ / + Rsn / ADVirv8A Afln / lmf / kbJ / wA1Yq7 / AAH5Z / 5Zn / 5Gyf8ANWKu / wAB + Wf + WZ / + Rsn / ADVirv8AAfln / lmf / kbJ / wA1Yq7 / AAH5Z / 5Zn / 5Gyf8ANWKu / wAB + Wf + WZ / + Rsn / ADViqaaVoun6LHJFp8ZjSVgzgszVIFP2 icVWaj / fr / qD9ZxVC4UOxV2KuxV2KuxVPMCVC5vLOyQSXk8dsjHirSuqAnrQFiMVQ36e0L / q5Wn / ACPj / wCasVb / AE9ofX9JWn / I + P8A5qxVr9PaF / 1crT / kfH / zVirv09oX / VytP + R8f / NWKoyC4guo lntpEmievGSNgymhoaMtR1GKqmKuxV2KuxV2KuxV2KuxV2KpbqP9 + v8AqD9ZxVC4UOxV2KqT3NvH KkMkqJLJ9hGYBm / 1VJqcVVcVdiqeYEoW + 06x1KNYr + FbhEbkqvuAaUr + OKoL / Cnl3 / q3w / cf64q7 / Cvl3 / q3xfcf64q7 / Cnl3 / q3w / cf64q7 / Cnl3 / q3w / cf64qmNraW1jAlraRiGGOvFF6CpLH8Tiqt irsVdirsVdirsVdirsVdiqW6j / fr / qD9ZxVC4UOxV2KqEtnazTx3MsSvND / dueq / LFVfFXYqnmBL sVdirsVdirsVdirsVdirsVdirsVdirsVdirsVS3Uf79f9QfrOKoXCh3KuxV2KuxV2Kv / 2Q ==

application / pdf Библиотека Adobe PDF 7.0 Ложь конечный поток эндобдж 291 0 объект > / Кодировка >>>>> эндобдж 270 0 объект > эндобдж 271 0 объект > эндобдж 277 0 объект > эндобдж 278 0 объект > эндобдж 279 0 объект > эндобдж 280 0 объект > эндобдж 281 0 объект > эндобдж 282 0 объект > эндобдж 283 0 объект > эндобдж 284 0 объект > эндобдж 285 0 объект > эндобдж 286 0 объект > эндобдж 139 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] / ExtGState >>> / Тип / Страница >> эндобдж 141 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] / ExtGState >>> / Тип / Страница >> эндобдж 143 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] / ExtGState >>> / Тип / Страница >> эндобдж 145 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] / ExtGState >>> / Тип / Страница >> эндобдж 147 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] / ExtGState >>> / Тип / Страница >> эндобдж 148 0 объект > поток HUn @ | a b9 (MRj «RSUcR ܧ r8 ٭ 7 s; J9F {_es`Fp) yC7 ~ EjKm1Io} t | _51 @ ʸ» | $ Β1 «[GAB $ VB˴ ^ n6,; NL- p ~ 2b \ # cwAE = ~ kj UWPkT`Ң5fm: + 4XmLgN] RW &? WT3 ՚ A (̽loӚ (1.% QH w {Pkf ` ; wLICWo? | z 6T «; H $ Pf

d

3.2 Сравнение прокариотических и эукариотических клеток — Концепции биологии — 1-е канадское издание

К концу этого раздела вы сможете:

• Назовите примеры прокариотических и эукариотических организмов
• Сравнить и сопоставить прокариотические клетки и эукариотические клетки
• Опишите относительные размеры различных типов ячеек

Клетки делятся на две большие категории: прокариотические и эукариотические.Преимущественно одноклеточные организмы из доменов Бактерии и Археи классифицируются как прокариоты ( про — = раньше; — карион — = ядро). Клетки животных, клетки растений, грибы и простейшие являются эукариотами ( eu — = верно).

Все клетки имеют четыре общих компонента: 1) плазматическую мембрану, внешнее покрытие, которое отделяет внутреннюю часть клетки от окружающей среды; 2) цитоплазма, состоящая из желеобразной области внутри клетки, в которой находятся другие клеточные компоненты; 3) ДНК, генетический материал клетки; и 4) рибосомы, частицы, синтезирующие белки.Однако прокариоты несколько отличаются от эукариотических клеток.

Прокариотическая клетка — это простой одноклеточный (одноклеточный) организм, у которого отсутствует ядро ​​или любая другая мембраносвязанная органелла . Вскоре мы увидим, что у эукариот это значительно отличается. Прокариотическая ДНК находится в центральной части клетки: затемненной области, называемой нуклеоидом.

Рисунок 3.6. На этом рисунке показана обобщенная структура прокариотической клетки.

В отличие от архей и эукариот, бактерии имеют клеточную стенку из пептидогликана, состоящую из сахаров и аминокислот, а многие из них имеют полисахаридную капсулу (рис.6). Клеточная стенка действует как дополнительный слой защиты, помогает клетке сохранять свою форму и предотвращает обезвоживание. Капсула позволяет клетке прикрепляться к поверхностям в окружающей среде. У некоторых прокариот есть жгутики, пили или фимбрии. Жгутики используются для передвижения, в то время как большинство пилей используются для обмена генетическим материалом во время типа воспроизводства, называемого конъюгацией.

В природе взаимосвязь между формой и функцией очевидна на всех уровнях, включая уровень клетки, и это станет ясно, когда мы исследуем эукариотические клетки.Принцип «форма следует за функцией» встречается во многих контекстах. Например, птицы и рыбы имеют обтекаемые тела, которые позволяют им быстро перемещаться в среде, в которой они живут, будь то воздух или вода. Это означает, что, в общем, можно вывести функцию структуры, глядя на ее форму, потому что они совпадают.

Эукариотическая клетка — это клетка, которой имеет мембраносвязанное ядро ​​и другие мембраносвязанные компартменты или мешочки, называемые органеллами , которые выполняют специализированные функции.Слово эукариотическое означает «истинное ядро» или «истинное ядро», имея в виду присутствие в этих клетках связанного с мембраной ядра. Слово «органелла» означает «маленький орган», и, как уже упоминалось, органеллы обладают специализированными клеточными функциями, так же как органы вашего тела имеют специализированные функции.

При диаметре 0,1–5,0 мкм прокариотические клетки значительно меньше эукариотических клеток, диаметр которых варьируется от 10 до 100 мкм (рис. 3.7). Небольшой размер прокариот позволяет ионам и органическим молекулам, которые входят в них, быстро распространяться в другие части клетки.Точно так же любые отходы, образующиеся в прокариотической клетке, могут быстро уйти. Однако более крупные эукариотические клетки развили различные структурные адаптации для улучшения клеточного транспорта. Действительно, большой размер этих клеток был бы невозможен без этих приспособлений. В общем, размер ячейки ограничен , потому что объем увеличивается намного быстрее, чем площадь поверхности ячейки. По мере того, как ячейка становится больше, ячейке становится все труднее и труднее получать достаточное количество материалов для поддержки процессов внутри ячейки, потому что относительный размер площади поверхности, через которую должны транспортироваться материалы, уменьшается.

Рисунок 3.7 На этом рисунке показаны относительные размеры различных типов ячеек и клеточных компонентов. Взрослый человек показан для сравнения.

Прокариоты — это преимущественно одноклеточные организмы из доменов Бактерии и Археи. Все прокариоты имеют плазматические мембраны, цитоплазму, рибосомы, клеточную стенку, ДНК и не имеют мембраносвязанных органелл. У многих также есть полисахаридные капсулы. Прокариотические клетки имеют диаметр от 0,1 до 5,0 мкм.

Подобно прокариотической клетке, эукариотическая клетка имеет плазматическую мембрану, цитоплазму и рибосомы, но эукариотическая клетка обычно больше прокариотической клетки, имеет истинное ядро ​​(то есть ее ДНК окружена мембраной) и имеет другую мембрану. -связанные органеллы, которые позволяют разделить функции.Эукариотические клетки обычно в 10-100 раз больше прокариотических клеток.

эукариотическая клетка: клетка, которая имеет мембраносвязанное ядро ​​и несколько других мембраносвязанных компартментов или мешочков

Органелла : мембраносвязанный отсек или мешок внутри клетки

прокариотическая клетка: одноклеточный организм, не имеющий ядра или любой другой мембраносвязанной органеллы

Опосредованное гипоксией ацетилирование гистонов и экспрессия фактора транскрипции N-myc определяют агрессивность клеток нейробластомы

Введение

Нейробластома — эмбриональный рак постганглионарная симпатическая нервная система, которая чаще всего возникает в надпочечнике.Это самый частый злокачественный болезнь младенчества и является основной причиной смертности от новообразований. в этом возрасте (1). Эти опухоли биологически неоднородны, с популяциями клеток, различающимися по их генетические программы, стадия созревания и злокачественный потенциал. Поскольку клетки нейробластомы обладают способностью дифференцироваться спонтанно in vivo и in vitro (2) их гетерогенность может влиять на исход лечения, в частности ответ на индуцированный апоптоз химиотерапией. Нейробластома низкого риска — одна из редких человеческих злокачественные новообразования, которые, как известно, демонстрируют спонтанный регресс у младенцев от недифференцированного состояния до доброкачественного ганглионеврома, тогда как нейробластома высокого риска неуклонно растет и может быть быстро смертельным.Прогноз формы высокого риска этого тип рака плохой, так как лекарственная устойчивость возникает в большинство пациентов изначально хорошо реагируют на химиотерапию (3).

Примерно 40% пациентов, страдающих нейробластомы относятся к группе высокого риска. Неблагоприятные опухоли характеризуются структурными хромосомными изменениями, в том числе делеции 1p или 11q, несбалансированное усиление 17q и / или усиление протоонкогена N-myc. Среди них усиление N-myc является маркером нейробластомы высокого риска (3).Действительно, сверхэкспрессия N-myc в нейробластомы с усиленным N-myc связаны с плохой прогноз (3). Среди прогностических показатели нейробластомы, усиление N-myc сильно связаны с запущенными стадиями заболевания, быстрым прогрессированием опухоли и самый неблагоприятный исход болезни. Происходит амплификация N-myc в ~ 20-25% всех случаев нейробластомы, что приводит к Сверхэкспрессия N-myc как на уровне мРНК, так и на уровне белка (4,5). Однако высокий уровень N-myc выражение дает противоположные биологические последствия в нейробластома в зависимости от статуса гена N-myc.Действительно, высокий уровень экспрессии N-myc связан с благоприятным исход при нейробластоме без амплификации N-myc. Принужденный экспрессия N-myc значительно подавляет рост клетки нейробластомы, лишенные амплификации N-myc за счет индукции апоптоз и усиление благоприятной экспрессии гена нейробластомы. Следовательно, можно предположить, что экспрессия N-myc высокого уровня в нейробластоме без амплификации N-myc возникает доброкачественный фенотип (4). Тогда как Сверхэкспрессия N-myc в клетках нейробластомы с Амплификация N-myc вызывает злокачественный фенотип этих клетки нейробластомы (3), сверхэкспрессия других генов семейства Myc вызывает неограниченная пролиферация клеток, подавляет дифференцировку, клеточную рост, ангиогенез, уменьшает адгезию клеток, метастазирование и индуцирует геномная нестабильность (6).В человеческом клетки нейробластомы с индуцируемой экспрессией N-myc, N-myc увеличивает апоптоз, вызванный цитостатиками. Кроме того, клетки нейробластомы с амплификацией N-myc может сопротивляться лечению только при наличии дополнительной дисфункции в пути апоптоза (7). Другой механизм лекарственной устойчивости клеток нейробластомы, к которой N-myc может способствовать регулированию транспортера ABC гены (8).

Снижение нормального уровня кислорода в тканях напряжение, гипоксия, вызывает гибель клеток, если она тяжелая или длительная (9).В солидных опухолях это следствие структурно и функционально нарушенных микроциркуляция и ухудшение условий диффузии (10). Хотя гипоксия токсична для как раковые, так и нормальные клетки, раковые клетки подвергаются генетическому и адаптивные изменения, которые позволяют им выжить и даже размножаются в гипоксической среде (9). Таким образом, гипоксия опухоли тесно связан с прогрессированием опухоли и устойчивостью к химиотерапии. и лучевой терапии, и, таким образом, стала важной проблемой в опухолевой физиология и лечение рака (10).Однако механизмы, объясняющие как раковые клетки могут пережить гипоксию более эффективно, чем обычно клетки еще предстоит изучить.

Эпигенетическая структура ДНК в хроматине играет важную роль. роль в возникновении нейробластом (11). Динамическое образование ДНК не приводит только для транскрипции разных генов, но ДНК тоже больше доступны для химиотерапевтических препаратов, нацеленных на ДНК. Примерно 75 гены описаны как эпигенетически пораженные в нейробластоме ячейки (12). Гиперметилирование ДНК молчание генов обычно связано с обилием деацетилированные гистоны, другие важные участники эпигенетической механизмы (13).Действительно, гистоны являются ключевыми игроками в эпигенетике, и их статус диктует доступность хроматиновой ДНК для связывания факторов транскрипции регулирует транскрипцию ДНК (14).

Основные гистоны h4, h5, h3A и h3B, вокруг которых Обернутые 147 пар оснований ДНК преимущественно глобулярны, за исключением для их N-концевых хвостов, которые неструктурированы (15). Есть как минимум восемь различных виды модификаций. Один из важнейших гистонов модификации — ацетилирование остатков лизина, которое регулирует различные клеточные процессы, такие как транскрипция, репарация, репликация и конденсация ДНК (15).Ацетилирование гистонов регулируется равновесием двух групп ферментов: гистонацетилтрансферазы (HAT) и гистонов деацетилазы (HDAC) (13). Watson и др. показали значительные изменения в глобальных уровнях ацетилирование гистонов и метилирование ДНК в ответ на хроническое гипоксическое воздействие, когда клетки постоянно поддерживались на уровне 1% кислород, т. е. специально согласованный и устойчивый глобальный увеличивает ацетилирование h4K9 и метилирование ДНК в отсутствие фактор, индуцируемый гипоксией, фактор, индуцируемый гипоксией-1α (HIF-1α) (16).Следовательно, поскольку ацетилирование гистонов является важной эпигенетической меткой, на которую можно влиять гипоксией, исследование изменений уровней экспрессии ацетилированные гистоны h4 и h5 в клеточных линиях нейробластомы человека путем гипоксия — одна из целей настоящего исследования. Эффект гипоксия от количества белка HIF-1α также исследовалась. В кроме того, уровни белка N-myc и другого члена Семейство факторов транскрипции Myc, c-Myc, может быть под влиянием структуры хроматина, продиктованной ацетилирование гистонов h4 и h5 и привлечение других кофакторов для активировать экспрессию генов (17–19).Таким образом, в настоящем исследовании также изучалось влияние гипоксия на взаимосвязь между ацетилированием гистонов h4 и h5 и экспрессия N-myc и c-Myc в нейробластоме клетки. Поскольку гетерогенность клеток нейробластомы может влиять на их ответственность за гипоксию, три линии клеток нейробластомы были протестированы в настоящем исследовании: ячейка UKF-NB-3, UKF-NB-4 и SK-N-AS линии.

Материалы и методы

Химические вещества и материалы

смесь АА (акриламид: бисакриламид 29: 1), натрий бутират, дезоксихолат натрия, додецилсульфат натрия (SDS), 1,2-бис (диметиламино) этан (ТЕМЕД), полиоксиэтиленсорбитан монолаурат (Твин-20), пероксодисульфат аммония (APS) и глицин были приобретены у Sigma-Aldrich (St.Луис, Миссури, США). 4- (2-гидроксиэтил) -1-пиперазинэтансульфоновая кислота (HEPES), дитиотреитол (DTT), фенилметилсульфонилфторид (PMSF) были получено от Gibco-BRL (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США). Солевой раствор с фосфатным буфером (PBS), трипсин и SeeBlue® Предварительно окрашенный стандарт Plus2 был приобретен у Invitrogen (Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США). Гидрокарбонат натрия, хлористый водород и метанол были приобретены в компании Penta (Прага, г. Республика Чехия). Трис [1,1,1-трис (гидроксиметил) аминометан (TRIS)] был получен от Lachema (Брно, Чешская Республика).Промокание Обезжиренное сухое молоко Grade Blocker было приобретено в компании Bio-Rad. (Геркулес, Калифорния, США). Все эти и другие химические вещества, используемые в эксперименты были аналитической чистоты или выше.

Культуры клеток

Линии клеток нейробластомы человека UKF-NB-3 и UKF-NB-4 с амплификацией N-myc, полученный из кости метастазы нейробластомы высокого риска в костный мозг были подарком от Профессор Дж. Цинатль-младший (J.W., Университет Гете, Франкфурт, Германия). Клетки SK-N-AS с диплоидным статусом N-myc были приобретены в Американской коллекции типовых культур (ATCC, Манассас, Вирджиния, США).Клетки культивировали в модифицированном Iscove’s Dulbecco’s средний (IMDM) (Lonza, Базель, Швейцария), с добавлением 10% фетальная телячья сыворотка и 2 мМ L-глутамина (PAA Laboratories, Pasching, Австрия) при 37 ° C и 5% CO2. Для экспериментов с hypoxia, гипоксическая камера, приобретенная у Billups-Rothenberg (Del Мар, Калифорния, США) был приготовлен с атмосферой, содержащей 1% O2, 5% CO2 и 94% N2.

Оценка содержания ацетилированных гистоны h4 и h5 в клетках нейробластомы

Осадки

клеток ресуспендировали в 10 мМ буфере HEPES. pH 7.9, содержащий 1,5 мМ MgCl2, 10 мМ KCl, 0,5 мМ дитиотреитол и 1,5 мМ PMSF для подготовки кислотной экстракции белков, как указано в таблице данных по антителам против h5. К к каждому образцу добавляли соляную кислоту до конечной концентрации 0,2 М. Образцы инкубировали на льду в течение 30 мин и центрифугировали при 11000 × g в течение 10 мин при 4 ° C. Супернатант фракция, содержащая растворимые в кислоте белки, была подвергнута диализу. против 0,1 М уксусной кислоты, дважды по 1 ч, и против дистиллированная вода в течение 2 ч и на ночь.Концентрации белка были оценивается с помощью анализа белка DC (Bio-Rad) с сывороточным альбумином как стандарт. Были подвергнуты воздействию пяти и / или 15 мкг экстрагированных белков. к электрофорезу SDS-PAGE (20,21) на 17% гель для анализа ацетилирования гистона h4 и / или h5, соответственно. После миграции белки были перенесены в нитроцеллюлозную мембрану и инкубируют с 5% обезжиренным молоком для блокировки неспецифическое связывание. Затем мембраны подвергались воздействию специфических кроличьи поликлональные анти-h4 (1:10 000) и анти-h5 (1:20 000) (оба из Upstate, Lake Placid, NY, USA), антитела в течение ночи при 4 ° C.Мембраны промывали и подвергали воздействию анти-IgG, конъюгированных с пероксидазой. вторичные антитела (1: 3000) и комплекс антиген-антитело были визуализируется улучшенной системой обнаружения хемилюминесценции в соответствии с инструкциями производителя (Immun-Star HRP Substrate) (оба от Bio-Rad), используя рентгеновскую пленку от MEDIX XBU (Foma, Hradec Кралове, Чешская Республика). Антитело против актина (1: 1000; Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) использовали в качестве контроля загрузки.

Активность HAT и HDAC

Активность HAT и HDAC оценивали по инструкции производителя HAT Activity и HDAC Activity Наборы для колориметрического анализа (BioVision, Милпитас, Калифорния, США).Вкратце, 68 мкл смеси для анализа, содержащей 40 мкл буфера для анализа 2X HAT, 5 мкл HAT субстрат, 15 мкл субстрата HAT II и 8 мкл фермента, вырабатывающего НАДН добавляли 50 мкг ядерного экстракта в 40 мкл дистиллированной воды. Каждую лунку 96-луночного планшета перемешивали. Планшет инкубировали при 37 ° C в течение 1 ч, а затем считайте в считывающем устройстве для микропланшетов VersaMax ™. (Molecular Devices, Саннивейл, Калифорния, США) при 440 нм. В качестве альтернативы, 50–200 мкг ядерного экстракта разводили в 85 мкл дистиллированной вода. Десять микролитров аналитического буфера 10X HDAC и 5 мкл HDAC колориметрический субстрат добавляли в каждую лунку.После тщательного перемешивания, планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 1 ч. Реакция была остановили добавлением 10 мкл лизинового проявителя. После тщательного перемешивания планшет инкубировали при 37 ° C в течение 30 мин. Образцы считывали в планшете. ридер VersaMax ™ ридер для микропланшетов на 400 нм.

Оценка содержания HIF-1α, c-Myc и N-myc в клетках нейробластомы

Для определения экспрессии HIF-1α, c-Myc и Белки N-myc, клеточные осадки ресуспендировали в 25 мМ Трис-HCl. буфер pH 7,6, содержащий 150 мМ NaCl, 1% детергента Igepal® CA-630 (Sigma), 1% дезоксихолат натрия и 0.1% SDS и раствором Complete ™ (коктейль ингибиторов протеазы планшет; Roche, Базель, Швейцария) в концентрациях, описанных провайдер. Образцы инкубировали 60 мин на льду и после этого центрифугировали в течение 20 минут при 14000 × g и 4 ° C. Супернатант использовали для дополнительного анализа. Протеин концентрации оценивали с помощью анализа белка DC (Bio-Rad). с сывороточным альбумином в качестве стандарта. Затем 50 мкг экстрагированных белков подвергали электрофорезу SDS-PAGE на 11% геле для анализ экспрессии белков HIF-1α, c-Myc и N-myc.После миграции, белки были перенесены на нитроцеллюлозную мембрану и инкубировали с 5% обезжиренным молоком для блокирования неспецифического связывания. Затем мембраны подвергали воздействию специфических кроличьих поликлональных анти-HIF-1α (1: 3,000; Zymed Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США), кроличьи моноклональные анти-c-Myc (1: 500) антитела и к специфическим мышиные моноклональные анти-N-myc (1: 1000) (оба из Санта-Крус Biotechnology, Inc., Даллас, Техас, США) в течение ночи при 4 ° C. Мембраны промывали и подвергали воздействию анти-IgG, конъюгированных с пероксидазой. вторичные антитела (1: 3,000; Bio-Rad) и антиген-антитело комплекс был визуализирован с помощью усиленной детекции хемилюминесценции система в соответствии с инструкциями производителя (Immun-Star HRP Субстрат), используя рентгеновскую пленку от MEDIX XBU.Антитело против актина (1: 1000; Sigma) использовали в качестве контроля загрузки.

Анализ клеточного цикла

Для определения анализа распределения клеточного цикла, 5 × 105 клеток помещали в чашки диаметром 60 мм и обрабатывали. в условиях гипоксии в течение 24 ч. После обработки клетки были собраны трипсинизацией, окрашены набором реагентов DNA PREP (Beckmann Coulter, Фуллертон, Калифорния, США), содержащий реагент для проницаемости и раствор йодида пропидия с РНКазой, согласно инструкции производителя, и не менее 30 000 клетки анализировали проточной цитометрией на цитометре FACSCalibur. (BD, Сан-Хосе, Калифорния, США).Данные были проанализированы с помощью ModFit LT. программное обеспечение (Verity Software House, Топшам, Мэн, США).

Результаты и обсуждение

Влияние гипоксии на ацетилирование гистон h4 и h5 в клетках нейробластомы

Эпигенетические процессы вовлечены в причинно-следственную связь и прогрессирование многих видов злокачественных новообразований, включая нейробластому. Поэтому мы решили изучить, насколько часто возникают государства в области неоплазии, гипоксия влияет на белки, связанные с хроматином и посттрансляционные модификации гистонов регулируются транскрипция.Используя вестерн-блоттинг, разные уровни ацетилированные гистоны h4 и h5 в индивидуальной нейробластоме человека клеточные линии, культивируемые в нормоксических или гипоксических условиях (1% O2). Выращивание протестированной нейробластомы. клетки в течение 6, 12, 24 или 48 ч в условиях гипоксии повышали ацетилирование гистон h5 в клеточных линиях UKF-NB-3 и UKF-NB-4, линии, полученные из нейробластом высокого риска с амплификацией N-myc. В В отличие от этих результатов, снижение уровня гистона h5 ацетилирование после 24 ч воздействия гипоксии обнаружено у Клеточная линия нейробластомы SK-N-AS, имеющая диплоидный статус N-myc.Следовательно, можно предположить, что увеличение ацетилирования гистон h5 связан с амплификацией N-myc. Ацетилирование единственный гистон h4 был увеличен в условиях гипоксии в Клеточная линия UKF-NB-3. За исключением 48-часовой гипоксии, когда ацетилирование гистона h4 было увеличено в UKF-NB-4 и SK-N-AS, почти никаких изменений ацетилирования гистона h4 не производилось гипоксия в клетках UKF-NB-4 и SK-N-AS (рис. 1).

Активность HAT и HDAC

Хотя деятельность HAT была незначительно снижается при 24-часовом культивировании клеток UKF-NB-3 и SK-N-AS при гипоксии, влияния таких условий выращивания на эти ферменты в клеточной линии UKF-NB-4.Кроме того, по сути, нет различия в активности HDAC были вызваны гипоксией в протестированные клетки нейробластомы (рис. 2). Эти данные свидетельствуют о том, что повышенное ацетилирование гистоны h4 и h5 в клетках нейробластомы UKF-NB-3 и UKF-NB-4 и снижение ацетилирования гистонов в клетках SK-N-AS (см. Рис.1) напрямую не подключается с активностью этих ферментов и следует из других, все же неизвестен, механизм (ы).

Гипоксия влияет на экспрессию N-myc но не c-Myc в клетках нейробластомы

Обнаружены различные уровни белка N-myc в любой из исследованных клеточных линий нейробластомы, культивируемых как в условиях гипоксические и нормоксические (стандартные) состояния.Из всех протестированных ячеек линий, культивируемых в стандартных условиях, N-myc белок экспрессировался в определяемых количествах только в UKF-NB-4 клетки (рис. 3). Однако гипоксический условия культивирования клеток нейробластомы (24 ч) привело к увеличению экспрессии белка этой транскрипции фактора в этих клетках нейробластомы и даже в экспрессии этого белок в клетках UKF-NB-3. Однако белок N-myc был не обнаруживается в линейке SK-N-AS, ни в нормоксии, ни в гипоксия. Повышенный уровень протоонкогена N-myc белок, опосредованный гипоксией в нейробластомах UKF-NB-3 и UK-NB-4 клеточные линии с амплификацией N-myc были параллельны с увеличение ацетилирования гистона h5 в этих клетках (ср. рис.1 и 3). Ацетилирование остатка лизина гистона приводит к снижению взаимодействия между отдельными волокнами хроматина а также к деконденсации хроматина и повышенной доступности ДНК в транскрипционный аппарат из-за разматывания ДНК (22). Эти результаты показывают, что гипоксия вызывает усиление активации транскрипции генов в клетки нейробластомы с амплификацией N-myc. С N-myc также активирует и подавляет экспрессию несколько miRNA и длинные некодирующие РНК, которые играют важную роль при прогрессировании нейробластомы (23), увеличение его экспрессии может быть связано с высшими агрессивное свойство этих клеток нейробластомы.Действительно, независимо от условий культивирования клеток N-myc отсутствует. экспрессия была обнаружена вестерн-блоттингом в клеточной линии SK-N-AS. в котором отсутствовала амплификация N-myc. Можно предположить, что вовлечено повышенное ацетилирование гистона h5, вызванное гипоксией при прогрессировании рака клеток нейробластомы с N-myc усиление. Поскольку большинство опухолей содержат гипоксическую зону, N-myc сверхэкспрессия, вызванная гипоксией, может снизить ответ нейробластома с амплификацией N-myc до химиотерапии.

В отличие от белка N-myc практически отсутствует различия в экспрессии белка c-Myc были обнаружены в клетки нейробластомы, культивируемые в нормоксических или гипоксических условиях (Рисунок.3), что соответствует выводы Хуанга и др., которые обнаружили обратную зависимость между экспрессией N-myc и c-Myc в различных клеточные линии, происходящие от нейробластомы, и что как N-myc, так и Сверхэкспрессия c-Myc ускоряет опухолевые клетки пролиферация и онкогенез напрямую через ИМТ1 (онкоген поликомбового безымянного пальца) транскрипция гена (24).

Влияние гипоксии на белок HIF-1α экспрессия в клетках нейробластомы

Фактор транскрипции HIF-1α является ключевым медиатором клеточный ответ на гипоксию, влияющий на экспрессию многих генов которые могут ингибировать апоптоз (25).Хотя HIF-1β конститутивно экспрессируется в ядре, HIF-1α поддерживается на низком уровне в нормоксических условиях (26). В присутствии кислорода HIF-1α субъединицы подвергаются гидроксилированию кислородзависимым пролилом гидроксилазы, позволяющие связываться с фон Хиппель-Линдау (VHL) белок и нацеливание на убиквитинирование и деградацию (27). Сверхэкспрессия белка HIF-1α имеет были описаны при многих различных типах злокачественных новообразований человека, но не в доброкачественных опухолях или нормальных тканях (28,29).Кроме того, сверхэкспрессия HIF-1α коррелирует с p53. накопление, пролиферация клеток и прямая активация сосудов промотор фактора роста эндотелия (VEGF), который предполагает важность роль HIF-1α в прогрессировании рака (28,30). Как и в других опухолях, была обнаружена сверхэкспрессия белка HIF-1α. во всех клеточных линиях нейробластомы, протестированных в этом исследовании, с самый высокий — в клеточной линии SK-N-AS. Только небольшое увеличение уровни белка HIF-1α были обнаружены через 6 ч культивирования всех тестировали клетки нейробластомы при гипоксии, но с более длительными интервалами (12, 24 и 48 ч) такого увеличения не наблюдалось (рис.1).

Гипоксия влияет на распределение клеточного цикла клеток нейробластомы

Распределение клеточного цикла протестированной нейробластомы клетки, измеренные с помощью проточной цитометрии, были слегка изменены кислородом депривация (1% O2, в течение 24 часов) по сравнению с ячейкой цикл распределения клеток, культивируемых по стандарту (аэробный) условий (рис. 4). Увеличение фазы G0 / G1 с одновременным уменьшением фазы S клеточный цикл продуцировали путем культивирования всех протестированных человеческих клетки нейробластомы в течение 24 ч в условиях гипоксии.это очевидно, что раковые клетки культивируются при низком уровне кислорода (1% O2) требуется больше времени для перехода в фазу S клеточный цикл. Это может быть следствием смещения ячейки метаболизм с окислительного на анаэробный. Известно, что анаэробный метаболизм менее эффективен в производстве энергии необходим для биосинтеза компонентов ДНК, таких как дезоксинуклеозидтрифосфаты, необходимые для биосинтеза ДНК в S фаза клеточного цикла. Другой механизм снижения пролиферация при гипоксии — это эффект HIF-1α, который ингибирует ДНК репликация и вызывает остановку клеточного цикла в различных типах клеток (31).

В заключение, в настоящем исследовании мы имеем продемонстрировали, что гипоксический стресс повышает уровень ацетилированного гистоны h4 и h5 в UKF-NB-3 и гистоны h5 в UKF-NB-4 линии клеток нейробластомы, полученные из нейробластомы высокого риска, обе линии клеток, обладающие амплификацией N-myc. В отличие, практически не было обнаружено изменений ацетилирования этих гистонов в Клеточная линия нейробластомы SK-N-AS с диплоидным N-myc статус.

Ацетилирование гистонов, индуцированное гипоксией в испытанных линии клеток нейробластомы не были связаны с экспрессией фактор транскрипции HIF-1α в этих клетках или с изменениями HAT и деятельность HDAC.Хотя белок HIF-1α был сверхэкспрессирован в все линии клеток нейробластомы, протестированные в этом исследовании, по существу не различия в его выражении были вызваны гипоксией. Отметить, самые высокие уровни белка HIF-1α были обнаружены в SK-N-AS клетки нейробластомы.

Повышение ацетилирования гистона h5, опосредованное гипоксия в клеточных линиях нейробластомы UKF-NB-3 и UKF-NB-4. параллельно с повышенным уровнем протоонкогена N-myc экспрессия белка в этих клетках нейробластомы с N-myc усиление.Кроме того, экспрессия этого белка не наблюдалась. обнаруживается в клеточной линии нейробластомы SK-N-AS, линия с диплоидный статус N-myc. Эти данные позволяют предположить, что ацетилирование гистона h5 в клетках нейробластомы N-myc амплификация определяет экспрессию фактора транскрипции N-myc. Результаты, показывающие индуцированное гипоксией увеличение уровни ацетилирования гистонов, обнаруженные в этом исследовании в UKF-NB-3 и Клетки нейробластомы UKF-NB-4 являются противоположностью продемонстрированным Ли и Коста (19), которые исследовали влияние гипоксии на клетки карциномы легких человека A549.Эти авторы обнаружили, что воздействие гипоксии на эту линию раковых клеток вызывает снижение ацетилирования гистонов h4 и h5. Более того, авторы показали, что пониженный уровень c-Myc экспрессия соответствовала влиянию гипоксии на глобальные ацетилирование гистона h5 в клетках A549 (19). Эти выводы, которые отличаются из обнаруженных в настоящем исследовании, может быть вызвано используемые ими раковые клетки другого типа, карцинома легкого человека A549 клетки, в которых отсутствует амплификация N-myc.Уменьшение в ацетилировании h4 и h5 гипоксией при нейробластоме SK-N-AS клеток, линия без амплификации N-myc, также наблюдалась в данном исследовании.

Результаты настоящего исследования показывают, что понимание изменений уровней ацетилированных гистонов h4 и h5 и Белок N-myc, образующийся при гипоксическом стрессе у исследованных клеточные линии нейробластомы могут быть важны для частичного объяснения агрессивного свойства этих клеток. Это верно преимущественно для клеток нейробластомы UKF-NB-4 линия с Амплификация N-myc и высокая экспрессия P-гликопротеина, что был приготовлен из химиорезистентного рецидива (32,33).Белок N-myc сверхэкспрессируется в этих клетках и даже индуцированная гипоксией в этих клетках и клетках UKF-NB-3. Повышенный ацетилирование гистонов позволяет N-myc легко связываться с ДНК, тем самым вызывая эффективные процессы транскрипции, приводящие к наконец, в ускоренном росте и пролиферации клеток. Следовательно, среди генетических изменений, которые позволяют клеткам нейробластомы высокого риска с амплификацией N-myc, чтобы выжить при гипоксии и эффективно расти и размножаться в этих условиях, может быть высокая экспрессия протоонкогена N-myc и его индукция гипоксия.

Благодарности

Настоящее исследование поддержано GACR. (P301 / 10/0356), Карлов университет в Праге (635712/2012, 620612/2012 и UNCE 204025/2012) и MH CZ-DRO, Университет Больница Мотол, Прага, Чехия 00064203.

Список литературы

1	Марис Дж. М. и Маттай К. К.: Молекулярная биология нейробластомы. J Clin Oncol. 17: 2264–2279. 1999 г., PubMed / NCBI
2	Моргенштерн Б.З., Кривошик А.П., Родригес В. и Андерсон PM: опухоль Вильмса и нейробластома.Acta Paediatr Дополнение 93: 78–85. 2004 г.
3	Brodeur GM: Нейробластома: биологическая. понимание клинической загадки. Nat Rev Рак. 3: 203–216. 2003 г. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
4	Тан ХХ, Чжао Х, Кунг Би, Ким Д.Й., Хикс С.Л., Кон С.Л., Чунг Н.К., Сигер Р.К., Эванс А.Е. и Икегаки Н. Загадка MYCN : значение экспрессии MYCN в нейробластома.Cancer Res. 66: 2826–2833. 2006 г., PubMed / NCBI
5	Lutz W и Schwab M: регуляция in vivo единственная копия и амплифицированный N- myc в нейробластоме человека клетки. Онкоген. 15: 303–315. 1997. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
6	Вестерманн Ф., Мут Д., Беннер А., Бауэр Т., Генрих К.О., Обертюр А, Брорс Б, Бейсбарт Т., Вандесомпеле Дж., Паттин Ф., Герой Б, Кёниг Р., Фишер М. и Шваб М.: Отлично транскрипционная активность MYCN / c-MYC связана с спонтанный регресс или злокачественное прогрессирование нейробластом.Genome Biol. 9: R1502008. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
7	Фульда С., Лутц В., Шваб М. и Дебатин К.М.: MycN сенсибилизирует клетки нейробластомы для лекарственного апоптоза. Онкоген. 18: 1479–1486. 1999. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
8	Порро А, Хабер М, Диолаити Д, Ираси Н, Хендерсон М., Герарди С., Валли Э., Муньос М.А., Сюэ С., Флемминг К., Schwab M, Wong JH, Marshall GM, Della Valle G, Norris MD и Perini G: прямая и координированная регуляция АТФ-связывающей кассеты. гены-переносчики с помощью факторов Myc генерируют специфическую транскрипцию сигнатуры, которые существенно влияют на фенотип химиорезистентности раковых клеток.J Biol Chem. 285: 19532–19543. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar
9	Харрис А.Л .: Гипоксия — ключевой регулятор фактор роста опухоли. Nat Rev Рак. 2: 38–47. 2002. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
10	Хёкель М. и Ваупель П. Гипоксия опухоли: определения и текущие клинические, биологические и молекулярные аспекты. J Natl Cancer Inst. 93: 266–276. 2001 г.PubMed / NCBI
11	Furchert SE, Lanvers-Kaminsky C, Juürgens H, Jung M, Loidl A и Frühwald MC: ингибиторы гистона деацетилазы как потенциальные терапевтические инструменты для эмбриональных опухоли нервной системы детского возраста. Int J Cancer. 120: 1787–1794. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
12	Decock A, Ongenaert M, Vandesompele J и Speleman F: Эпигенетика нейробластомы: от гена-кандидата подходы к полногеномному скринингу.Эпигенетика. 6: 962–970. 2011 г. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
13	Сантини V, Гоццини А и Феррари G: Ингибиторы гистондеацетилазы: молекулярная и биологическая активность в качестве предпосылки для клинического применения. Curr Drug Metab. 8: 383–393. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
14	Портела А и Эстеллер М: эпигенетика модификации и болезни человека.Nat Biotechnol. 28: 1057–1068. 2010. Просмотр Статья: Google Scholar: PubMed / NCBI
15	Kouzarides T: Модификации хроматина и их функция. Клетка. 128: 693–705. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
16	Уотсон Дж. А., Уотсон С. Дж., МакКрохан А. М., Woodfine K, Tosetto M, McDaid J, Gallagher E, Betts D, Baugh J, О’Салливан Дж., Мюррелл А., Уотсон Р.В. и Макканн А. эпигенетическая подпись хронической гипоксии в клетках простаты.Хум Мол Genet. 8: 3594–3604. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
17	Франк С.Р., Шредер М., Фернандес П., Тауберт С. и Амати Б. Связывание c-Myc с хроматином опосредует митоген-индуцированное ацетилирование гистона h5 и активация гена. Genes Dev. 15: 2069–2082. 2001. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
18	Фрэнк С.Р., Паризи Т., Тауберт С., Фернандес P, Fuchs M, Chan HM, Livingston DM и Amati B: MYC нанимает Комплекс гистонацетилтрансферазы TIP60 с хроматином.EMBO Rep. 4: 575–580. 2003. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
19	Ли Кью и Коста М: c-Myc выступает посредником вызванное гипоксией снижение ацетилированного гистона h5. Биохимия. 91: 1307–1310. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
20	Stiborová M, Martínek V, Rýdlová H, Hodek П и Фрей Э: Судан I является потенциальным канцерогеном для человека: доказательства его метаболической активации и детоксикации человеком рекомбинантный цитохром P450 1A1 и микросомы печени.Cancer Res. 62: 5678–5684. 2002.
21	Полякова Дж., Экшлагер Т., Кизек Р., Фрей E и Stiborová M: Электрохимическое определение ферментов метаболизирует эллиптицин в клетках рака щитовидной железы — инструмент для объяснить механизм токсичности эллиптицина для этих клеток. Int J Electrochem Sci. 8: 1573–1585. 2013.
22	Кишечник P и Вердин E: связь хроматина регуляция и промежуточный обмен веществ.Природа. 502: 489–498. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
23	Бюхнер Дж. И Эйнвик К.: N-myc и некодирующие РНК в нейробластоме. Mol Cancer Res. 10: 1243–1253. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
24	Хуанг Р., Чунг Н.К., Видер Дж., Чунг И.Ю., Джеральд В.Л., Tickoo SK, Holland EC и Blasberg RG: MYCN и MYC регулируют пролиферацию опухолей и туморогенез напрямую через ИМТ1 в нейробластомах человека.FASEB J. 25: 4138–4149. 2011 г. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
25	Лю XH, Yu EZ, Li YY и Kagan E: HIF-1α оказывает антиапоптотическое действие на эпителий дыхательных путей человека, т.е. опосредовано экспрессией гена Mcl-1. J Cell Biochem. 97: 755–765. 2006.
26	Ван Г.Л., Цзян Б.Х., Рю Э.А. и Семенца Г.Л .: Фактор 1, индуцируемый гипоксией, представляет собой PAS-базис-спираль-петля-спираль. гетеродимер регулируется клеточным натяжением O 2 .Proc Natl Acad Sci USA. 92: 5510–5514. 1995. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
27	Adamski J, Price A, Dive C и Makin G: Вызванная гипоксией устойчивость к цитотоксическим препаратам при остеосаркоме независимо от HIF-1Alpha. PloS One. 8: e653042013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
28	Чжун Х., Де Марсо А.М., Лохнер Э., Лим М., Hilton DA, Zagzag D, Buechler P, Isaacs WB, Semenza GL и Simons JW: Сверхэкспрессия индуцируемого гипоксией фактора 1α у обычных людей. раковые заболевания и их метастазы.Cancer Res. 59: 5830–5835. 1999.
29	Talks KL, Терли H, Гаттер KC, Максвелл PH, Пью К.У., Рэтклифф П.Дж. и Харрис А.Л .: Выражение и распределение индуцируемых гипоксией факторов HIF-1α и HIF-2α в нормальные человеческие ткани, рак и макрофаги, ассоциированные с опухолью. Являюсь J Pathol. 157: 411–421. 2000.
30	Квон Х.Дж., Ким М.С., Ким М.Дж., Накадзима Х. и Ким К.В.: Ингибитор гистондеацетилазы FK228 подавляет опухоль. ангиогенез.Int J Cancer. 97: 290–296. 2002. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
31	Хубби М.Э., Кшитиз, Гилкс Д.М., Рей С., Вонг CC, Луо В., Ким Д.Х., Данг К.В., Левченко А. и Семенза Г.Л .: А. нетранскрипционная роль HIF-1α как прямого ингибитора ДНК репликация. Sci Signal. 6: ra102013.
32	Бедрничек Я., Вича А, Яросова М, Holzerova M, Cinatl J Jr, Michaelis M, Cinatl J и Eckschlager T: Характеристика устойчивых к лекарственным средствам клеточных линий нейробластомы с помощью сравнительная геномная гибридизация.Новообразования. 52: 415–419. 2005. PubMed / NCBI
33	Полякова Ю., Хребакова Ю., Дворакова М., Мосерова М., Экшлагер Т., Храбета Дж., Гёттличерова М., Копейткова Б. No related posts. alexxlab Добавить комментарий Отменить ответ Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены * Комментарий * Имя * Email * Сайт